places)。若要对结果重新编辑或进行修改，选中结果，点击Properties即进入编辑界面。设置完成后，点击ok确认，返回方法编辑主界面，将新编辑的方法保存。注：在方法编辑主界面上方工具栏中，可用File-Open，打开原有方法。打开方法后，可按上述步骤对其进行修改。（5）工作平台Workplace点击主界面左侧Workplace，进入工作平台，工作平台显示4个窗口。右上方窗口RUN，在Sampledate一method中选择需要调用的方法。选中的方法会在左上方窗口中显示，双击相关框，可查看方法的详细信息。在右上方窗口中，还可输入样品相关信息。完成后，在StatuS显示为READY，则表明相关设置已正确，可进行滴定操作。点击START，仪器按所选方法开始滴定。整个滴定过程，可在右下方Livedisplay窗口中看到，可显示滴定的动态变化曲线。滴定结束后，滴定结果报告将在左下方Repor窗口中显示Cstt4S售+T+owen9:SHRE（7）数据库Datebase点击主界面左侧Datebase，进入数据库界面，鼠标左键单击选中结果，下方三个窗口中将显示有关此结果的所有详细信息。下左窗口为滴定曲线，下中窗口为方法、设备、传感器、样品等详细信息，下右窗口为终点结果。在下左滴定曲线窗口中，鼠标右键单击，出现下拉菜单，选择Measuringpointlist，跳出对话框可将数据输出。五、数据处理1.根据导出的数据得到滴定曲线及微分曲线，计算样品的浓度。2.计算三种固体酸溶液的pH值。六、思考题1.酸碱滴定剂的标定药品分别是什么？2.草酸虽然是二元酸，但为什么只能得到一个滴定终点？3.影响此次酸碱滴定准确性的因素有哪些？注意事项电极是玻璃电极，其感应膜非常薄，使用要格外小心。6 /31
6 / 31 places）。若要对结果重新编辑或进行修改，选中结果，点击 Properties 即进入编辑界面。 设置完成后，点击 ok 确认，返回方法编辑主界面，将新编辑的方法保存。 注：在方法编辑主界面上方工具栏中，可用 File-Open，打开原有方法。打开方法后，可按 上述步骤对其进行修改。 （5）工作平台 Workplace 点击主界面左侧 Workplace，进入工作平台，工作平台显示 4 个窗口。右上方窗口 RUN， 在 Sample date—method 中选择需要调用的方法。选中的方法会在左上方窗口中显示，双击 相关框，可查看方法的详细信息。在右上方窗口中，还可输入样品相关信息。完成后，在 Status 显示为 READY，则表明相关设置已正确，可进行滴定操作。点击 START，仪器按所 选方法开始滴定。整个滴定过程，可在右下方 Live display 窗口中看到，可显示滴定的动态 变化曲线。滴定结束后，滴定结果报告将在左下方 Repor 窗口中显示 （7）数据库 Datebase 点击主界面左侧 Datebase，进入数据库界面，鼠标左键单击选中结果，下方三个窗口中， 将显示有关此结果的所有详细信息。下左窗口为滴定曲线，下中窗口为方法、设备、传感器、 样品等详细信息，下右窗口为终点结果。 在下左滴定曲线窗口中，鼠标右键单击，出现下拉菜单，选择 Measuring point list，跳 出对话框可将数据输出。 五、数据处理 1．根据导出的数据得到滴定曲线及微分曲线，计算样品的浓度。 2. 计算三种固体酸溶液的pH值。 六、思考题 1. 酸碱滴定剂的标定药品分别是什么？ 2. 草酸虽然是二元酸，但为什么只能得到一个滴定终点？ 3. 影响此次酸碱滴定准确性的因素有哪些？ 注意事项 电极是玻璃电极，其感应膜非常薄， 使用要格外小心
