◼ 密码子的破译是分子生物学发展史 上的一件大事。主要运用了两项技 术，一项是1961年由Nirenberg等报 道的人工合成多聚核苷酸体外翻译 技术；另一项是1964年Nirenberg和 Leder发明的核糖体结合技术。 ◼ 这两项技术的出现，为密码子的破 译奠定了基础
◼ 密码子的破译是分子生物学发展史 上的一件大事。主要运用了两项技 术，一项是1961年由Nirenberg等报 道的人工合成多聚核苷酸体外翻译 技术；另一项是1964年Nirenberg和 Leder发明的核糖体结合技术。 ◼ 这两项技术的出现，为密码子的破 译奠定了基础
破译密码的实验研究先后由三个实验 室逐步发展了四种破译方法，于1965 年完成。 ◼ 1) 在体外无细胞蛋白质合成体系中加 入人工合成的polyＵ开创了破译遗传密 码的先河。1961年，美国NIH的 Nirenberg和Mathaei第一次确认了UUU 是Phe的密码子 。随后他们又确定了 AAA是Lys的密码子，CCC是Pro的密 码子
破译密码的实验研究先后由三个实验 室逐步发展了四种破译方法，于1965 年完成。 ◼ 1) 在体外无细胞蛋白质合成体系中加 入人工合成的polyＵ开创了破译遗传密 码的先河。1961年，美国NIH的 Nirenberg和Mathaei第一次确认了UUU 是Phe的密码子 。随后他们又确定了 AAA是Lys的密码子，CCC是Pro的密 码子
◼ 2) 混合共聚物(mixed copolymers)实验 对密码子中碱基组成的测定 1963年，Speyer和Ochoa等发展了用两 个碱基的共聚物破译密码的方法。例 如以A和C原料，合成polyAC。但这个 方法不能确定碱基的排列方式，而只 能显示密码子中碱基组成及组成比例。 另外，通过反复改变共聚物成份比例 的方法亦十分麻烦和费时
◼ 2) 混合共聚物(mixed copolymers)实验 对密码子中碱基组成的测定 1963年，Speyer和Ochoa等发展了用两 个碱基的共聚物破译密码的方法。例 如以A和C原料，合成polyAC。但这个 方法不能确定碱基的排列方式，而只 能显示密码子中碱基组成及组成比例。 另外，通过反复改变共聚物成份比例 的方法亦十分麻烦和费时
◼ 3) aa-tRNA与确定的三核苷酸序列(密码子) 结合（核糖体结合技术） Nirenberg和Leder于1964年建立了破译密码 子的新方法，即tRNA与确定密码子结合实 验。即是在缺乏蛋白质合成所需的因子的 条件下，特异氨基酸-tRNA(aa-tRNA)也能 与核糖体-mRNA复合物结合。最重要的是 这种结合并不一定需要长的mRNA分子 。 但有一些三核苷酸序列与核糖体结合并不 象UUU或GUU等那样有效
◼ 3) aa-tRNA与确定的三核苷酸序列(密码子) 结合（核糖体结合技术） Nirenberg和Leder于1964年建立了破译密码 子的新方法，即tRNA与确定密码子结合实 验。即是在缺乏蛋白质合成所需的因子的 条件下，特异氨基酸-tRNA(aa-tRNA)也能 与核糖体-mRNA复合物结合。最重要的是 这种结合并不一定需要长的mRNA分子 。 但有一些三核苷酸序列与核糖体结合并不 象UUU或GUU等那样有效
Table 282 Experiment ahowing that trinucleotides are sumcfent to induce specife binding of aminoacyl-tRNAa to ribosomes C-Labeled aminoacyl-tRNA bound to ribonome Trinucleotide Phe-tRNAP Ly-(RNAL Pro-tRNAPO UUU 4.6 0 0 AAA 0 7,7 0 ccc 0 0 31 Souree:Modified from Nirenberg.M.Leder.P.11964)RNA code words and protein synthesis Se145.1399 .The numbers represent factors by which the amount.of bound c increased when the indicated trinucleotide was present,relative to controls in which no trinucleotide was added