（三）原核细胞DNA的复制 （DNA指导的DNA合成） 1、大肠杆菌的DNA 聚合酶 (DNApolymerase,D NApol)： ◼ 催化形成新的磷 酸二酯键； ◼ 有外切酶活性
（三）原核细胞DNA的复制 （DNA指导的DNA合成） 1、大肠杆菌的DNA 聚合酶 (DNApolymerase,D NApol)： ◼ 催化形成新的磷 酸二酯键； ◼ 有外切酶活性
1) E.COLi DNA聚合酶Ⅰ ◼ 需要原料： ◼ 4种dNTP； ◼ DNA模板； ◼ 与模板互补的一段DNA引物； ◼ Mg2+； ◼ Zn 2+ （酶活性部位）；
1) E.COLi DNA聚合酶Ⅰ ◼ 需要原料： ◼ 4种dNTP； ◼ DNA模板； ◼ 与模板互补的一段DNA引物； ◼ Mg2+； ◼ Zn 2+ （酶活性部位）；
DNA聚合酶Ⅰ功能： ◼ 催化dNTP加到DNA链的3’-OH末端 （方向5’ →3’） 。 ◼ 5’ →3’外切酶活性，可切除引物； ◼ 3’ → 5’外切酶活性，可纠错；
DNA聚合酶Ⅰ功能： ◼ 催化dNTP加到DNA链的3’-OH末端 （方向5’ →3’） 。 ◼ 5’ →3’外切酶活性，可切除引物； ◼ 3’ → 5’外切酶活性，可纠错；
2) DNA聚合酶Ⅱ: ◼ 反应需Mg2+ 、NH4 + ； ◼ 反应同酶1,聚合活力很低； ◼ 具3’ → 5’外切酶活性； 3) DNA聚合酶 Ⅲ： ◼ 主要负责DNA链延伸； ◼ 具3’ → 5’外切酶活性；
2) DNA聚合酶Ⅱ: ◼ 反应需Mg2+ 、NH4 + ； ◼ 反应同酶1,聚合活力很低； ◼ 具3’ → 5’外切酶活性； 3) DNA聚合酶 Ⅲ： ◼ 主要负责DNA链延伸； ◼ 具3’ → 5’外切酶活性；
DNA聚合酶Ⅰ DNA聚合酶Ⅱ DNA聚合酶Ⅲ 亚基数目 1（单体酶） ＞1（多亚基酶 ） ＞1（多亚基酶） 5’ 3’聚合活性 + 中 + 很低 + 很高 3‘ 5’外切活性 + + + （保护DNA复制的 忠实性fidelity） 5‘ 3’外切活性 + - - 主要是对DNA损伤的 修复；以及在DNA复 制时切除RNA引物并 填补其留下的空隙。 修复紫外光引起 的DNA损伤 DNA 复制的主要 聚合酶，还具有 3’-5‘ 外切酶 的校对功能，提 高DNA复制的保 真性
DNA聚合酶Ⅰ DNA聚合酶Ⅱ DNA聚合酶Ⅲ 亚基数目 1（单体酶） ＞1（多亚基酶 ） ＞1（多亚基酶） 5’ 3’聚合活性 + 中 + 很低 + 很高 3‘ 5’外切活性 + + + （保护DNA复制的 忠实性fidelity） 5‘ 3’外切活性 + - - 主要是对DNA损伤的 修复；以及在DNA复 制时切除RNA引物并 填补其留下的空隙。 修复紫外光引起 的DNA损伤 DNA 复制的主要 聚合酶，还具有 3’-5‘ 外切酶 的校对功能，提 高DNA复制的保 真性