气相色谱法定性鉴定蜜蜂信息素（2-庚酮）实验目的一.1.了解气相色谱的结构、工作原理。2.熟悉气相色谱的仪器操作。3.了解气相色谱定性和定量分析的基本方法。二。实验原理利用试样中各组分在色谱柱中的气相和固定液液相的分配系数不同，当气化后的试样被载气带入色谱柱中运行时，组份就在其中的两相间进行反复多次（103-10°次）的分配（吸附-脱附或溶解-放出）。由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同（即保留时间不同），因此各组份在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定的柱长后，便彼此分离，顺序离开色谱柱进入检测器，产生的离子流信号经放大后，在记录仪上描绘出各组份的色谱峰。利用保留值（tM）定性：在一定得色谱条件下，各组份都有其特定的保留值。因此可以作为定性鉴定的依据。通常在相同的色谱条件下，用标准样品作对照，根据同一样品在相同的色谱条件下，保留值一致的原则进行定性分析。必须多次改变实验条件，当被测组分和标准样品仍具有相同保留值的情况下，才可视为是同一组分。绝对保留值（tm）受操作条件的影响较大，而用相对保留值（ris），只与柱温和固定相的性质有关，与柱长、柱内径、填充情况及载气流速等的变化无关，因此用它来定性比较可靠。相对保留值（ris）的定义：在一定色谱条件下，待测组分i与基准物质s的调整保留值之比。注意事项：有些物质在相同色谱条件下往往具有相近甚至相同的保留值，对复杂样品定性鉴定时，仅利用保留值定性十分困难且不可靠，要采用更为有效的方法，如GC-MS，LC，LC-MS等方法进行定性鉴定。三仪器1.气相色谱仪1台2.色谱柱TM-130m×0.25mm(ID)×10μm一根3.氢气发生器QL-500型1台：氢气钢瓶一只：空气钢瓶一只4.微量注射器1ul一支5.溶剂及样品无水乙醇，庚酮-2，蜜蜂信息素合成物四．实验条件1.固定相5% diphenyl, 95% dimethyl poliloxane2.流动相高纯氮气为载气，流量15ml/min；3.柱子TM-14.汽化温度180℃7/31
7 / 31 气相色谱法定性鉴定蜜蜂信息素（2-庚酮） 一． 实验目的 1. 了解气相色谱的结构、工作原理。 2. 熟悉气相色谱的仪器操作。 3. 了解气相色谱定性和定量分析的基本方法。 二． 实验原理 利用试样中各组分在色谱柱中的气相和固定液液相的分配系数不同，当气化后的试样被 载气带入色谱柱中运行时，组份就在其中的两相间进行反复多次（103 -106 次）的分配（吸 附-脱附或溶解-放出）。由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同（即保留时间不同），因 此各组份在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定的柱长后，便彼此分离，顺序离开色谱柱 进入检测器，产生的离子流信号经放大后，在记录仪上描绘出各组份的色谱峰。 利用保留值（tM）定性：在一定得色谱条件下，各组份都有其特定的保留值。因此可以作为 定性鉴定的依据。通常在相同的色谱条件下，用标准样品作对照，根据同一样品在相同的色 谱条件下，保留值一致的原则进行定性分析。必须多次改变实验条件，当被测组分和标准样 品仍具有相同保留值的情况下，才可视为是同一组分。 绝对保留值（tM）受操作条件的影响较大，而用相对保留值（ris），只与柱温和固定相 的性质有关，与柱长、柱内径、填充情况及载气流速等的变化无关，因此用它来定性比较可 靠。 