癱例子1:研究维生素缺乏症,可给以 缺乏某种维生素的饲料,若干天后 观察其病变情况,在加入该种维生 素,观察其症状有否好转,从而确 定该种维生素的功能 例子2:“人工糖尿病”。 例子3:生糖氨基酸 生酮氨基酸
®例子1:研究维生素缺乏症,可给以 缺乏某种维生素的饲料,若干天后 观察其病变情况,在加入该种维生 素,观察其症状有否好转,从而确 定该种维生素的功能。 ®例子2: “人工糖尿病” 。 ®例子3:生糖氨基酸; ® 生酮氨基酸
癱3、代谢物标记追踪实验 将代谢底物分子适当“标记”,然后追 踪“标记”在细胞中的去向,就可以了 解底物分子在中间代谢中经过什么中间 物,生成了什么终产物。 这是探索代谢途径最有效的方法 标记方法有:化学标记法、同位素标记 法 蜂(1)化学标记法 癖1904年,德国FK∩op首次用苯环标记 脂肪酸探讨中间代谢途径,提出著名的 肪酸β一氧化学说 缺点:化学标记法使天然代谢物分子结 构和理化性质发生了两变,这可能给正
® 3、代谢物标记追踪实验 ® 将代谢底物分子适当“标记” ,然后追 踪“标记”在细胞中的去向,就可以了 解底物分子在中间代谢中经过什么中间 产物,生成了什么终产物。 ® 这是探索代谢途径最有效的方法。 ® 标记方法有:化学标记法、同位素标记 法。 ® (1)化学标记法 ® 1904年,德国F.Knoop首次用苯环标记 脂肪酸探讨中间代谢途径,提出著名的 脂肪酸β-氧化学说。 ® 缺点:化学标记法使天然代谢物分子结 构和理化性质发生了改变,这可能给正 常代谢途径造成某些影响
(2)同位素标记法 1941年, Rudolf schoenhe imer首次采用 同位素标记法进行实验。 癱同位素种类:稳定同位素和放射性同位 素 者区别:是否衰变、是否有射线 常用的稳定同位素有:重氢(2H或D 15N、13C、180等 癱用“稳定性同位素”标记的化合物可用 质谱仪( mass spectrometer) s 定量测定, 也可用超离心法分离鉴定。 根据放射线同位素衰变时放出的射线性 质,可以用专门仪器或专用方法测定。 台用的放同启老 台3
® (2)同位素标记法 ® 1941年,Rudolf Schoenheimer首次采用 同位素标记法进行实验。 ® 同位素种类:稳定同位素和放射性同位 素。 ® 二者区别:是否衰变、是否有射线。 ® 常用的稳定同位素有:重氢(2H或D)、 15N、 13C、 18O等。 ® 用“稳定性同位素”标记的化合物可用 质谱仪(mass spectrometer)定量测定, 也可用超离心法分离鉴定。 ® 根据放射线同位素衰变时放出的射线性 质,可以用专门仪器或专用方法测定。 常用的放射性同位素有氘(T或3H)、 14C、 32P、 34S、 131I
仪器:盖格计数器( Geiger counter)、闪烁计数器。 嫌例如:Y射线可用γ计数器测定 B射线可用液体闪烁计数器测定 秦也可采用:放射自显影法 ( autoradiography)感光底片 感光显示标记物在细胞中的位置。 癱优点:1)同位素标记法特异性 强,灵敏度高,测定方法简便
®仪器:盖格计数器(Ge i g e r counter)、闪烁计数器。 ®例如:γ射线可用γ计数器测定; β射线可用液体闪烁计数器测定。 ®也 可 采 用 : 放 射 自 显 影 法 (autoradiography)感光底片 感光显示标记物在细胞中的位置。 ®优点:1)同位素标记法特异性 强,灵敏度高,测定方法简便
2)放射性同位素分析方法比 稳定同位素更方便、灵敏 应用更普遍。 缺点:放射性同位素对人体 有毒害,某些同位素的半衰 明长,容易造成环境污染 所以需要在专门的同位素实 验时进行
®2)放射性同位素分析方法比 稳定同位素更方便、灵敏, 应用更普遍。 ®缺点:放射性同位素对人体 有毒害,某些同位素的半衰 期长,容易造成环境污染, 所以需要在专门的同位素实 验时进行