原核微生物染色体外遗传因子NickRotateoneendofbrokenstrandaroundhelix and sealBreak one strandSupercoiledRelaxed,nickedcircularDNAcircular DNAFigure 6.7 Supercoiled circular DNA and relaxed, nicked cir-cular DNA interconversions.A nick is a break in a phosphodiesterbondof onestrand
一、质粒的分子结构 1、结构 通常以共价闭合环状的超螺旋双链DNA分子存在于细胞中; 也发现有线型双链DNA质粒和RNA质粒; 质粒分子的大小范围从1 kb左右到1000kb; (细菌质粒多在10 kb以内) 原核微生物染色体外遗传因子 16
对于由于三种构型同时存在时造成的多带现象(提取质粒时造成或自然存在)可以进行特异性单酶切,使其成为一条带。使染CCCOC
原核微生物染色体外遗传因子 一、质粒的分子结构 2、质粒的检测 提取所有胞内DNA后电镜观察; 琼脂糖凝胶电泳或超速离心后观察; 对于由于三种构型同时存在时造成的多带现象(提取质粒时造成或自然存在), 可以进行特异性单酶切,使其成为一条带。 特定的质粒提取方法和后处理使染 色体和RNA均被除掉。 17
一、质粒的分子结构2、质粒的检测提取所有胞内DNA后电镜观察琼脂糖凝胶电泳或超速离心后观察;对于实验室常用菌,可用质粒所带的某些特点,如抗药性初步判断。对于已知质粒,可用DNA-DNA杂交,或者PCR技术进行检测18
一、质粒的分子结构 2、质粒的检测 提取所有胞内DNA后电镜观察; 琼脂糖凝胶电泳或超速离心后观察; 对于实验室常用菌,可用质粒所带的某些特点, 如抗药性初步判断。 对于已知质粒,可用DNA-DNA杂交,或者PCR技术 进行检测。 18
原核微生物染色体外遗传因子质粒的主要类型质粒与宿主的关系:质粒所含的基因对宿主细胞一般是非必需的;在某些特殊条件下,质粒有时能赋予宿主细胞以特殊的机能从而使宿主得到生长优势19
原核微生物染色体外遗传因子 二、质粒的主要类型 质粒与宿主的关系: 质粒所含的基因对宿主细胞一般是非必需的; 在某些特殊条件下,质粒有时能赋予宿主细胞以特殊的机能, 从而使宿主得到生长优势。 19
二、质粒的主要类型致育因子(Fertilityfactor,F因子)抗性因子(Resistancefactor,R因子)质粒所编码的产细菌素的质粒功能和(Bacteriocinproductionplasmid)赋予宿主的表毒性质粒(virulenceplasmid)型效应代谢质粒(Metabolicplasmid)隐秘质粒(cryptic plasmid)20
二、质粒的主要类型 质粒所 编码的 功能和 赋予宿 主的表 型效应 致育因子(Fertility factor,F因子) 抗性因子(Resistance factor,R因子) 产细菌素的质粒(Bacteriocin production plasmid) 毒性质粒(virulence plasmid) 代谢质粒(Metabolic plasmid) 隐秘质粒(cryptic plasmid) 20