现代妇产科进展2016年09月第25卷第9期 Prog Obstet Gynecol, Sep.2016,Vol25,Na.09 巢癌)、中~低分化以及FIGO分期为Ⅲ~Ⅳ期纳入 Cox比例风险模型。结果显示,LMR≤3.949以及 FGO分期Ⅲ~Ⅳ期是预测患者术后总体生存期的 9翻类 独立危险因素。见表3。 出0.6 时间O月) 图2低LMR组与高LMR组患者Os曲线(生存曲线) 表3240例上皮性卵巢癌患者术后生存影响因素 的Cox多因素分 1-特异性 多变量 图1确定术前LMR最佳截点的ROC曲线 变量 95%C 表1240例上皮性卵巢癌患者术前低LMR组与高LMR组手术年龄 (0.999,2.212) 0.05 的临床病理特征及生化指标 FICO分期1.989 n低LMR组(n)高LMR组(n)x 术前LMR0.462 (0.274,0.650) 0.028 手术年龄(岁) 0.7990.37 114 3讨论 浆液性腺癌214108 黏液性腺癌22 子宫内膜样癌 8901126 2.0190.569 自 Virchow等首次把癌症和炎症细胞联系起来 之后,越来越多的研究证实慢性炎症细胞包括中性粒 细胞、淋巴细胞及单核细胞等在癌症的发生、发展及预 组织学分级 0.7740.379 后中起着重要的作用。并有研究证明,炎症反应 FGO分期 导致的慢性氧化应激和生成的氧自由基与癌症的启 动促进和发展密切相关明。 CA125(U/m) 13.8120.000 宿主免疫中,淋巴细胞是消灭残留肿瘤细胞和相 222147 关微小转移灶的关键组成部分,浸润性淋巴细胞能激 DH(U/L) 9.3860.02活一个有效的抗肿瘤细胞免疫反应。自Reso等 138 首次报道外周血淋巴细胞和各种肿瘤的预后相关以 来,许多研究已证实淋巴细胞是卵巢癌患者的独立预 表2240例上皮性卵巢癌患者术后总体生存期 后指标之一。肿瘤相关巨噬细胞(tmor- associated 影响因素的单因素分析 macrophages,TAMs)是构成肿瘤局部炎性微环境的重 影响因素 要组成部分,通过产生各种细胞因子和趋化因子与肿 瘤细胞相互作用,促进肿瘤的发展。TAMs来源于外周 手术年龄 4.707 0.03 循环中的单核细胞,单核细胞的招募、分化、存活和增 >56岁ws≤56岁 殖组成了TAMs形成的全过程。研究证明,浸润性 术前LMR 6.1920.013 单核细胞可促进淋巴瘤侵袭和细胞生长m,而且与淋 ≤3.949vs>3.949 巴瘤和其他实体瘤的不良预后有关。综上,淋巴细 病理类型 14.4750.002 胞和单核细胞均与肿瘤的发生、发展有着密切联系。 黏液性腺癌v浆液性腺癌 研究表明,淋巴细胞/单核细胞比值可对乳腺癌、结 分化 8.0190.005直肠癌等有较好的预测预后作用,因此推测淋巴细 中-低w高 胞/单核细胞的比值可反映卵巢癌患者系统性炎症反 FIGO分期 11.9840.001 应,进而预测其预后情况 Ⅲ-ⅣV期wsI-Ⅱ期 本研究表明,低IMR(≤3.949)及高LMR(> CA125( U/ml) 1.2770.258 3949)组患者的FIGO分期、CA125水平及DH水平 >35ws≤35 比较,差异有统计学意义;单因素分析结果显示,术前 LDH(U/L LMR≤3949是上皮性卵巢癌患者总体生存期的危险 因素。提示术前LMR≤3.949者的机体免疫状态不佳 抵抗力差,肿瘤恶性程度较高,预后较差。Cox多因素 656
巢癌)、中 ~ 低分化以及 FIGO 分期为芋 ~ 郁期纳入 Cox 比例风险模型。 结果显示,LMR臆3. 949 以及 FIGO 分期芋 ~ 郁期是预测患者术后总体生存期的 独立危险因素。 见表 3。 图 1 确定术前 LMR 最佳截点的 ROC 曲线 表 1 240 例上皮性卵巢癌患者术前低 LMR 组与高 LMR 组 的临床病理特征及生化指标 变量 n 低 LMR 组(n) 高 LMR 组(n) 字 2 P 手术年龄(岁) 0. 799 0. 371 臆56 114 76 38 >56 126 77 49 病理类型 2. 019 0. 569 浆液性腺癌 214 108 106 黏液性腺癌 22 11 11 子宫内膜样癌 2 1 1 透明细胞癌 2 0 2 组织学分级 0. 774 0. 379 高 43 7 36 中 ~ 低 197 44 153 FIGO 分期 13. 114 0. 000 I ~ II 59 26 33 III ~ IV 181 127 54 CA125(U/ ml) 13. 812 0. 000 臆35 18 4 14 >35 222 147 75 LDH(U/ L) 9. 386 0. 002 >245 102 81 21 臆245 138 84 54 表 2 240 例上皮性卵巢癌患者术后总体生存期 影响因素的单因素分析 影响因素 OS 字 2 P 手术年龄 4. 707 0. 03 >56 岁 vs 臆56 岁 术前 LMR 6. 192 0. 013 臆3. 949 vs >3. 949 病理类型 14. 475 0. 002 黏液性腺癌 vs 浆液性腺癌 分化 8. 019 0. 005 中 ~ 低 vs 高 FIGO 分期 11. 984 0. 001 III ~ IV 期 vs I ~ II 期 CA125(U/ ml) 1. 277 0. 258 >35 vs 臆35 LDH(U/ L) 2. 408 0. 121 >245 vs 臆245 图 2 低 LMR 组与高 LMR 组患者 OS 曲线(生存曲线) 表 3 240 例上皮性卵巢癌患者术后生存影响因素 的 Cox 多因素分析 变量 多变量 HR 95% CI P 手术年龄 1. 486 (0. 999,2. 212) 0. 051 FIGO 分期 1. 989 (1. 181,3. 349) 0. 010 术前 LMR 0. 462 (0. 274,0. 650) 0. 028 3 讨 论 自 Vichow 等[9]首次把癌症和炎症细胞联系起来 之后,越来越多的研究证实慢性炎症细胞包括中性粒 细胞、淋巴细胞及单核细胞等在癌症的发生、发展及预 后中起着重要的作用[10-11] 。 并有研究证明,炎症反应 导致的慢性氧化应激和生成的氧自由基与癌症的启 动、促进和发展密切相关[12-13] 。 宿主免疫中,淋巴细胞是消灭残留肿瘤细胞和相 关微小转移灶的关键组成部分,浸润性淋巴细胞能激 活一个有效的抗肿瘤细胞免疫反应[14] 。 自 Rieso 等[15] 首次报道外周血淋巴细胞和各种肿瘤的预后相关以 来,许多研究已证实淋巴细胞是卵巢癌患者的独立预 后指标之一。 肿瘤相关巨噬细胞( tumor鄄associated macrophages,TAMs)是构成肿瘤局部炎性微环境的重 要组成部分,通过产生各种细胞因子和趋化因子与肿 瘤细胞相互作用,促进肿瘤的发展。 TAMs 来源于外周 循环中的单核细胞,单核细胞的招募、分化、存活和增 殖组成了 TAMs 形成的全过程[16] 。 研究证明,浸润性 单核细胞可促进淋巴瘤侵袭和细胞生长[17] ,而且与淋 巴瘤和其他实体瘤的不良预后有关[18] 。 综上,淋巴细 胞和单核细胞均与肿瘤的发生、发展有着密切联系。 研究表明,淋巴细胞/ 单核细胞比值可对乳腺癌[5] 、结 直肠癌[8]等有较好的预测预后作用,因此推测淋巴细 胞/ 单核细胞的比值可反映卵巢癌患者系统性炎症反 应,进而预测其预后情况。 本研究表明,低 LMR (臆3. 949) 及高 LMR ( > 3. 949)组患者的 FIGO 分期、CA125 水平及 LDH 水平 比较,差异有统计学意义;单因素分析结果显示,术前 LMR臆3. 949 是上皮性卵巢癌患者总体生存期的危险 因素。 提示术前 LMR臆3. 949 者的机体免疫状态不佳、 抵抗力差,肿瘤恶性程度较高,预后较差。 Cox 多因素 656 现代妇产科进展 2016 年 09 月第 25 卷第 09 期 Prog Obstet Gynecol,Sep. 2016,Vol郾 25,No郾 09
