二、计繁殖数:直单细胞微生物细胞个体数目。()直接法:血球计数板间接法:(二)(活菌)平板菌落计数法厌氧菌培养
二、计繁殖数:单细胞微生物细胞个体数目。 (一)直接法:血球计数板 (二)间接法:(活菌)平板菌落计数法、 厌氧菌培养
直接法(一)血球计数板法(死、活细胞在内的总菌数):coversipbBaciral cels in one ofthegrid's 25largesqunresarecounted,here,thereare12inpractice,several largesquaresaresidewith shaliowcounted and the numbers averaged.Tnewells andgridnumber inhelargesquaremuliplied by25isthenumberin0.02.mm.ThisaAsuspensionofcells is.pipetledonto:thenunbemutipied by 50is thenumberinTrmmThis.rumbermultipliedby1000isslideatthedgeofthecovrslipwhichfas thecounting charriberbycapillaryactionthe number in.a.militer (a cubicin afew minutes the celis settle totheceritimeter),In this case12×25x50x1000=1.5×10cels/mlbottom and couniting can begin.C20 Wadmieh-Thonaon Laneng细胞密度=(4个大格细胞总数/4)×104个/ml;
血球计数板法(死、活细胞在内的总菌数): (一)直接法 细胞密度=(4个大格细胞总数/4)×104个/ml ;
间接法(二)(活菌计数法)Sampleto1mlbecountedDilution-平板菌落计数法1ml1ml1ml1ml1ml9-mlbroth1/1061/1031/1051/101/1001/104(10-)(10-6)(10-2)(10-3)(10-)(10-5)Plate1-mlsamples1591720Toomanycoloniescoloniescoloniescoloniescoloniestocount159×1031.59×105PlateCells (colony-Dilutioncountfactorformingunits)permilliteroforiginalsample
(二)间接法(活菌计数法) 平 板 菌 落 计 数 法
膜过滤培养法milliporefilterStep2MilliporefilterisplacedonatovacuumplatewithagarmediumandincubatedfilteredsampleStep1Aknownvolumeofsample(forexample,Step3Thenumberofcoloniesonthe10liters)is filteredthroughamilliporefilter.plateiscounted (here.26colonies)
膜过滤培养法
(小结)生长繁殖的测定方法特点与应用方法测定细胞数目血球计数板法较快速简便,但较费时薄膜过滤染色法快速简便,适于含菌数很低的空气、水等中的总菌计数平皿菌落计数法简易价廉,但花费时间较长,不能立刻知道结果测定物质量细胞湿重法较为简便,但含水量不定,准确度差细胞干重法较为费时,易受颗粒杂质干扰,敏感度低细胞成分含量法如测定蛋白质、核酸、还原糖的含量等比浊法快速简便,敏感度低,适于不发酵液或液体中的快速总细胞数估计,但需事先标定
生长繁殖的测定方法(小结) 测 定 细 胞 数 目 方法 特点与应用 血球计数板法 较快速简便,但较费时 薄膜过滤染色法 快速简便,适于含菌数很低的空气、水等中的总菌计数 平皿菌落计数法 简易价廉,但花费时间较长,不能立刻知道结果 测 定 物 质 量 比浊法 快速简便,敏感度低,适于不发酵液或液体中的快速 总细胞数估计,但需事先标定 细胞湿重法 较为简便,但含水量不定,准确度差 细胞成分含量法 如测定蛋白质、核酸、还原糖的含量等 细胞干重法 较为费时,易受颗粒杂质干扰,敏感度低