理想的分子遗传标记应具备的特点遗传多态性高检测手段简单快捷易于实现自动化遗传共显性
理想的分子遗传标记应具备的特点 ❖遗传多态性高 ❖检测手段简单快捷 ❖易于实现自动化 ❖遗传共显性
Eco R IGAATTC -CTTAAG.1、RFLPSmal ICCCGGG--GGGCCC-最早的DNA标记。两个个体间由于序列的变异造成增加或缺失一个限制性酶切位点，从而产生不同的酶切结果限制性酶切位点：被特定的内切酶所识别的4个或更多个碱基组成的特异性序列除了某些病毒以外，限制性内切酶只在原核生物中被发现限制性内切酶的主要功能是保护细菌不受噬菌体的感染甲基化酶修饰可保护细胞自身的DNA不被限制性内切破坏
1、RFLP ❖ 最早的DNA标记 ❖ 两个个体间由于序列的变异造成增加或缺失一个 限制性酶切位点，从而产生不同的酶切结果 ❖ 限制性酶切位点：被特定的内切酶所识别的4个 或更多个碱基组成的特异性序列 ❖ 除了某些病毒以外，限制性内切酶只在原核生物中被发现 限制性内切酶的主要功能是保护细菌不受噬菌体的感染。 甲基化酶修饰可保护细胞自身的DNA不被限制性内切酶 破坏。 GAATTC CTTAAG Eco RⅠ CCCGGG GGGCCC Smal Ⅰ
RFLP标记鉴定方法提取不同个体或群体的DNA酶切，基因组被切成大小不等的DNA片段电泳，将大小不等的DNA片段分离Southern杂交探针必须含有酶切位点的区域
RFLP 标记鉴定方法 ❖ 提取不同个体或群体的DNA ❖ 酶切，基因组被切成大小不等的DNA片段 ❖ 电泳，将大小不等的DNA片段分离 ❖ Southern 杂交 ❖ 探针必须含有酶切位点的区域
分析过程RFLPASickleSickleCellNormalCellNormalBDNADNADNADNAA+B1.CutwithAfSANormalB-globin2. GelDNABA+B+*11.CutwithSickle-cellDNAS2.GelGelSouthernElectrophoresis Hybridization
RFLP 分析过程
RFLP分析结果Inheritance ofanAutosomal RecessiveDiseaseAllele Determined byRFLPAnalysisGenotypesAaAAaaAaAaAAAaAaAaaaaa一一
RFLP 分析结果