相对保留值（ris）的定义：在一定色谱条件下，待测组分 i 与基准物质 s 的调整保留值 之比。 注意事项：有些物质在相同色谱条件下往往具有相近甚至相同的保留值，对复杂样品定 性鉴定时，仅利用保留值定性十分困难且不可靠，要采用更为有效的方法，如 GC-MS，LC， LC-MS 等方法进行定性鉴定。 三． 仪器 1. 气相色谱仪 1 台 2. 色谱柱 TM-1 30m ×0.25mm(ID)×10µm 一根 3. 氢气发生器 QL-500 型 1 台；氢气钢瓶 一只；空气钢瓶 一只 4. 微量注射器 1µl 一支 5. 溶剂及样品 无水乙醇，庚酮-2，蜜蜂信息素合成物 四． 实验条件 1. 固定相 5% diphenyl，95% dimethyl poliloxane 2. 流动相 高纯氮气为载气，流量 15ml/min； 3. 柱子 TM-1 4. 汽化温度 180℃
5.柱温150℃6.检测器FID(氢火焰离子化检测器)7.检测器温度180℃8.进样量0.5μl实验步骤五．1.开气源：开启载气即氮气钢瓶开关，减压阀输出压力为0.2Mpa；开启空气钢瓶开关，减压阀输出压力为0.6Mpa；打开氢气发生器开关。2.打开主机电源，打开电脑及软件；选择FID(氢火焰检测器)检测通道：点火。3.在主机面板上设置参数：气化室温度180℃；柱温150℃；检测器温度180℃。4.在软件上测试设置方法，文件名及保存路径。5.待仪器基线平稳后，可进行进样分析。6.分别用标准物、合成物和无水乙醇进样，每个样品进样两次：记录保留时间。六．数据处理1.实验条件记录。2.各物质色谱图中各组份的保留时间。七思考题1.利用保留值进行定性分析的依据是什么？2.利用保留值进行定性分析为什么必须严格控制色谱条件不变？3.利用ris进行定性时应注意些什么？4.何为色谱柱老化，柱子老化时要注意哪些问题？8/31
8 / 31 5. 柱温 150℃ 6. 检测器 FID(氢火焰离子化检测器) 7. 检测器温度 180℃ 8. 进样量 0.5µl 五． 实验步骤 1. 开气源：开启载气即氮气钢瓶开关，减压阀输出压力为 0.2Mpa；开启空气钢瓶开关， 减压阀输出压力为 0.6 Mpa；打开氢气发生器开关。 2. 打开主机电源，打开电脑及软件；选择 FID(氢火焰检测器)检测通道；点火。 3. 在主机面板上设置参数：气化室温度 180℃ ；柱温 150℃ ；检测器温度 180℃。 4. 在软件上测试设置方法，文件名及保存路径。 5. 待仪器基线平稳后，可进行进样分析。 6. 分别用标准物、合成物和无水乙醇进样，每个样品进样两次；记录保留时间。 六． 数据处理 1. 实验条件记录。 2. 各物质色谱图中各组份的保留时间。 七． 思考题 1. 利用保留值进行定性分析的依据是什么？ 2. 利用保留值进行定性分析为什么必须严格控制色谱条件不变？ 3. 利用 ris 进行定性时应注意些什么？ 4. 何为色谱柱老化，柱子老化时要注意哪些问题？
