Q白血病的分子检测 ◆PCR:仅适用于染色体断裂点丛集于相对小 的范围内(<2kb),如TALL中SIL-TALl。 ◆ RT-PCR:可用于染色体断裂点跨越很大的 区域的融合基因。 巢式 RT-PCR:可显著提高反应的特异性, 增加扩增效率。 ◆RQ-PCR:可定量扩增产物
白血病的分子检测 PCR：仅适用于染色体断裂点丛集于相对小 的范围内（<2kb），如T-ALL中SIL-TAL1。 RT-PCR：可用于染色体断裂点跨越很大的 区域的融合基因。 巢式RT-PCR：可显著提高反应的特异性， 增加扩增效率。 RQ-PCR：可定量扩增产物
Q白血病的分子检测 RQ-PCR(Real-time Quantitative PCR) 荧光标记扩增产物 荧光标记引物 特异性荧光标记探针 TaqMan探针、分子信标、杂交双探针 荧光染料直接结合扩增产物 SYBR Green i与DNA双链结合 动态监测荧光信号变化
白血病的分子检测 RQ-PCR（Real-time Quantitative PCR） 荧光标记扩增产物 荧光标记引物 特异性荧光标记探针 TaqMan探针、分子信标、杂交双探针 荧光染料直接结合扩增产物 SYBR Green I与DNA双链结合 动态监测荧光信号变化
o TaqM1an探针法飞 特异性高 多重基因定量 °成本较高 米2
TaqMan探针法 •特异性高 •多重基因定量 •成本较高
Annealing phase SYBR Green法 Extension phase (I 成本低 °最适合初步筛查 熔解曲线功能 Extension phase (l) 无法多重检测 无模板特异性 灵敏度低 End of PCR cycle
SYBR Green I 法 •成本低 •最适合初步筛查 •熔解曲线功能 •无法多重检测 •无模板特异性 •灵敏度低
Q白血病的分子检测 ◆C值:荧光信号有统计学意义显著增长 (穿过阈值线)时的循环次数 ◆CT值与起始模板量成反比
白血病的分子检测 CT值：荧光信号有统计学意义显著增长 （穿过阈值线）时的循环次数 CT值与起始模板量成反比