现代妇产科进展2016年09月第25卷第09期 Prog Obstet Gynecol, Sep.2016,Vol25,Na209 皮性卵巢癌患者的术后生存时间不仅与FO分期密 Meta a patients with cancer] Curr Opin Clin Nutr 分析显示,术前IMR≤3.949及FICO分期为Ⅲ~Ⅳ期 是预测患者术后总体生存期的独立危险因素。表明上 ,2009,12(3):223-226 iang R, Cai XY, Yang ZH, et al. Elevated peripheral blood lymphocyte-to-monocyte ratio predicts a favorable prognosis 切相关,同时也受到术前LMR的影响。这充分表明了 in the pat with metastatic nasopharyngeal carcinoma 其在卵巢癌患者中机体免疫系统扮演着十分重要的角[5]Nx, Zhang Xl, OuY ang QW,eta,. An elevated peripher 色。本研究单因素或多因素分析显示,CA125水平、 blood lymphocyte-to-monocyte ratio Predicts favorable re- LDH水平与卵巢癌的预后无关,这与一些研究成果不 se and prognosis in locally advanced breast cancer fol- 致,可能与此次研究样本含量少或患者自身各种 lowing neoadjuvant chemotherapy [J]. PLos One, 2014, 9 病理特征不同有关。LMR影响肿瘤患者预后的具体机6]henL, Zhang F, Sheng XG, et al. Decreased pretreatment 制不明确,一种解释是宿主的抗肿瘤免疫反应是淋巴 mphocyte/ monocyte ratio is associated with stage Ibl-lla cervical ents who undergo radical 细胞依赖性的,LMR降低的患者往往伴有淋巴细胞计 surgery[J]. Onco Targets Ther, 2015, 8: 1355-1362 数相对减少,降低了其介导的抗肿瘤反应进而形成了[]in,RumD,Y,cta, Lymphocyte-to-monocyte ra 适合癌细胞增殖及转移的环境,导致患者预后不良;另 ter curative resection [J]. World J 2015,21 一方面,单核细胞可分泌多种促炎细胞因子,如白介素 (38):10898-10906 (lm,L)1、6、m0和肿瘤坏死因子 a [8 Shibutani, Nagahara H, et al. Prognostic signif ( tumor necrosis factor c,TNF-a),这些都与恶性肿瘤的 metastatic colorectal cancer[J]. World J Gastroenterol, 2015 生存期短和预后不良相关。此外,单核细胞能释放诱 21(34):9966-9973 [9 Balkwill F, Mantovani A. Inflammation and cancer: back to 导蛋白-1( monocyte chemotactic protein1,MCP1)刺激 Virchow?[J] Lancet,2001,357(9255):539-545 实体瘤中的肿瘤相关巨噬细胞浸润,产生多种趋化因[Io] Tsai yd, Wang CH, Chen Cy,tal. Pretreatment circulating 子,如转化生长因子a( transforming growth factor a, monocyte count associated with poor prog In patients with oral cavity cancer[J] Head Neck, 2014, 36(7): 947 TGF-α)、IF-αIL-1和Ⅱ6,以促进肿瘤发生、血管发 生和恶性肿瘤远处转移。另一种解释是,LMR降低反[ uting T, de Visser KE CANCER. How neutrophils promote 应了促肿瘤炎症反应与抗肿瘤免疫反应的一种平衡状[12] Chen Wongworawat Y, Filippova M, Williams VM,etl Chronic oxidative stress increases the integration frequency 目前,国内尚未报道IMR对上皮性卵巢癌患者生 ratinocytes[J]. Am J Cancer Res, 2016, 6(4): 764-780 存预测的研究,国外仅有1篇相关报道。本研究的[13] Sharma V, Collins LB, Chen TH,eta. Oxidative stress at 意义首先肯定了目前术前LMR在上皮性卵巢癌患者 low levels can induce clustered DNA lesions leading to 中的预后价值,并为其增添了新的依据。其次,本研究 NHEJ mediated mutations[J]. Oncotarget, 2016[ Epub a- 提出了与之不甚相同的方面,如年龄界限(此次研究的[14] Fogar F, Sperti C, Basso d,eta. Decreased total lymphocyte 风险年龄为56岁,而其为62岁);本研究得出年龄在两 counts in pancreatic cancer: an index of adverse outcome reas,2006,32(1 组LMR中差异不显著,与其报道不一致。因此术前外[15] Riesco a. Five-vear cancer cure; relation to total amount of 考值尚需多中心大样本量的临床证实。本研究系回[6] Ma): 3s/4g mphocytes and net[门am,m05 周血IMR测定对上皮性卵巢癌预后的预测价值及参 ed macro 顾性研究,不可避免存在一些问题,如纳入的变量指标 phages as a prototypic type Il polarised p 较少,尚需联合临床上的其他全身炎症反应指标,如中 on: role in tumour progression[ J].Eur 2004,40 (11):16-1667 性粒细胞等筛选更有意义的独立预后指标等。最后,[17] Huang J,Y,xinY,eta. Prognostic significance of pe- LMR作为一种易测量且价格低廉的新血清生物学指标 ripheral monocyte count in patients with extranodal natural 有望成为上皮性卵巢癌患者预后的常规检测指标。因[18]Hses, Weinitschke K. fischer K,eta. Monitoring per-甲p 此,LMR对上皮性卵巢癌的病情监测上有着更为广阔 的应用前景。 Oncol Rep,201l,25(5):1455-1464 [19] M, Lee SH, Choi MR, et al. Diagnostic value of CA125 参考文献 as a predictor of recurrence in advanced cancer[J] [1] Cohen CA, Shea AA, Heffron CL, et al. The parity. Onol,2013,34(2):148-151 microenvironmental niche in the omental fat band [20] Eo WK, Chang HI, Kwon SH, et al. The lymphocyte-mo ry to ovarian cancermetastasis[ J]. Cancer Prev Re cyte ratio predicts patient survival and aggressiveness of o- 2013,6(11):1182-193 rian cancer[J].J Cancer, 2016, 7(3): 289-296 [2] Seibaek L, Petersen LK, Blaakaer J, et al. Symptom interpre- (收稿日期2016405406) ation and health care, eeking in ovarian cancer[[J].BMC第一作者简介:王秀娟(1990),女,郑州大学第一附属医院 [3 McMillan DC. Systemic inflammation, nutritional status and 士研究生。主要研究方向:妇科肿瘤
