限制性内切酶 定义:细菌内存在的一类能识别水解 外源双链DNA的核酸内切酶。 这些酶主要是从细菌中分离得到,能识 别特定的核苷酸顺序,但在细菌本身的 DNA中,这些顺序已被甲基化,因而不被 水解,也就是说这些酶仅限于水解外源 DNA以保护自身,故称限制性酶
限制性内切酶 定义:细菌内存在的一类能识别水解 外源双链DNA的核酸内切酶。 这些酶主要是从细菌中分离得到,能识 别特定的核苷酸顺序,但在细菌本身的 DNA中,这些顺序已被甲基化,因而不被 水解,也就是说这些酶仅限于水解外源 DNA以保护自身,故称限制性酶
限制酶都以内切方式水解DNA 产物:5为P,3为0H 特点:有极高的专一性(对特定核 苷酸顺序专一性,而非对一种或几种 碱基专一),对底物DNA有特异的识别 位点,这些位点一般在4-8bp,通常具 回文结构,切割后形成粘性末端(或 平齐末端)
产物:5’为P,3’为OH 特点:有极高的专一性(对特定核 苷酸顺序专一性,而非对一种或几种 碱基专一),对底物DNA有特异的识别 位点,这些位点一般在4-8bp,通常具 回文结构,切割后形成粘性末端(或 平齐末端) 限制酶都以内切方式水解DNA
回文结构:DNA局部双螺旋以某一 对称轴旋转180°后,与另一侧的互补片 段的顺序完全相同的DNA结构 粘性末端:双链DNA分子经限制性E 作用后,每条单链的一端带有识别顺序 中几个互补碱基,这样的末端称~。 5’.PGAATTCp.3'EcoRI 5.pG AATTCp.3' 3'.pCTTAAGp.5' 3'.pCTTAA Gp.5
回文结构:DNA局部双螺旋以某一 对称轴旋转180 。后,与另一侧的互补片 段的顺序完全相同的DNA结构 粘性末端:双链DNA分子经限制性E 作用后,每条单链的一端带有识别顺序 中几个互补碱基,这样的末端称~。 5’. pGAATTCp . 3’EcoRI 5’.pG AATTCp . 3’ 3’. pCTTAAGp . 5’ 3’.pCTTAA Gp . 5’
大肠杆菌限制性内切E EcoRI 菌属菌种 菌株 酶编号 3、核酸内切兼外切E:例:核酸酶 P1,先内切再外切
3、核酸内切兼外切E:例:核酸酶 P1,先内切再外切 大肠杆菌限制性内切E EcoRI 菌属 菌种 菌株 酶编号
第二节核苷酸的降解 一、核苷酸的降解 核苷酸酶 核苷酸 核苷 H20 Pi 核苷磷酸化E 核苷水解E 碱基+戊糖-1-P 碱基+戊糖 (所有生物体) (植物、微生物, 且只对核糖核苷作用)》
第二节 核苷酸的降解 一、核苷酸的降解 核苷酸酶 核苷酸 核苷 H 2O Pi 核苷磷酸化E 核苷水解E 碱基 + 戊糖-1-P 碱基 + 戊糖 (所有生物体) (植物、微生物, 且只对核糖核苷作用)