二、目的基因的筛选与获取 (1)DNA复制所需的条件 参与的组分 在DNA复制中的作用 解旋酶(在体外用高温代替) 打开DNA双链 DNA母链 提供DNA复制的原料 4种脱氧核苷酸 合成DNA子链的原料 DNA聚合酶 催化合成DNA子链 引物 使DNA聚合酶能够从引物的3 端开始连接脱氧核苷酸 (2)扩增所需的条件: 模板(目的基因)、引物、4种脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶 (3)扩增过程中每一次循环的步骤:变性、复性、延伸
二、目的基因的筛选与获取 (1)DNA复制所需的条件 参与的组分 在DNA复制中的作用 解旋酶(在体外用高温代替) 打开DNA双链 DNA母链 提供DNA复制的原料 4种脱氧核苷酸 合成DNA子链的原料 DNA聚合酶 催化合成DNA子链 引物 使DNA聚合酶能够从引物的3` 端开始连接脱氧核苷酸 (2)扩增所需的条件: 模板(目的基因)、引物、4种脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶 (3)扩增过程中每一次循环的步骤: 变性、复性、延伸
二、目的基因的筛选与获取 (3)扩增的过程 T3 n m DNA模板4种脱氧核背酸 5 耐高温的DNA聚合惭 引物 5 FLLLTITI 3 n mmmnnnnn 5 3 变性当温度上升到90℃以 上时,双链DNA解聚为单链复性当温度下降到50℃左 5 UUuUU 右时,两种引物通过碱基互 延伸当温度上升到72℃左右时, 补配对与两条单链DNA结合 溶液中的4种脱氧核苷酸在耐高温 第一轮循环的产物作为 的DNA聚合酶的作用下,根据碱 第二轮反应的模板 基互补配对原则合成新的DNA链 过变性、复性和延伸 步产生第二轮循环的产 mmm' 3 第二轮循环的产物作为第三 轮反应的模板,经过变性、 复性和延伸三步产生第三轮 循环的产物
二、目的基因的筛选与获取 (3)扩增的过程