高效液相色谱法测定饮料中的防腐剂一一苯甲酸实验目的：一、1.熟悉HPLC仪器的使用方法。2.学习借保留值定性分析的方法。3.在熟悉色谱原理的基础上，掌握定性和定量的基本方法4.熟悉液相色谱中样品前处理的基本方法二、实验原理：在一定的色谱条件下，各组分都有其特定的保留值。因此它可以作为定性鉴定的依据。通常在相同的色谱条件下，用标准样品作对照，根据同一样品在相同的色谱条件下，保留值一致的原则进行定性分析。由于仪器性能的局限性，必须多次改变实验条件，当被测组分和标准样品仍具有相同保留值的情况下，才可视为同一组分。苯甲酸作为一种防腐剂、抗微生物剂广泛应用于食品工业中，对酵母、霉菌和细菌都有抑制作用，能延长食品保存时间，广泛应用于碳酸和果汁饮料、果酒、果冻、糕点、酱油、食醋和调味料等中。乱用和超标使用防腐剂可能造成危害。此时，防腐剂的质量控制就变得尤为重要。高效液相色谱法是饮料中防腐剂测定的常用方法。色谱定量分析的依据是被测物质的量与它在色谱图上的峰面积（或峰高）成正比。数据处理软件可以给出包括峰高和峰面积在内的多种色谱数据。因为峰高比峰面积更容易受分析条件波动的影响，且峰高标准曲线的线性范围也较峰面积的窄，因此，通常情况是采用峰面积进行定量分析。标准曲线法（外标法）：将被测组分的标准物质配制成不同浓度的标准溶液，经色谱分析后制作一条标准曲线，即物质浓度与其峰面积的关系曲线。根据样品中待测组分的色谱峰面积，从标准曲线上查得相应的浓度。三、色谱条件：固定相：WaterspartisilC18（150x5mm10um）移动相：甲醇：乙酸铵（0.02M：PH=6）=5：95（体积比）检测波长：230nm流速：1.0ml/min样品：七喜饮料标准样品：苯甲酸进样量：10μl本实验均在室温下完成。四、实验步骤：1.流动相的配制：9/31
9 / 31 高效液相色谱法测定饮料中的防腐剂——苯甲酸 一、 实验目的： 1.熟悉 HPLC 仪器的使用方法。 2.学习借保留值定性分析的方法。 3.在熟悉色谱原理的基础上，掌握定性和定量的基本方法 4.熟悉液相色谱中样品前处理的基本方法 二、 实验原理： 在一定的色谱条件下，各组分都有其特定的保留值。因此它可以作为定性鉴定的依据。 通常在相同的色谱条件下，用标准样品作对照，根据同一样品在相同的色谱条件下，保留值 一致的原则进行定性分析。 由于仪器性能的局限性，必须多次改变实验条件，当被测组分和标准样品仍具有相同保 留值的情况下，才可视为同一组分。 苯甲酸作为一种防腐剂、抗微生物剂广泛应用于食品工业中, 对酵母、霉菌和细菌都有 抑制作用，能延长食品保存时间，广泛应用于碳酸和果汁饮料、果酒、果冻、糕点、酱油、 食醋和调味料等中。乱用和超标使用防腐剂可能造成危害。此时，防腐剂的质量控制就变得 尤为重要。高效液相色谱法是饮料中防腐剂测定的常用方法。 色谱定量分析的依据是被测物质的量与它在色谱图上的峰面积（或峰高）成正比。数据 处理软件可以给出包括峰高和峰面积在内的多种色谱数据。因为峰高比峰面积更容易受分析 条件波动的影响，且峰高标准曲线的线性范围也较峰面积的窄，因此，通常情况是采用峰面 积进行定量分析。 标准曲线法（外标法）：将被测组分的标准物质配制成不同浓度的标准溶液，经色谱分 析后制作一条标准曲线，即物质浓度与其峰面积的关系曲线。根据样品中待测组分的色谱峰 面积，从标准曲线上查得相应的浓度。 三、 色谱条件： 固定相： Waters partisil C18 （150×5mm 10μm） 移动相：甲醇：乙酸铵（0.02M；PH=6）=5：95（体积比） 检测波长： 230nm 流速： 1.0 ml/min 样品： 七喜饮料 标准样品： 苯甲酸 进样量：10μl 本实验均在室温下完成。 四、 实验步骤： 1.流动相的配制：