分析显示,术前 LMR臆3. 949 及 FIGO 分期为芋 ~郁期 是预测患者术后总体生存期的独立危险因素。 表明上 皮性卵巢癌患者的术后生存时间不仅与 FIGO 分期密 切相关,同时也受到术前 LMR 的影响。 这充分表明了 其在卵巢癌患者中机体免疫系统扮演着十分重要的角 色。 本研究单因素或多因素分析显示,CA125 水平、 LDH 水平与卵巢癌的预后无关,这与一些研究成果不 一致[19] ,可能与此次研究样本含量少或患者自身各种 病理特征不同有关。 LMR 影响肿瘤患者预后的具体机 制不明确,一种解释是宿主的抗肿瘤免疫反应是淋巴 细胞依赖性的,LMR 降低的患者往往伴有淋巴细胞计 数相对减少,降低了其介导的抗肿瘤反应,进而形成了 适合癌细胞增殖及转移的环境,导致患者预后不良;另 一方面,单核细胞可分泌多种促炎细胞因子,如白介素 (Interleukin,IL)鄄1、 IL鄄6、 IL鄄10 和 肿 瘤 坏 死 因 子鄄琢 (tumor necrosis factor 琢,TNF鄄琢),这些都与恶性肿瘤的 生存期短和预后不良相关。 此外,单核细胞能释放诱 导蛋白鄄1(monocyte chemotactic protein 1,MCP鄄1)刺激 实体瘤中的肿瘤相关巨噬细胞浸润,产生多种趋化因 子,如转化生长因子鄄琢(transforming growth factor 琢, TGF鄄琢)、TNF鄄琢、IL鄄1 和 IL鄄6,以促进肿瘤发生、血管发 生和恶性肿瘤远处转移。 另一种解释是,LMR 降低反 应了促肿瘤炎症反应与抗肿瘤免疫反应的一种平衡状 态。 目前,国内尚未报道 LMR 对上皮性卵巢癌患者生 存预测的研究,国外仅有 1 篇相关报道[20] 。 本研究的 意义首先肯定了目前术前 LMR 在上皮性卵巢癌患者 中的预后价值,并为其增添了新的依据。 其次,本研究 提出了与之不甚相同的方面,如年龄界限(此次研究的 风险年龄为56 岁,而其为62 岁);本研究得出年龄在两 组 LMR 中差异不显著,与其报道不一致。 因此术前外 周血 LMR 测定对上皮性卵巢癌预后的预测价值及参 考值,尚需多中心、大样本量的临床证实。 本研究系回 顾性研究,不可避免存在一些问题,如纳入的变量指标 较少,尚需联合临床上的其他全身炎症反应指标,如中 性粒细胞等筛选更有意义的独立预后指标等。 最后, LMR 作为一种易测量且价格低廉的新血清生物学指标 有望成为上皮性卵巢癌患者预后的常规检测指标。 因 此,LMR 对上皮性卵巢癌的病情监测上有着更为广阔 的应用前景。 参 考 文 献 [1] Cohen CA,Shea AA,Heffron CL,et al. The parity鄄associated microenvironmental niche in the omental fat band is refracto鄄 ry to ovarian cancermetastasis[J]. Cancer Prev Res (Phila), 2013,6(11):1182鄄1193 [2] Seibaek L,Petersen LK,Blaakaer J,et al. Symptom interpre鄄 tation and health care seeking in ovarian cancer [J]. BMC Womens Health,2011,11:31 [3] McMillan DC. Systemic inflammation,nutritional status and survival in patients with cancer [ J]. Curr Opin Clin Nutr Metab Care,2009,12(3):223鄄226 [4] Jiang R,Cai XY,Yang ZH,et al. Elevated peripheral blood lymphocyte鄄to鄄monocyte ratio predicts a favorable prognosis in the patients with metastatic nasopharyngeal carcinoma [J]. Chin J Cancer,2015,34(6):237鄄246 [5] Ni XJ,Zhang XL,OuYang QW,et al. An elevated peripheral blood lymphocyte鄄to鄄monocyte ratio Predicts favorable re鄄 sponse and prognosis in locally advanced breast cancer fol鄄 lowing neoadjuvant chemotherapy [ J]. PLoS One, 2014, 9 (11):e111886 [6] Chen L,Zhang F,Sheng XG,et al. Decreased pretreatment lymphocyte / monocyte ratio is associated with poor prognosis in stage Ib1鄄IIa cervical cancer patients who undergo radical surgery[J]. Onco Targets Ther,2015,8:1355鄄1362 [7] Lin ZX,Ruan DY,Li Y,et al. Lymphocyte鄄to鄄monocyte ratio predicts survival of patients with hepatocellular carcinoma af鄄 ter curative resection [ J]. World J Gastroenterol,2015,21 (38):10898鄄10906 [8] Shibutani M,Maeda K,Nagahara H,et al. Prognostic signifi鄄 cance of the lymphocyte鄄to鄄monocyte ratio in patients with metastatic colorectal cancer[J]. World J Gastroenterol,2015, 21(34):9966鄄9973 [9] Balkwill F,Mantovani A. Inflammation and cancer:back to Virchow? [J]Lancet,2001,357(9255):539鄄545 [10] Tsai YD,Wang CP,Chen CY,et al. Pretreatment circulating monocyte count associated with poor prognosis in patients with oral cavity cancer[J]. Head Neck,2014,36(7):947鄄 953 [11] Tuting T,de Visser KE. CANCER. How neutrophils promote metastasis[J]. Science,2016,352(6282):145鄄146 [12] Chen Wongworawat Y,Filippova M,Williams VM,et al. Chronic oxidative stress increases the integration frequency of foreign DNA and human papillomavirus 16 in human ke鄄 ratinocytes[J]. Am J Cancer Res,2016,6(4):764鄄780 [13] Sharma V,Collins LB,Chen TH,et al. Oxidative stress at low levels can induce clustered DNA lesions leading to NHEJ mediated mutations [ J]. Oncotarget,2016 [Epub a鄄 head of print] [14] Fogar P,Sperti C,Basso D,et al. Decreased total lymphocyte counts in pancreatic cancer:an index of adverse outcome [J]. Pancreas,2006,32(1):22鄄28 [15] Riesco A. Five鄄year cancer cure:relation to total amount of peripheral lymphocytes and neutrophils[J]. Cancer,1970,25 (1):135鄄140 [16] Mantovani A,Allavena P,Sica A. Tumour鄄associated macro鄄 phages as a prototypic type II polarised phagocyte popula鄄 tion:role in tumour progression[J]. Eur J Cancer,2004,40 (11):1660鄄1667 [17] Huang JJ,Li YJ,Xia Y,et al. Prognostic significance of pe鄄 ripheral monocyte count in patients with extranodal natural killer/ T鄄cell lymphoma[J]. BMC Cancer,2013,13:222 [18] Hase S,Weinitschke K,Fischer K,et al. Monitoring peri鄄op鄄 erative immune suppression in renal cancer patients [ J]. Oncol Rep,2011,25(5):1455鄄1464 [19] Song MJ,Lee SH,Choi MR,et al. Diagnostic value of CA125 as a predictor of recurrence in advanced ovarian cancer[J]. Eur J Gynaecol Oncol,2013,34(2):148鄄151 [20] Eo WK,Chang HJ,Kwon SH,et al. The lymphocyte鄄mono鄄 cyte ratio predicts patient survival and aggressiveness of o鄄 varian cancer[J]. J Cancer,2016,7(3):289鄄296 (收稿日期 2016鄄05鄄06) 第一作者简介:王秀娟(1989鄄),女,郑州大学第一附属医院 硕士研究生。 主要研究方向:妇科肿瘤。 657 现代妇产科进展 2016 年 09 月第 25 卷第 09 期 Prog Obstet Gynecol,Sep. 2016,Vol郾 25,No郾 09
现代妇产科进展2016年09月第25卷第9期 Prog Obstet Gynecol, Sep.2016,Vol25,Na.09 论著 卵巢肿瘤患者尿液中 mirNA-200c-3p的表达及意义 田雨子,孙金剑,吴帆,陈晓宇,张路远,杨美婵,吴晓英 (中南大学基础医学院病理学系,长沙410013) 【摘要】目的:通过检测卵巢肿瘤患者尿液中 mirnA-200c3p表达水平,探讨尿液 miRNA-200c-3p对卵巢肿瘤诊断的意义。方法:收集14例卵巢肿瘤患者的尿液样本,其 中8例良性卵巢肿瘤与6例恶性卵巢癌患者,并选取6例健康人作为对照。采用实时荧 光定量PCR方法检测尿液中 miRNA200c-3p表达水平。结果:14例上皮性卵巢肿瘤组的 mirNA200c-3p表达与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。恶性卵巢肿瘤组、良 性卵巢肿瘤组和对照组尿液中miR-200c-3p含量比较,差异无统计学意义(P=0.062)。 ROC曲线下面积(AUC)为0.821,miR-200c-3p对于卵巢肿瘤的诊断灵敏度和特异度分别 为63.7%和86.7%。结论:尿液中 miRNA-00c-3p可能对卵巢肿瘤具有一定的诊断意 【关键词】 microrna;卵巢肿瘤;尿液;生物标志物 中图分类号:R737.33文献标志码:A文章编号:1004-7379(2016)09-0658-03 DOI:10.13283/j. cnki. xdfckjz.2016.09.038 Urine miRNA-200c-3p as potential diagnostic biomarkers for ovarian tumor. Tian Yuzi Sun Jinjian, Wu Fan, et al. Department of Pathology, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410013 [Abstract] Objective: To evaluate the diagnostic significance of urine miRNA-200c-31 ovarian tumor by measuring its different expression levels. Method: Urin 14 patients with tumor, including 8 benign tumors and 6 malignant varian tumors, and 6 healthy controls. The relative expression levels of miRNA-200c-3p were measured by quantificational real-time polymerase chain reaction assay(qRT-PCR ).Results: The expres- sion levels of miRNA-200c-3p was significantly increased in ovarian tumor group than that of healthy group(P<0. 05). While we found no statistical significant among the malignant tumors benign tumors and healthy controls by one-way analysis of variance (P=0. 062). The AUC(ar- ea under the curve) of ROC curve was 0. 821. The sensitivity and specificity of miRNA-200c 3p for diagnosing ovarian tumor were 63. 7% and 86. 7% respectively. Conclusion: miRNA 200c-3p can potentially serve as a biomarker for ovarian tumor detection Key words microRNA; Ovarian tumor; Urine: Biomarke 卵巢癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之 麻烦且对患者辐射较大,血清学中检测CA125敏感 是造成女性患癌死亡的主要原因2。由于缺少有度及特异性又较低。因此寻找一种更为有效的卵巢 效的早期诊断筛选方法,75%患者确诊时已为晚期,肿瘤生物标志物十分重要。 mirnA广泛参与肿瘤 常伴有已扩散至腹膜、肺实质及胸膜的癌症侵的发生发展、侵袭和耐药等过程,并伴有其在血清 袭,这也是造成其高死亡率的主要原因。目前,尿液等体液中的表达变化,如 mirNA-145141、miR 临床上对于卵巢肿瘤的早期诊断主要采用CT和NA925等。 miRNA200c为mRNA-200家族成员, MRI结合的影像法。影像学的方法花费较高、过程可通过上皮间质转化作用参与卵巢肿瘤侵袭过程, *通讯作者 Email:xyw200@csu.edu
