M期细胞变圆, 附着力减弱 振荡分离M期细胞 直接用于M期细胞 分析,或继续培养, 获得其他时期的 同步化细胞 图11-5 从培养细胞中收集M期细胞的同步化方法 人工选择同步化 主讲:汤华
主讲:汤 华 人工选择同步化
DNA合成阻断法 采用DNA合成抑制剂,特异性地抑制DNA合成,将细胞 抑制在S期或G1/S交界处。 目前采用最多的DNA合成抑制剂为TR(胸腺嘧啶脱氧 核苷)和羟基脲。 ?优点是同步化效率高。缺点是诱导过程可造成细胞非均 衡生长。 ● 图11-6应用过量的TdR阻断法进行细胞周期同步化 A:处于对数生长期的细胞;B:第一次加入TR,所有处于S期的细胞立即被抑制,其 他细胞运行到G,/S交界处被抑制:C:将TR洗脱,解除抑制,被抑制的细胞沿细胞 周期运行:D在解除抑制的细胞到达G1期终点前,第二次加人TR并继续培养,所有 的细胞被抑制在G1S交界处 主讲:汤华
主讲:汤 华 DNA合成阻断法 采用DNA合成抑制剂,特异性地抑制DNA合成,将细胞 抑制在S期或G1/S交界处。 目前采用最多的DNA合成抑制剂为TdR(胸腺嘧啶脱氧 核苷)和羟基脲。 优点是同步化效率高。缺点是诱导过程可造成细胞非均 衡生长
分裂中期阻断法 冬秋水仙素、秋水酰胺等药物,可以抑制微管聚合,使 细胞不能形成纺锤体,将细胞阻断在细胞分裂中期。 优点是操作简便,效率高。 冬缺点是这些药物的毒性相对较大。 主讲:汤华
主讲:汤 华 秋水仙素、秋水酰胺等药物,可以抑制微管聚合,使 细胞不能形成纺锤体,将细胞阻断在细胞分裂中期。 优点是操作简便,效率高。 缺点是这些药物的毒性相对较大。 分裂中期阻断法
特异的细胞周期 1.早期胚胎细胞的细胞周期 细胞分裂快,无G1期,G2期非常短,S期也短,以至于认为仅 含有S期和M期。无需临时合成其它物质,子细胞在G1、G2期 并不生长,继续分裂,越分裂体积越小。 G2 图11-7 非洲爪蟾体细胞,周期和早期胚胎细胞周期比较 A:体细胞标准细胞周期;B:早期胚胎细胞周期 主讲:汤华
主讲:汤 华 特异的细胞周期 1.早期胚胎细胞的细胞周期 细胞分裂快,无G1期, G2期非常短,S期也短,以至于认为仅 含有S期和M期。无需临时合成其它物质,子细胞在G1、G2期 并不生长,继续分裂,越分裂体积越小
W 2.酵母细胞的细胞周期 酵母细胞周期明显特点:酵母细胞周期持续时间较短; 封闭式细胞分裂,即细胞分裂时核膜不解聚;纺锤体位于 细胞核内;在一定环境下,也进行有性繁殖。 3.植物细胞的细胞周期 冬植物细胞不含中心体,但在细胞分裂时可以正常组装纺 锤体。 冬植物细胞以形成中间板的形式进行胞质分裂。 主讲汤华
主讲:汤 华 2.酵母细胞的细胞周期 酵母细胞周期明显特点:酵母细胞周期持续时间较短; 封闭式细胞分裂,即细胞分裂时核膜不解聚;纺锤体位于 细胞核内;在一定环境下,也进行有性繁殖。 植物细胞不含中心体,但在细胞分裂时可以正常组装纺 锤体。 植物细胞以形成中间板的形式进行胞质分裂。 3.植物细胞的细胞周期