Q白血病的分子检测 RQ-PCR的检测系统: ◆该系统内置了96孔PCR仪,且在每个反应孔上 均有一个监测探头用于检测PCR反应管中的荧 光强度。平均每8-12秒就检测一次,以达到实 时检测的目的。 ◆系统中的电脑系统同时不断地分析来自检测系 统的信息,不断计算每个反应管中的荧光强度, 并最终得到CT值 ◆该系统可以根据标准品的C值和拷贝数自动绘 制标准曲线,并计算未知样品中的目的基因拷 贝数
白血病的分子检测 RQ-PCR的检测系统: 该系统内置了96孔PCR仪,且在每个反应孔上 均有一个监测探头用于检测PCR反应管中的荧 光强度。平均每8-12秒就检测一次,以达到实 时检测的目的。 系统中的电脑系统同时不断地分析来自检测系 统的信息,不断计算每个反应管中的荧光强度, 并最终得到CT值。 该系统可以根据标准品的CT值和拷贝数自动绘 制标准曲线,并计算未知样品中的目的基因拷 贝数
Q白血病的分子检测 ◆RQ-PCR方法优点: 灵敏而特异 起点定量 闭管化学(污染的风险低) 没有PCR后处理(无需走胶,拍照等) 高度自动化 定性:单数据点测定 定量:多数据点测定 能做基因分型及SNP鉴定
白血病的分子检测 RQ-PCR方法优点: 灵敏而特异 起点定量 闭管化学(污染的风险低) 没有PCR后处理(无需走胶,拍照等) 高度自动化 定性:单数据点测定 定量:多数据点测定 能做基因分型及SNP鉴定
RQ-PCR的操作流程 从细胞或组织中抽提DNA或RNA 用PCR或RT-PCR扩增特异片段 将PCR产物克隆到合适的载体上 体外转录成RNA片段(仅用于RNA样品) 纯化,定量和系列稀释质粒DNA或RNA 构建标准曲线( CT1Igcopy) 样品的定量检测 校正样品基因拷贝数
RQ-PCR的操作流程 从细胞或组织中抽提DNA或RNA 用PCR或RT-PCR扩增特异片段 将PCR产物克隆到合适的载体上 纯化,定量和系列稀释质粒DNA或RNA 体外转录成RNA片段(仅用于RNA样品) 构建标准曲线(CT υ lgcopy) 样品的定量检测 校正样品基因拷贝数
标准 未知样本
Q白血病分子检测的临床应用 白血病的分子生物学检查对白血病诊断分 型及预后判断有以下几方面意义: ◆补充MC检查的不足 ◆发现新的亚型 ◆监测白血病的微小残留病灶(MRD) ◆为研究白血病的发病机制打下基础
白血病分子检测的临床应用 白血病的分子生物学检查对白血病诊断分 型及预后判断有以下几方面意义: 补充MIC检查的不足 发现新的亚型 监测白血病的微小残留病灶(MRD) 为研究白血病的发病机制打下基础