·论著· 卵巢肿瘤患者尿液中 miRNA鄄200c鄄3p 的表达及意义 田雨子,孙金剑,吴 帆,陈晓宇,张路远,杨美婵,吴晓英* (中南大学基础医学院病理学系,长沙 410013) 揖摘要铱 目的:通过检测卵巢肿瘤患者尿液中 miRNA鄄200c鄄3p 表达水平,探讨尿液 miRNA鄄200c鄄3p 对卵巢肿瘤诊断的意义。 方法:收集 14 例卵巢肿瘤患者的尿液样本,其 中 8 例良性卵巢肿瘤与 6 例恶性卵巢癌患者,并选取 6 例健康人作为对照。 采用实时荧 光定量 PCR 方法检测尿液中 miRNA鄄200c鄄3p 表达水平。 结果:14 例上皮性卵巢肿瘤组的 miRNA鄄200c鄄3p 表达与对照组比较,差异有统计学意义(P<0. 05)。 恶性卵巢肿瘤组、良 性卵巢肿瘤组和对照组尿液中 miR鄄200c鄄3p 含量比较,差异无统计学意义(P = 0. 062)。 ROC 曲线下面积(AUC)为 0. 821,miR鄄200c鄄3p 对于卵巢肿瘤的诊断灵敏度和特异度分别 为 63. 7% 和 86. 7% 。 结论:尿液中 miRNA鄄200c鄄3p 可能对卵巢肿瘤具有一定的诊断意 义。 揖关键词铱 microRNA;卵巢肿瘤;尿液;生物标志物 中图分类号:R737. 33 文献标志码:A 文章编号:1004-7379(2016)09-0658-03 DOI:10. 13283 / j. cnki. xdfckjz. 2016. 09. 038 Urine miRNA鄄200c鄄3p as potential diagnostic biomarkers for ovarian tumor. Tian Yuzi, Sun Jinjian,Wu Fan,et al. Department of Pathology,Xiangya School of Medicine,Central South University,Changsha 410013 揖Abstract铱 Objective:To evaluate the diagnostic significance of urine miRNA鄄200c鄄3p in ovarian tumor by measuring its different expression levels. Method:Urine was collected from 14 patients with ovarian tumor, including 8 benign ovarian tumors and 6 malignant ovarian tumors,and 6 healthy controls. The relative expression levels of miRNA鄄200c鄄3p were measured by quantificational real鄄time polymerase chain reaction assay (qRT鄄PCR). Results:The expres鄄 sion levels of miRNA鄄200c鄄3p was significantly increased in ovarian tumor group than that of healthy group(P<0. 05). While we found no statistical significant among the malignant tumors, benign tumors and healthy controls by one鄄way analysis of variance(P = 0. 062). The AUC (ar鄄 ea under the curve) of ROC curve was 0. 821. The sensitivity and specificity of miRNA鄄200c鄄 3p for diagnosing ovarian tumor were 63. 7% and 86. 7% respectively. Conclusion:miRNA鄄 200c鄄3p can potentially serve as a biomarker for ovarian tumor detection. 揖Key words铱 microRNA;Ovarian tumor;Urine;Biomarker 卵巢癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一, 是造成女性患癌死亡的主要原因[1-2] 。 由于缺少有 效的早期诊断筛选方法,75% 患者确诊时已为晚期, 常伴有已扩散至腹膜、 肺实质及胸膜的癌症侵 袭[3] ,这也是造成其高死亡率的主要原因。 目前, 临床上对于卵巢肿瘤的早期诊断主要采用 CT 和 MRI 结合的影像法。 影像学的方法花费较高、过程 麻烦且对患者辐射较大,血清学中检测 CA125 敏感 度及特异性又较低。 因此寻找一种更为有效的卵巢 肿瘤生物标志物十分重要。 miRNA 广泛参与肿瘤 的发生发展、侵袭和耐药等过程,并伴有其在血清、 尿液等体液中的表达变化,如 miRNA鄄145 [4] 、miR鄄 NA鄄92 [5]等。 miRNA鄄200c 为 miRNA鄄200 家族成员, 可通过上皮间质转化作用参与卵巢肿瘤侵袭过程, 658 现代妇产科进展 2016 年 09 月第 25 卷第 09 期 Prog Obstet Gynecol,Sep. 2016,Vol郾 25,No郾 09 * 通讯作者 Email:xyw2007@ csu. edu. cn
现代妇产科进展2016年09月第25卷第09期 Prog Obstet Gynecol, Sep.2016,Vol25,Na209 且有研究证明其在卵巢肿瘤组织和血液中表达升2结果 高。因此本研究通过检测卵巢肿瘤患者尿液中2.1荧光定量PCR扩增曲线miR-200c-3p组含 mirNA-200c表达差异,进一步探讨尿液中 mirna-量较高,可检测到其Ct值在正常扩增范围之间,溶 200c作为卵巢肿瘤无痛诊断的意义, 解曲线显示为单一有效扩增,结果可信。miR-200c 1材料与方法 5p的Ct值大于40,且溶解曲线显示为非目标产物 1.1研究对象选取2014年8-11月中南大学湘雅医学有效扩增。 院附属肿瘤医院收治的上皮性卵巢肿瘤14例,其中恶性上2.2各组患者尿液中mR20c-3p相对含量卵 皮性卵果肿榴患者6例(病理显示为腺癌,分期为Ⅲ、N巢肿瘤组尿液中m200-3p含量高于健康对照 期)、良性上皮性卵巢肿瘤患者8例(包括黏液性腺瘤4例, 组,差异有统计学意义(P<0.05)。单因素方差分析 浆液性腺瘤4例)。所有患者均经过病理学诊断确诊。选取 6例健康女性作为对照组。卵巢肿瘤患者年龄(46.8±9.6) 表明,恶性卵巢肿瘤组、良性卵巢肿瘤组和健康对照 岁,其中恶性上皮性卵巢肿瘤患者年龄(52.5±7.4)岁,良性 组尿液中miR-200c-3p含量比较,差异无统计学意 上皮性卵巢肿瘤患者年龄(4.69.1);正常对照组年龄义(P=0.02)。见表1 (43.9±12.7)岁。样本收集前患者未经过放疗、化疗或手术2.3ROC曲线以mR200c-3p△Ct值表绘制 ROC曲线,曲线下面积(AUC)为0.821,miR-200c- 1.2样本收集术前留取中段晨尿(第一次排尿)约50m,3p对于卵巢肿瘤的诊断灵敏度和特异度分别为 30℃保存。每份尿液按来源做好标记。研究对象均签署63.7%和86.7%。mR200-3p对诊断卵巢肿瘤有 知情同意书,并获得医院伦理委员会同意 定的价值。见图1。 1.3总RNA提取室温(15℃-25℃)下完全溶解标本。 采用 miRNeasy Serum/ Plasma it For purification of total RNA表1mR-200c3p在卵巢肿瘤组及正常组尿液中的△Ct值 ( QIAGEN)试剂盒抽提总RNA,使用 eppendorf BioPhotomet 组别 miR200-3p△C 均值的95%C plus仪器进行RNA浓度及纯度检测。逆转录采用A- 卵巢肿瘤组 5.4473-6.8792 4.8800-7.3227 One mirNA qRT-PCR Detection Kit( genecoplea)试剂盒,取性6.2457±0.9765 5.1987-7.2926 500ng总RNA,将反应体系配成25μl。37℃孵育60min,85℃健康对照组644323+1.59654 2.7569-6.078 孵育5min,以灭活酶。反应完成后将cDNA置-20℃冰箱保 P<0.05w健康对照组 存。 1.4Real- time qPCR检测采用荧光定量PCR方法测定各 组尿液中miR-200c的含量,包括miR-200c-3p与miR-200c 5p。实时荧光定量所用引物为 genecoplea公司购买的miPm file miRNa qPCR Primer hsa-miR-200c-5p( Catalog number 0.6 HmiRQP0302),以L6为内参( Catalog number: 0.2 HmiRQP91)。