一. 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR) ➢ 全称为聚合酶链反应,是一种对特定的DNA 片段在体外进行快速扩增的技术,可以将微量 目的DNA片段扩增一百万倍以上。 ➢ Taq DNA聚合酶
一. 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR) ➢ 全称为聚合酶链反应,是一种对特定的DNA 片段在体外进行快速扩增的技术,可以将微量 目的DNA片段扩增一百万倍以上。 ➢ Taq DNA聚合酶
Region to be copied Heat denaturation Primer annealing Primer extension Cycle #2 Cycle #3
二、PCR的基本反应步骤 变性 95˚C 延伸 72˚C 退火 Tm-5˚C 2 n
二、PCR的基本反应步骤 变性 95˚C 延伸 72˚C 退火 Tm-5˚C 2 n
❖ 模板DNA ❖ 特异性引物 ❖ 耐热DNA聚合酶 ❖ 底物dNTPs ❖ Mg2+ 三. PCR体系基本组成： 一对引物决定了所扩增的DNA的区域
❖ 模板DNA ❖ 特异性引物 ❖ 耐热DNA聚合酶 ❖ 底物dNTPs ❖ Mg2+ 三. PCR体系基本组成： 一对引物决定了所扩增的DNA的区域
四. PCR的主要用途 ❖ 目的基因的克隆 ❖ 基因的体外突变 ❖ DNA和RNA的微量分析 ❖ DNA序列测定 ❖ 基因突变分析
四. PCR的主要用途 ❖ 目的基因的克隆 ❖ 基因的体外突变 ❖ DNA和RNA的微量分析 ❖ DNA序列测定 ❖ 基因突变分析