将乙酸铵配制成浓度为0.02mol/L的盐溶液，把甲醇和盐溶液分别按15：85；10：90：5：95体积比配制成实验所需流动相，然后由0.45m孔径的合成纤维脂膜进行真空过滤脱气。2.标准溶液配制：准确称取苯甲酸0.27g于250ml容量瓶中，用甲醇：水=80：20溶液定容，摇匀，各移取该标准溶液10、25、35、50、60ml于250ml容量瓶，稀释至刻度，得到五种不同浓度的标准溶液。3.样品的前处理移取七喜样品25ml置于250ml容量瓶中，加入氢氧化钠（1.0mol/L）5ml，再加乙酸锌溶液（200g/L）、亚铁化钾（100g/L）各25ml，用二次蒸馏水定容、混匀，放置20min，用双层滤纸过滤后，离心，待测。4.高效液相色谱定性鉴定(1）接通电源开关，打开检测器，启动高压泵，待稳定后，打开Waters的Breeze软件。(2）用微量注射器注入样品溶液10ul于进样器，待移动相平衡后进样，得到色谱图，进行数据处理，在色谱图上分别标记出峰时间。(3）注入10ul标准样品溶液于进样器，在相同的色谱条件下分析，记录组分的出峰时间。(4）将样品溶液各峰的保留时间与标准样品的保留时间作对比，找出被定性的色谱峰。5.高效液相色谱定量测定(1）绘制标准曲线分别用不同浓度的标准溶液进样，每次进样10μl，重复进样3次，以主峰面积对其浓度进行线性回归，求得回归方程。(2)样品测定准确移取不同批号样品，按样品溶液制备方法制备，在上述色谱条件下，用外标法进行测定（重复3次），求得样品浓度，计算平均值和相对标准偏差。五、思考题：（1）利用高效液相色谱定性的方法有哪几种？分别在什么情况下适用？(2）本实验的色谱原理属于哪一类？(3）用液相色谱进行定量分析时，在实验操作中与定性分析相比，必须注意那些问题？（4）除外标法，液相色谱中还可以采用什么方法进行定量分析？10 /31
10 / 31 将乙酸铵配制成浓度为 0.02mol/L 的盐溶液，把甲醇和盐溶液分别按 15：85；10：90； 5：95 体积比配制成实验所需流动相，然后由 0.45μm 孔径的合成纤维脂膜进行真空过滤， 脱气。 2.标准溶液配制： 准确称取苯甲酸 0.27g 于 250ml 容量瓶中，用甲醇：水=80：20 溶液定容，摇匀，各移 取该标准溶液 10、25、35、50、60ml 于 250ml 容量瓶，稀释至刻度，得到五种不同浓度的 标准溶液。 3.样品的前处理 移取七喜样品 25ml 置于 250ml 容量瓶中，加入氢氧化钠（1.0mol/L）5ml，再加乙酸锌 溶液（200g/L）、亚铁氰化钾（100g/L）各 25ml，用二次蒸馏水定容、混匀，放置 20min， 用双层滤纸过滤后，离心，待测。 4.高效液相色谱定性鉴定 (1) 接通电源开关，打开检测器，启动高压泵，待稳定后，打开 Waters 的 Breeze 软件。 (2) 用微量注射器注入样品溶液 10ul 于进样器，待移动相平衡后进样，得到色 谱图， 进行数据处理，在色谱图上分别标记出峰时间。 (3) 注入 10ul 标准样品溶液于进样器，在相同的色谱条件下分析，记录组分的出峰时间。 (4) 将样品溶液各峰的保留时间与标准样品的保留时间作对比，找出被定性的色谱峰。 5.高效液相色谱定量测定 (1) 绘制标准曲线 分别用不同浓度的标准溶液进样，每次进样 10μl，重复进样 3 次，以主峰面积对其浓 度进行线性回归，求得回归方程。 (2) 样品测定 准确移取不同批号样品，按样品溶液制备方法制备，在上述色谱条件下，用外标法进行 测定（重复 3 次），求得样品浓度，计算平均值和相对标准偏差。 五、 思考题： (1) 利用高效液相色谱定性的方法有哪几种？ 分别在什么情况下适用？ (2) 本实验的色谱原理属于哪一类？ (3) 用液相色谱进行定量分析时，在实验操作中与定性分析相比，必须注意那些问题？ (4) 除外标法，液相色谱中还可以采用什么方法进行定量分析？