历有文通大学 Southwest Jiaotong University 7.1概述 7.1.2千扰素生产工艺路线 ①体外诱生干扰素制备工艺： Sendai（仙台)病毒诱 导人白细胞产生，人白干扰素。 ●1989年：FNa-n3/Alferon,批准上市 ●产量低：1gFNa,需要3亿ml人新鲜血白细胞 ●来源困难，工艺复杂，收率低，价格昂贵 ●潜在的血源性病毒污染的可能性 血浆人白细胞人分离纯化>人白干扰素 ① 病毒诱导
7.1.2 干扰素生产工艺路线 ①体外诱生干扰素制备工艺： Sendai（仙台）病毒诱 导人白细胞产生，人白干扰素。 l1989年：IFNα-n3/Alferon，批准上市 l产量低：1g IFNα，需要 3亿ml人新鲜血白细胞 l来源困难，工艺复杂，收率低，价格昂贵 l潜在的血源性病毒污染的可能性 血浆 人白细胞 分离纯化 人白干扰素 病毒诱导 • • • 7.1 概述
历有文通大学 Southwest Jiaotong University 7.1概述 7.1.2干扰素生产工艺路线 ②人源转化细胞系培养生产工艺： ●1999年：IFNa-nl,Bechenhan Wellcome批准上市 ●优点：首次实现大规模商业化生产。 ●缺点：活性低，退出临床应用。 Namalwa转化细胞代 替人白细胞 Namalva培养>合成千扰素 二人分离纯化 0 病毒诱导 多亚型混合干扰素
Namalva培养 多亚型混合干扰素 分离纯化 病毒诱导 合成干扰素 7.1 概述 v7.1.2 干扰素生产工艺路线 ②人源转化细胞系培养生产工艺： l1999年：IFNα-n1, Bechenhan Wellcome 批准上市 l优点：首次实现大规模商业化生产。 l缺点：活性低，退出临床应用。 Namalwa 转化细胞代 替人白细胞
历有文通大学 Southwest Jiaotong Unlversity 7.1概述 7.1.2千扰素生产工艺路线 ③基因工程大肠杆菌发酵生产工艺： ●上市产品：重组人千扰素rhuIFN 1986,rhuIFNa-2a,rhuIFNa-2b; 1990,rhuIFNy-1b;1993,rhuIFNB-1b; 0 2001-2002:PEGIFN,PEG-Intron,Pegasys 表达产物：无糖基化，N-met,无活性的包涵体，脱离 了需要人鲜血，纯度提高，第一代基因工程干扰素。 ● 工艺特点：发酵过程，随后变性、复性过程。 培养纯化阶段仍然需要血液提取物，存在血源性污染。 重组人 工程菌构建〉发酵培养包涵体 〉复性 〉 干扰素
7.1 概述 • • 发酵培养 包涵体 复性 重组人 工程菌构建 干扰素 7.1.2 干扰素生产工艺路线 ③基因工程大肠杆菌发酵生产工艺: l 上市产品：重组人干扰素rhuIFN l 1986，rhuIFNα-2a， rhuIFNα-2b； l 1990，rhuIFNγ-1b；1993，rhuIFNβ-1b； l 2001-2002： PEG化IFN，PEG-Intron, Pegasys l 表达产物：无糖基化，N-met，无活性的包涵体，脱离 了需要人鲜血，纯度提高，第一代基因工程干扰素。 l 工艺特点：发酵过程，随后变性、复性过程。 l 培养纯化阶段仍然需要血液提取物，存在血源性污染
历有文通大学 Southwest Jiaotong University 7.1概述 7.1.2千扰素生产工艺路线 ④基因工程假单胞杆菌发酵生产工艺： ●宿主：腐生型假单胞杆菌（Pseudomonas putida). ●上市产品：IFN-2b/安福隆 ●表达产物：无糖基化可溶性蛋白质，具有天然分子 结构和生物活性0-2b ●工艺特点： ●发酵周期短：几个小时 ●无需变性、复性过程，获得有活性产品 ●纯化过程：淘汰抗体亲和层析，采用非血清白蛋白保 护剂，无血源性污染，纯度高
7.1 概述 7.1.2 干扰素生产工艺路线 ④ 基因工程假单胞杆菌发酵生产工艺： l宿主：腐生型假单胞杆菌（Pseudomonas putida） l上市产品：IFN α-2b/安福隆 l表达产物：无糖基化可溶性蛋白质，具有天然分子 结构和生物活性 α-2b l工艺特点： l发酵周期短：几个小时 l无需变性、复性过程，获得有活性产品 l纯化过程：淘汰抗体亲和层析，采用非血清白蛋白保 护剂，无血源性污染，纯度高