>荧光原位杂交( fluorescent in situ hybridization, FISH) 应用荧光染料标记探针DNA,变性成单链后与待检材料中 (细胞、组织)未知的单链核酸进行特异性结合,形成可被检 测的杂交双链核酸。在荧光显微镜下观察并记录结果。 标记荧光染料 变性&杂交 TX FISH原理示意图
荧光原位杂交（ fluorescent in situ hybridization， FISH） • 应用荧光染料标记探针DNA，变性成单链后与待检材料中 （细胞、组织）未知的单链核酸进行特异性结合，形成可被检 测的杂交双链核酸。在荧光显微镜下观察并记录结果
染色体的5种探针 位点特异性探针 着丝粒探针染色体末端着色探针染色体臂探针全染色体着色探针 GLP CSP TPP APP WPP 过去制备分裂前期的染色体进行分析 现在可直接检测间期细胞的染色质
染色体的5种探针 过去制备分裂前期的染色体进行分析， 现在可直接检测间期细胞的染色质
Centromere 8q24 Telomere MYC csP8(绿色 500kb 200bp GLP MYC(红色) UCSC Genome Browser on Human Feb 2009(GRCh37hg 19) Assembly move<<<<<<>>>>>>zoom in[ 1.5x 3x 10x base zoom out 1.5x 3x 10x100X chr8: 128, 555, 811-129,064, 392, 582 bp. enter position, gene symbol or search terms goMore on-site workshops ch(a4,21)[■pa ■■4 126,9,ee 129,秒6e,e ucec Genes (Refseq, Genbank, CCDs, R ns L Compar at ive Linked. fletch Pothol
Centromere 8q24 Telomere MYC CSP8(绿色) 200bp GLP MYC(红色) 500kb
制片 FISH基本实验过程 DNA 将探针置于载玻片上 RNA PNA 探针的制备与 加盖玻片 标记 在荧光显微镜下观察 变性 检测 杂交
探针的制备与 标记
、主要实验材料 防脱载玻片( premiere公司)、医用砂轮 ·20×20mm盖玻片 ·橡皮胶( rubber cement) ·平板加热器 杂交盒(饭盒) ·恒温水浴锅 ·玻璃染色缸 香柏油 ·荧光显微镜及拍照系统 MYC基因扩增检测试剂盒(广州安必平|BP)
三、主要实验材料 • 防脱载玻片（premiere公司）、医用砂轮 • 20×20mm盖玻片 • 橡皮胶（rubber cement） • 平板加热器 • 杂交盒（饭盒） • 恒温水浴锅 • 玻璃染色缸 • 香柏油 • 荧光显微镜及拍照系统 • MYC 基因扩增检测试剂盒（广州安必平IBP）