PCR所用试剂盒为 genecoplea公司Alin One mirna qRT-PCR Detection Kit,参照试剂盒步骤并对最 0.00.2 1-特异性 佳条件的反复摸索:反应体系为:10μ12×A-in- One qPCR Mix; 2. 5ul All-in-One mirNA qPCR Primer; 2ul Universal 图1ROC曲线 Adaptor PCR Primer;4 ul Frist-strand cDNA(稀释5倍后使3讨论 用):0.4μl50× ROX Reference dve;l. I ul double distilled wa 目前,临床上常用的上皮性卵巢肿瘤标志物主 r。程序依次如下:95℃l0mim;3步循环95℃10s,60℃325,要有CA125、HF4等,但这些指标检测卵巢肿瘤的 70℃32,45个循环。每个标本设2个复孔。计算每个样本敏感度及特异度普遍较低。近期研究显示,多种 各复孔的C值均值作为实际样本Ct值减去同一样本内参 hiRNA参与肿瘤的发生发展,并伴有血清尿液等 U6的Ct值均值,得到ΔCt值。结果采用△Ct值分析。 1.5统计学处理采用SPS17.0统计学软件,正态资料用 体液中 mirnA表达变化,如膀胱癌患者尿液中 ±s表示,采用单因素方差分析或独立样本t检验;非正态资 miR%6含量升高,提示miR-96作为膀胱癌生物标 料用中位数(四分位数区间)表示,采用非参数 Mann Whitney志物的可能性。乳腺癌患者血清中,同时会有 U检验;受试者工作曲线(ROC曲线)判断血浆miR200c诊mR-29b、mR-155、miR-197及mR205四种 mirNA 断卵巢肿瘤的灵敏度和特异度。P0.05为差异有统计学意表达,且各 mirnA的含量较高,能作为乳腺癌的诊 断依据
且有研究证明其在卵巢肿瘤组织和血液中表达升 高。 因此本研究通过检测卵巢肿瘤患者尿液中 miRNA鄄200c 表达差异,进一步探讨尿液中 miRNA鄄 200c 作为卵巢肿瘤无痛诊断的意义。 1 材料与方法 1. 1 研究对象 选取 2014 年 8 ~ 11 月中南大学湘雅医学 院附属肿瘤医院收治的上皮性卵巢肿瘤 14 例,其中恶性上 皮性卵巢肿瘤患者 6 例(病理显示为腺癌,分期为芋、郁 期)、良性上皮性卵巢肿瘤患者 8 例(包括黏液性腺瘤 4 例, 浆液性腺瘤 4 例)。 所有患者均经过病理学诊断确诊。 选取 6 例健康女性作为对照组。 卵巢肿瘤患者年龄(46. 8依9. 6) 岁,其中恶性上皮性卵巢肿瘤患者年龄(52. 5依7. 4)岁,良性 上皮性卵巢肿瘤患者年龄(42. 6 依9. 1);正常对照组年龄 (43. 9依12. 7)岁。 样本收集前患者未经过放疗、化疗或手术 治疗。 1. 2 样本收集 术前留取中段晨尿(第一次排尿)约 50ml, -80益保存。 每份尿液按来源做好标记。 研究对象均签署 知情同意书,并获得医院伦理委员会同意。 1. 3 总 RNA 提取 室温(15益 ~ 25益 ) 下完全溶解标本。 采用 miRNeasy Serum/ Plasma Kit For purification of total RNA (QIAGEN)试剂盒抽提总 RNA,使用 eppendorf BioPhotometer plus 仪器进行 RNA 浓度及纯度检测。 逆转录采用 All鄄in鄄 One miRNA qRT鄄PCR Detection Kit ( genecopiea) 试剂盒,取 500ng 总 RNA,将反应体系配成 25滋l。 37益孵育 60min,85益 孵育 5min,以灭活酶。 反应完成后将 cDNA 置-20益 冰箱保 存。 1. 4 Real鄄time qPCR 检测 采用荧光定量 PCR 方法测定各 组尿液中 miR鄄200c 的含量,包括 miR鄄200c鄄3p 与 miR鄄200c鄄 5p。 实时荧光定量所用引物为 genecopiea 公司购买的 miPro鄄 file miRNA qPCR Primer hsa鄄miR鄄200c鄄5p ( Catalog number: HmiRQP0301 ); hsa鄄miR鄄200c鄄3p ( Catalog number: HmiRQP0302 ), 以 U6 为 内 参 ( Catalog number: HmiRQP9001)。 PCR 所用试剂盒为 genecopiea 公司 All鄄in鄄 One miRNA qRT鄄PCR Detection Kit,参照试剂盒步骤并对最 佳条件的反复摸索:反应体系为:10滋l 2 伊All鄄in鄄One qPCR Mix;2. 5滋l All鄄in鄄One miRNA qPCR Primer; 2滋l Universal Adaptor PCR Primer;4滋l Frist鄄strand cDNA( 稀释 5 倍后使 用);0. 4滋l 50伊ROX Reference Dye;1. 1滋l double distilled wa鄄 ter。 程序依次如下:95益 10min;3 步循环 95益 10s,60益 32s, 72益32s,45 个循环。 每个标本设 2 个复孔。 计算每个样本 各复孔的 Ct 值均值作为实际样本 Ct 值,减去同一样本内参 U6 的 Ct 值均值,得到 驻Ct 值。 结果采用 驻Ct 值分析。 1. 5 统计学处理 采用 SPSS17. 0 统计学软件,正态资料用 x軃依s 表示,采用单因素方差分析或独立样本 t 检验;非正态资 料用中位数(四分位数区间)表示,采用非参数 Mann Whitney U 检验;受试者工作曲线(ROC 曲线)判断血浆 miR鄄200c 诊 断卵巢肿瘤的灵敏度和特异度。 P<0. 05 为差异有统计学意 义。 2 结 果 2. 1 荧光定量 PCR 扩增曲线 miR鄄200c鄄3p 组含 量较高,可检测到其 Ct 值在正常扩增范围之间,溶 解曲线显示为单一有效扩增,结果可信。 miR鄄200c鄄 5p 的 Ct 值大于 40,且溶解曲线显示为非目标产物 有效扩增。 2. 2 各组患者尿液中 miR鄄200c鄄3p 相对含量 卵 巢肿瘤组尿液中 miR鄄200c鄄3p 含量高于健康对照 组,差异有统计学意义(P<0. 05)。 单因素方差分析 表明,恶性卵巢肿瘤组、良性卵巢肿瘤组和健康对照 组尿液中 miR鄄200c鄄3p 含量比较,差异无统计学意 义(P = 0. 062)。 见表 1。 2. 3 ROC 曲线 以 miR鄄200c鄄3p 驻Ct 值表绘制 ROC 曲线,曲线下面积(AUC) 为 0. 821,miR鄄200c鄄 3p 对于卵巢肿瘤的诊断灵敏度和特异度分别为 63. 7% 和 86. 7% 。 miR鄄200c鄄3p 对诊断卵巢肿瘤有 一定的价值。 见图 1。 表 1 miR鄄200c鄄3p 在卵巢肿瘤组及正常组尿液中的 驻Ct 值 组别 n miR鄄200c鄄3p 驻Ct 值 均值的 95% CI 卵巢肿瘤组 14 6. 1632依1. 23998* 5. 4473 ~ 6. 8792 良性 8 6. 1014依1. 46093 4. 8800 ~ 7. 3227 恶性 6 6. 2457依0. 99765 5. 1987 ~ 7. 2926 健康对照组 6 4. 4323依1. 59654 2. 7569 ~ 6. 1078 *P<0. 05 vs 健康对照组 图 1 ROC 曲线 3 讨 论 目前,临床上常用的上皮性卵巢肿瘤标志物主 要有 CA125、HE4 等,但这些指标检测卵巢肿瘤的 敏感度及特异度普遍较低。 近期研究显示,多种 miRNA 参与肿瘤的发生发展,并伴有血清、尿液等 体液中 miRNA 表达变化, 如膀胱癌患者尿液中 miR鄄96 含量升高,提示 miR鄄96 作为膀胱癌生物标 志物的可能性[6] 。 乳腺癌患者血清中,同时会有 miR鄄29b、miR鄄155、miR鄄197 及 miR鄄205 四种 miRNA 表达,且各 miRNA 的含量较高,能作为乳腺癌的诊 断依据[7] 。 659 现代妇产科进展 2016 年 09 月第 25 卷第 09 期 Prog Obstet Gynecol,Sep. 2016,Vol郾 25,No郾 09
