离心机操作0RS-20m定温、定速、定时。平衡
离心机操作 ⚫ 平衡、定温、定速、定时
（三）常用离心方法差速离心法沉降速度法密度梯度离心等密度梯度离心沉降平衡法
（三）常用离心方法 差速离心法 沉降速度法 密度梯度离心 沉降平衡法 等密度梯度离心
1.差速离心differential centrifugation采用不同的离心速度和离心时间，使沉降速度不同的颗粒分批分离的方法特点：用于分离大小和密度差异较大的颗粒。优点：操作简单。缺点：1）分离效果较差，不能一次得到纯颗粒。2）壁效应严重。3）沉降的颗粒受到挤压
1．差速离心 （differential centrifugation） 采用不同的离心速度和离心时间，使沉降速 度不同的颗粒分批分离的方法。 特点：用于分离大小和密度差异较大的颗粒。 优点：操作简单 。 缺点：1）分离效果较差， 不能一次得到纯颗粒。 2）壁效应严重。 3）沉降的颗粒受到挤压
(d)(b)c溶茄小颗粒中颖粒大颗粒离心时间差速离心分离示意图（a）离心前的悬浮液（b）～（e）离心不同时间后颗粒的沉降情况
差速离心分离示意图 （a）离心前的悬浮液 （b）～（e）离心不同时间后颗粒的沉降情况
LOW-SPEEDSUPERNATANTSUBJECTEDTOMEDIUM-SPEEDCENTRIFUGATIONCENTRIFUGATION→pellet containspellet containsmitochondriacellwhole cellslysosomeshomogenatenucleiperoxisomescytoskeletonsSUPERNATANTSUBJECTEDTOHIGH-SPEEDCENTRIFUGATIONpellet containsribosomespelletcontainsvirusesSUPERNATANTSUBJECTEDTOVERY-microsomeslargeHIGH-SPEEDCENTRIFUGATIONsmall vesiclesmacromolecules