上游充通大￥ SHANGHAI JIAO TONG UNIVERSITY 革兰氏阴性细菌的细胞壁 D、周质空间(periplasmic space,periplasm) 又称壁膜间隙。在革兰氏阴性细菌中，一般指其外膜与细胞 膜之间的狭窄空间（宽约12-15nm),呈胶状。 周质空间是进出细胞的 O-polysaccharide Outside 物质的重要中转站和反 Gram- Core Lipopoly- 应场所 negative Protein Porin saccharide outer polysacchar Lipid/A (LPS) membrane 8nm 在周质空间中，存在着 Phospholipid 多种周质蛋白 Lipoprotein Periplasm (periplasmic Cytoplasmic membrane proteins):水解酶、合 Inside 成酶、结合蛋白、受体 蛋白等 17 上海交通大学通识教育核心课程《微生物的世界》
17 上海交通大学通识教育核心课程《微生物的世界》 D、周质空间(periplasmic space, periplasm) 又称壁膜间隙。在革兰氏阴性细菌中，一般指其外膜与细胞 膜之间的狭窄空间（宽约12-15nm），呈胶状。 周质空间是进出细胞的 物质的重要中转站和反 应场所 在周质空间中，存在着 多种周质蛋白 （periplasmic proteins）:水解酶、合 成酶、结合蛋白、受体 蛋白等 革兰氏阴性细菌的细胞壁
上游充通大学 :为何革兰氏染色会使阳性为紫色而阴性菌无色？ 1、结晶紫对菌液涂片进行初染 2、用碘液进行媒染。 Sproad culture in thin film over slido 3、用乙醇冲洗进行脱色。 4、用碱性染料沙黄进行复染。 Dry in air for 3 minutes Gram Positive Gram Negative Lipotechoic acid Polysaccharides Porins Techoic add Uplds Protein Peptidoglycan Outer Pass stide through flame to fix membrane layer Peptidoglycan Periplasmic space Cell membrane Membrane Flood sldo with stain: Cell protein rinse and dry membrane protein -100X Piaco drop of oll on slido: examino with 100 x obloctivo Staining colls for microscoplo observation
18 上海交通大学通识教育核心课程《微生物的世界》 1、结晶紫对菌液涂片进行初染 2、用碘液进行媒染。 3、用乙醇冲洗进行脱色。 4、用碱性染料沙黄进行复染。 问：为何革兰氏染色会使阳性为紫色而阴性菌无色？
上游充通大警 SHANGHAI JIAO TONG UNIVERSITY Relationship of Cell Wall Structure to the Gram Stain Phenomenon:In Gram stain,an insoluble crystal violet-iodine complex is formed inside the cell,and the complex is extracted by alcohol from G-but not from G+Bacteria. Reason:G+Bacteria,which have very thick peptidoglycan layer,become dehydrated by the alcohol.This causes the pores in the walls to close, preventing the insoluble crystal violet-iodine complex from escaping.G+菌的厚肽聚糖层被乙醇脱 水，造成壁上小孔收缩，从而使不溶性的结晶紫-碘复合 19 物不能洗出 上海交通大学通识教育核心课程《微生物的世界》
19 上海交通大学通识教育核心课程《微生物的世界》 Relationship of Cell Wall Structure to the Gram Stain Phenomenon: In Gram stain, an insoluble crystal violet-iodine complex is formed inside the cell, and the complex is extracted by alcohol from G- but not from G+ Bacteria. Reason: G+ Bacteria, which have very thick peptidoglycan layer, become dehydrated by the alcohol. This causes the pores in the walls to close, preventing the insoluble crystal violet-iodine complex from escaping. G+菌的厚肽聚糖层被乙醇脱 水, 造成壁上小孔收缩,从而使不溶性的结晶紫-碘复合 物不能洗出
上游充通大学 SHANGHAI JIAO TONG UNIVERSITY In G-Bacteria,alcohol readily penetrates the lipid-rich outer layer,and the thin peptidoglycan layer also does not prevent solvent passage,thus,the crystal violet- iodine complex is easily removed.G-菌中， 乙醇很容易穿透富脂的外膜，薄的肽聚糖壁 也无法阻止溶剂的通过. 20 上海交通大学通识教育核心课程《微生物的世界》
20 上海交通大学通识教育核心课程《微生物的世界》 In G- Bacteria, alcohol readily penetrates the lipid-rich outer layer, and the thin peptidoglycan layer also does not prevent solvent passage, thus, the crystal violetiodine complex is easily removed. G-菌中, 乙醇很容易穿透富脂的外膜, 薄的肽聚糖壁 也无法阻止溶剂的通过
上游充通大警 SHANGHAI JIAO TONG UNIVERSITY 5)细胞壁缺陷细菌： 缺壁突变一L型细菌 实验室或宿主体内形成 基本去尽—原生质体(G+ 缺壁细菌 人工去壁 部分去除—球状体(G) 在自然界长期进化中形成一—支原体 21 上海交通大学通识教育核心课程《微生物的世界》
21 上海交通大学通识教育核心课程《微生物的世界》 5）细胞壁缺陷细菌： 缺壁突变——L型细菌 实验室或宿主体内形成 基本去尽——原生质体（G+） 缺壁细菌 人工去壁 部分去除——球状体（G _） 在自然界长期进化中形成——支原体