现代妇产科进展2016年09月第25卷第9期 Prog Obstet Gynecol, Sep.2016,Vol25,Na.09 研究发现, miRNA-200c在肿瘤组织中表达显著 mic metastasis in ovarian cancer[ J]. Lancet Oncol, 2006 上调{-9。其作用于卵巢肿瘤机制可能是:miR [4 Liang H, Jiang Z, Xie G, et al. Serum microRNA-145 as a 200c通过抑制ZEB1和ZEB2表达,从而直接作用 novel biomarker in human ovarian cancer[J]. Tumour Bi- 于上皮间质转化( epithelia- to-mesenchymal transi ol,2015,36(7):5305-5313 tion,EMT)过程。EMT中,miR-200c表达下降,继而 [5] Guo F, Tian J, Lin Y, et al. Serum microRNA-92 expres- sion in patients with ovarian epithelial carcinoma[ J].J 出现ZEB1和ZEB2表达上调,而ZEB1和ZEB2能 Int Med res,2013,41(5):1456-1461 结合CDH的启动子区域阻碍E钙黏蛋白的合[6]Eans,HibH,AE,etl. Evaluation of urinary mil 成,进而降低细胞间的黏附力0。有研究显示 NA-96 as a potential biomarker for bladder cancer diagne sis[J]. Med Oncol, 2015, 32(1):413 卵巢肿瘤血清中 mirnA-200家族 mirnA200a、b和[7] Shaker O, Maher M, Nassar Y,etal. Role of microrNA c表达均呈高表达,且miR200c升高最显著12 29b-2.-155.197 and-205 as diagnostic biomarkers in um of breast cancer females[J]. Gene, 2015, 560(1) Gao等3还发现,血清中 mirnA200c升高程度与 77-82 恶性卵巢肿瘤的分期呈正相关性。 [8]雷磊,王艳丽,梁静,等.卵巢上皮癌差异表达 micro 本次实验是国内外首次在卵巢肿瘤患者的尿液 NAs的筛选研究[J].现代肿瘤医学,2013,21(2):398- 中检测miR-200c的含量。对于尿液中 mirNA检测 J Cao Q, Lu K, Dai S, et al. Clinicopathological and prog- 的内参目前存在多种说法,如mR-128711、mR29 nostic implications of the miR-200 family in patients with epithelial ovarian cancer[ J]. Int J Clin Exp Pathol, 2014 miR-2001、RNU486。本实验采用目前广泛使用 7(5):2392-2401 的U6作为内参-),结果证明其检测值相对稳定。[10 Chen D.amg,Wang, et al. MicroN200e 实验过程中仅采用有限的样本例数,但进行了miR CDI17CD44 ovarian cancer stem cells by regulating NA总量及U6双校正以确保结果的可靠性,同时结 ithelial-mesenchymal transition [J]. J Ovarian Res 合国外类似研究的操作规范从而达到实验设计、收 013,6(1):50 [11] Cochrane DR, Spoelstra NS, Howe EN, et al. MicroRNA. 样、操作过程中的科学性。本实验结果显示,肿瘤组 与正常对照组尿液中miR-200c3p含量比较,差异 microtubule-targeting chemotherapeutic agents [J]. Mol Cancer ther,2009,8(5):1055-1066 有统计学意义(P<0.05);良性卵巢肿瘤、恶性卵巢 [12] Kan CW, Hahn MA, Gard GB, et al. Elevated levels of 肿瘤与正常对照组比较,差异无统计学意义(P> irculating microRNA-200 family members correlate with 0.05)。表明mi-200c-3p具有筛选卵巢肿瘤的潜 serous epithelial ovarian cancer[J]. BMC Cancer, 2012 12:627 在价值,这与Gao等研究结果,即mR200c在卵[13] Gao Yc,waJ. MicroRNA-200 c and microRNA-141as 巢肿瘤患者血清中高表达一致。但miR-200c用于 potential diagnostic and prognostic biomarkers an cancer[J]. Tumour Biol, 2015, 36(6): 4843-4850 鉴别良性卵巢肿瘤和恶性卵巢肿瘤的能力有待于进14] Ramachandran K, Saikumar J, Bijou V,eta.Humn 步的研究,其原因可能与尿液中的 miRNA与经肾 miRNome profiling identifies microRNAs differentially 脏等一系列排泄分泌过程相关。同时本研究显示, present in the urine after kidney injury[J]. Clin Chem 2013,59(12):1742-1752 mRNA200c-3p作为卵巢肿瘤的标志物,具有较高[15]LwLL, Cao yh,NiHF, et al. microrna29 c in urinary 的敏感度和特异度,分别为63.7%和86.7%。但本 exosome/ microvesicle as a biomarker of renal fibrosis [J]. Am J Physiol Renal Physiol 研究样本量较小,需不断扩大样本含量以进一步确 F1227 认尿液中miR-200c-3p对卵巢肿瘤的临床价值 [16 Wang G, Chan ES, Kwan BC, et al. Expression of mi- croRNAs in the urine of patients with bladder cance J]. Clin Genitourin Cancer, 2012, 10(2): 106-113 [1] Torre LA, Bray F, Siegel RL, et al. Global cancer statis- [17] Zhou J, Gong G, Tan H, et al. Urinary microRNA-30a-5p tics, 2012[J]. CA Cancer J Clin, 2015, 65(2): 87-108 a potential biomarker for ovarian serous adenocarcinom- [2 Nezhat FR, Apostol R, Nezhat C, et al. New insights in the ma[J]. Oncol Rep,2015,33(6):2915-2923 pathophysiology of and implications for eening and prevention [J]. Am J Obstet Gynecol (收稿日期2016403-21) 015,213(3):262-267 第一作者简介:田雨子(1994-),女,中南大学湘雅医学院临 [3 Tan DS, Agarwal R, Kaye SB. Mechanisms of transcoelo- 床医学博士在读。主要研究方向:卵巢肿瘤标志物 660
