对分枝杆菌的灭活/提取方法 （乙醇-70%甲酸-氰化甲烷)-固体培养 使用生物安全柜，穿着实验工作服和手套，使用合适的消毒流产品 使用1接种环挑 将悬液转移至空的 取菌溶于5001的 Eppendorf管中 酒精中(Eppendorf 管中含0.5mm玻 震荡破壁5min然后在室 璃珠) 温放置10min 离心2min 10.000rpma 这一步骤可以在生物安全柜外的实验桌上完成 将1上清液涂于靶板上 使用移液器去除酒精 完全干燥 上清液 加上1 ul CHCA基质液 完全干燥 VITEK MS上分析 离心2min 加入10μl70%甲酸，（震荡，在室温孵育2-5min) 10,000rpma 加入10l乙腈并震荡 离心向取于使用的设备须进西 总操作时间~25 minutes
对分枝杆菌的灭活/提取方法 （乙醇–70%甲酸–氰化甲烷）-固体培养 将悬液转移至空的 Eppendorf 管中 (a) 请注意，离心时间取决于使用的设备须进行调整。 另外，如果需要将Eppendorf管拿至生物安全柜外进行离心，应使用可以消毒产品清洁管壁以防止污染。 使用生物安全柜，穿着实验工作服和手套，使用合适的消毒流程/产品 In 40 µL FA [70%]+ 2&3 3 3 震荡破壁 5 min 然后在室 温放置10min 使用 1 µl接种环挑 取菌溶于500 µl 的 酒精中 ( Eppendorf 管中含0.5 mm 玻 璃珠） 使用移液器去除酒精 上清液 加入10 µl 70% 甲酸, （震荡，在室温孵育2-5min） 加入10 µl乙腈并震荡 离心2min 10,000 rpm (a) 将1 µl上清液涂于靶板上 完全干燥 加上1 µl CHCA 基质液 完全干燥 VITEK MS上分析 这一步骤可以在生物安全柜外的实验桌上完成 离心2min 10,000 rpm (a) 总操作时间 ~ 25 minutes
对真菌的灭性/提取方法 徐州餐利大手 (乙醇-70%甲酸-氰化甲烷) 使用生物安全柜，穿着实验工作服和手套，使用合适的消毒流程产品 使用湿棉签或者宫颈刷挑 取一些丝状真菌菌落 使用湿棉签在悬液基质（去离子水） 配置霉菌菌悬液 将丝状真菌溶于含有300l悬液基 质的2 ml Eppendorf管中 加入0.9ml无水酒精并混匀 (震荡) 这一步缓可以在生物安全柜外的实验桌上完成 9 离心2min 22 将1上清液涂于靶板上 10,000rpma 完全干燥 圃 使用移液器去除上清液 加入1 ul CHCA基质 完全干燥 在VITEK MS上分析 离心2min 10.000rpm 加入4070%甲酸并混匀（震荡） 加入40乙腈并混匀（震荡） 外，如果变特管拿至生物安全花外进行，应使用可以杀色子的产品清洁管壁以防止污染
加入0.9 ml无水酒精并混匀 (震荡) In 40 µL FA [70%]+ 2&3 2&3 2&3 3 3 使用湿棉签在悬液基质（去离子水） 配置霉菌菌悬液 使用湿棉签或者宫颈刷挑 取一些丝状真菌菌落 将丝状真菌溶于含有300 µl 悬液基 质的2ml Eppendorf管中 离心 2 min 10,000 rpm (a) 使用移液器去除上清液 加入40 µl 70% 甲酸并混匀 (震荡) 加入40 µl乙腈并混匀 (震荡) 离心2 min 10,000 rpm (a) 将1 µl 上清液涂于靶板上 完全干燥 加入1 µl CHCA 基质 完全干燥 在VITEK MS上分析 这一步骤可以在生物安全柜外的实验桌上完成 (a) 请注意，离心时间取决于使用的设备须进行调整。 另外，如果需要将Eppendorf管拿至生物安全柜外进行离心，应使用可以杀灭孢子的产品清洁管壁以防止污染。 对真菌的灭性/提取方法 (乙醇–70%甲酸–氰化甲烷) 使用生物安全柜，穿着实验工作服和手套，使用合适的消毒流程/产品
检测优势 ⑤偷州号热太季 灵活性： ·多个操作台（可达10个） ·尽可能单独放置 。 每个测试可以分析1-4张芯片 高通量： ·4×48=192样品/测试 节省大量时间： 无需进行各种测试 多张芯片可以允许进行不同测试 Work Station Work Station Work Station Work Station VITEK MS:pending FDA clearance
灵活性: • 多个操作台(可达10个) • 尽可能单独放置 • 每个测试可以分析1 – 4张芯片 高通量: • 4 x 48 = 192 样品/测试 节省大量时间: • 无需进行各种测试 • 多张芯片可以允许进行不同测试 检测优势 Work Station 1 Work Station 2 Work Station 3 Work Station 4 VITEK MS: pending FDA clearance
对各种培养基兼容 偷州嘴利太手 Mueller-Hinton 所有样本都具有主要特征峰 MacConkey 所有培养基上的样本都得到了 正确鉴定 Columbia 3000 5000 7000 9000 11000 13000 m/z 产气肠杆菌DSM30053在三种不同培养基上 生长24小时之后的谱图 培养基对鉴定没有影响
产气肠杆菌DSM 30053在三种不同培养基上 生长24小时之后的谱图 所有样本都具有主要特征峰 所有培养基上的样本都得到了 正确鉴定 培养基对鉴定没有影响 MacConkey Mueller-Hinton Columbia 3000 5000 7000 9000 11000 13000 m/z R elativ e nI te n sity 对各种培养基兼容
不同培养时间的鉴定结果 16h 经过120小时培养后， 主要特征峰依然存在 24h 48h 所有时间段样本均得 到了正确鉴定 72h 120h 培养时间不影响鉴定 3000 5000 7000 m/2 9000 11000 13000 结果 在哥伦比亚培养基上的奇异变形杆菌DSM4479谱图
在哥伦比亚培养基上的奇异变形杆菌DSM 4479谱图 经过120小时培养后， 主要特征峰依然存在 所有时间段样本均得 到了正确鉴定 培养时间不影响鉴定 3000 结果 R elativ e Inte n sity 5000 7000 9000 11000 13000 m/z 16 h 24 h 48 h 72 h 120 h 不同培养时间的鉴定结果