限制性內切酶的命名 属名+种名+菌株类型+发现的顺序 属名 种名 名称 株名序数 来源菌株 (大写、斜体)|(小写、斜体) EcoRI E R I| Escherichia coli R株 HindⅢ H | mophilus infuenzae d株 HindⅡ H Hpa I H pa-I Haemophilus parainfluenzae
11 限制性内切酶的命名 属名+种名+菌株类型+发现的顺序
限制性内切酶的主要用途 o重组DNA分子 匹配末端的连接同一种酶切割不同DNA 分子产生相同的突出末端;或不同酶切割不同 DNA分子产生相同的突出末端,可在连接酶作 用下连接为重组DNA分子。 平端连接可直接连接,但效率较低。 不匹配黏端的连接先补平(K1enow)或 修平(S1)后再连接。 绘制物理图谱(限制性内切酶图谱)
12 限制性内切酶的主要用途 ○ 重组DNA分子 ·匹配末端的连接 同一种酶切割不同DNA 分子产生相同的突出末端;或不同酶切割不同 DNA分子产生相同的突出末端,可在连接酶作 用下连接为重组DNA分子。 ·平端连接 可直接连接,但效率较低。 ·不匹配黏端的连接 先补平(Klenow)或 修平(S1)后再连接。 ○ 绘制物理图谱(限制性内切酶图谱)
二、DNA聚合酶 (-)DNA聚合酶的类型 o依赖DNA的DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅰ大片 段( Klenow)、T4DNA聚合酶、T7DNA聚合酶、修饰的 T7DNA聚合酶、 Taq dna聚合酶。 o不依赖DNA的末端转移酶 o依赖RNA的反转录酶
13 二、DNA聚合酶 (一)DNA聚合酶的类型 ○ 依赖DNA的——DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅰ大片 段(Klenow)、T4 DNA聚合酶、T7 DNA聚合酶、修饰的 T7 DNA聚合酶、Taq DNA聚合酶。 ○ 不依赖DNA的——末端转移酶 ○ 依赖RNA的——反转录酶
名称 3’→5核酸外切酶活性 5→3核酸外切酶活性 大肠杆菌DNA聚合酶 Klenow大片段酶 反转录酶 T4DNA聚合酶 天然的T7DNA聚合酶 化学修饰的T7DNA聚合酶 遗传修饰的T7DNA聚合酶 低低无高高低无无 有无无元无无无有 Taq dNA聚合薛 DNA聚合酶的特性
14 DNA聚合酶的特性
DNA连接酶 该酶的用途是将带匹配黏端的双链DNA或平 端双链DNA片段的5’-P与另一也带相应缺口的 DNA片段的3′-OH连接起来 四、甲基化酶、核酸酶等(从略)
15 三、DNA连接酶 · 该酶的用途是将带匹配黏端的双链DNA或平 端双链DNA片段的5’- P 与另一也带相应缺口的 DNA片段的3′ - OH 连接起来 四、甲基化酶、核酸酶等(从略)