研究发现,miRNA鄄200c 在肿瘤组织中表达显著 上调[8-9] 。 其作用于卵巢肿瘤机制可能是: miR鄄 200c 通过抑制 ZEB1 和 ZEB2 表达,从而直接作用 于上皮间质转化 ( epithelial鄄to鄄mesenchymal transi鄄 tion,EMT)过程。 EMT 中,miR鄄200c 表达下降,继而 出现 ZEB1 和 ZEB2 表达上调,而 ZEB1 和 ZEB2 能 结合 CDH1 的启动子区域,阻碍 E鄄钙黏蛋白的合 成,进而降低细胞间的黏附力[10-11] 。 有研究显示, 卵巢肿瘤血清中 miRNA鄄200 家族 miRNA鄄200a、b 和 c 表达均呈高表达,且 miR鄄200c 升高最显著[12] 。 Gao 等[13] 还发现,血清中 miRNA鄄200c 升高程度与 恶性卵巢肿瘤的分期呈正相关性。 本次实验是国内外首次在卵巢肿瘤患者的尿液 中检测 miR鄄200c 的含量。 对于尿液中 miRNA 检测 的内参目前存在多种说法,如 miR鄄1287 [14] 、miR鄄29、 miR鄄200 [15] 、RNU48 [16] 。 本实验采用目前广泛使用 的 U6 作为内参[15-17] ,结果证明其检测值相对稳定。 实验过程中仅采用有限的样本例数,但进行了 miR鄄 NA 总量及 U6 双校正以确保结果的可靠性,同时结 合国外类似研究的操作规范从而达到实验设计、收 样、操作过程中的科学性。 本实验结果显示,肿瘤组 与正常对照组尿液中 miR鄄200c鄄3p 含量比较,差异 有统计学意义(P<0. 05);良性卵巢肿瘤、恶性卵巢 肿瘤与正常对照组比较,差异无统计学意义( P > 0. 05)。 表明 miR鄄200c鄄3p 具有筛选卵巢肿瘤的潜 在价值,这与 Gao 等[13]研究结果,即 miR鄄200c 在卵 巢肿瘤患者血清中高表达一致。 但 miR鄄200c 用于 鉴别良性卵巢肿瘤和恶性卵巢肿瘤的能力有待于进 一步的研究,其原因可能与尿液中的 miRNA 与经肾 脏等一系列排泄分泌过程相关。 同时本研究显示, miRNA鄄200c鄄3p 作为卵巢肿瘤的标志物,具有较高 的敏感度和特异度,分别为 63. 7% 和 86. 7% 。 但本 研究样本量较小,需不断扩大样本含量以进一步确 认尿液中 miR鄄200c鄄3p 对卵巢肿瘤的临床价值。 参 考 文 献 [1] Torre LA,Bray F,Siegel RL,et al. Global cancer statis鄄 tics,2012[J]. CA Cancer J Clin,2015,65(2):87鄄108 [2] Nezhat FR,Apostol R,Nezhat C,et al. New insights in the pathophysiology of ovarian cancer and implications for screening and prevention [ J ]. Am J Obstet Gynecol, 2015,213(3):262鄄267 [3] Tan DS,Agarwal R,Kaye SB. Mechanisms of transcoelo鄄 mic metastasis in ovarian cancer[J]. Lancet Oncol,2006, 7(11):925鄄934 [4] Liang H,Jiang Z,Xie G,et al. Serum microRNA鄄145 as a novel biomarker in human ovarian cancer[J]. Tumour Bi鄄 ol,2015,36(7):5305鄄5313 [5] Guo F,Tian J,Lin Y,et al. Serum microRNA鄄92 expres鄄 sion in patients with ovarian epithelial carcinoma [ J]. J Int Med Res,2013,41(5):1456鄄1461 [6] Eissa S,Habib H,Ali E,et al. Evaluation of urinary miR鄄 NA鄄96 as a potential biomarker for bladder cancer diagno鄄 sis[J]. Med Oncol,2015,32(1):413 [7] Shaker O,Maher M,Nassar Y,et al. Role of microRNAs鄄 29b鄄2,鄄155,鄄197 and鄄205 as diagnostic biomarkers in se鄄 rum of breast cancer females[ J]. Gene,2015,560 (1): 77鄄82 [8] 雷磊,王艳丽,梁静,等. 卵巢上皮癌差异表达 microR鄄 NAs 的筛选研究[J]. 现代肿瘤医学,2013,21(2):398鄄 402 [9] Cao Q,Lu K,Dai S,et al. Clinicopathological and prog鄄 nostic implications of the miR鄄200 family in patients with epithelial ovarian cancer[J]. Int J Clin Exp Pathol,2014, 7(5):2392鄄2401 [10] Chen D,Zhang Y,Wang J,et al. MicroRNA鄄200c over鄄 expression inhibits tumorigenicity and metastasis of CD117 + CD44 + ovarian cancer stem cells by regulating epithelial鄄mesenchymal transition [ J]. J Ovarian Res, 2013,6(1):50 [11] Cochrane DR,Spoelstra NS,Howe EN,et al. MicroRNA鄄 200c mitigates invasiveness and restores sensitivity to microtubule鄄targeting chemotherapeutic agents [ J]. Mol Cancer Ther,2009,8(5):1055鄄1066 [12] Kan CW,Hahn MA,Gard GB,et al. Elevated levels of circulating microRNA鄄200 family members correlate with serous epithelial ovarian cancer[J]. BMC Cancer,2012, 12:627 [13] Gao YC,Wu J. MicroRNA鄄200c and microRNA鄄141 as potential diagnostic and prognostic biomarkers for ovari鄄 an cancer[J]. Tumour Biol,2015,36(6):4843鄄4850 [14 ] Ramachandran K, Saikumar J, Bijol V, et al. Human miRNome profiling identifies microRNAs differentially present in the urine after kidney injury[J]. Clin Chem, 2013,59(12):1742鄄1752 [15] Lv LL,Cao YH,Ni HF,et al. MicroRNA鄄29c in urinary exosome / microvesicle as a biomarker of renal fibrosis [J]. Am J Physiol Renal Physiol,2013,305(8):F1220鄄 F1227 [16] Wang G,Chan ES,Kwan BC, et al. Expression of mi鄄 croRNAs in the urine of patients with bladder cancer [J]. Clin Genitourin Cancer,2012,10(2):106鄄113 [17] Zhou J,Gong G,Tan H,et al. Urinary microRNA鄄30a鄄5p is a potential biomarker for ovarian serous adenocarcino鄄 ma[J]. Oncol Rep,2015,33(6):2915鄄2923 (收稿日期 2016鄄03鄄21) 第一作者简介:田雨子(1994鄄),女,中南大学湘雅医学院临 床医学博士在读。 主要研究方向:卵巢肿瘤标志物。 660 现代妇产科进展 2016 年 09 月第 25 卷第 09 期 Prog Obstet Gynecol,Sep. 2016,Vol郾 25,No郾 09