DNA的半保留复制的 概念 DNA在复制时，两条 链解开分别作为模板，在 DNA聚合酶的催化下按碱 基互补的原则合成两条与 模板链互补的新链，以组 成新的DNA分子。这样新 形成的两个DNA分子与亲 代DNA分子的碱基顺序完 全一样。由于子代DNA分 子中一条链来自亲代，另 一条链是新合成的，这种 复制方式称为半保留复制
DNA的半保留复制的 概念 DNA在复制时，两条 链解开分别作为模板，在 DNA聚合酶的催化下按碱 基互补的原则合成两条与 模板链互补的新链，以组 成新的DNA分子。这样新 形成的两个DNA分子与亲 代DNA分子的碱基顺序完 全一样。由于子代DNA分 子中一条链来自亲代，另 一条链是新合成的，这种 复制方式称为半保留复制
DNA 的半 保留 复制 实验 依据 1958年Meselson & stahl用同位素 示踪标记加密度 梯度离心技术实 验,证明了DNA是 采取半保留的方 式进行复制. [ 15N] DNA [ 14N- 15N] DNA [ 14N] DNA [ 14N- 15N] DNA
DNA 的半 保留 复制 实验 依据 1958年Meselson & stahl用同位素 示踪标记加密度 梯度离心技术实 验,证明了DNA是 采取半保留的方 式进行复制. [ 15N] DNA [ 14N- 15N] DNA [ 14N] DNA [ 14N- 15N] DNA
复制中的大肠杆菌染色体放射自显影图 (Caims实验) 将3H-胸苷标记大肠杆菌DNA，经过近两代的时间，3H-胸苷掺入大肠杆 菌DNA 。用溶菌酶把细胞壁消化掉，使完整的大肠杆菌染色体DNA释放出 来，放射自显影，得到上图。非复制部分（C）银粒子密度较低，由一股放 射性链和一股非放射性链构成。已复制部分站整个染色体的三分之二，其中 一条双链（ B ）仅有一股链是标记的，另外一股双链（A）的两股链都是 标记的，银粒子密度为前二者的两倍。染色体全长约为1100微米。 A B C 环状DNA的复制 A B C
复制中的大肠杆菌染色体放射自显影图 (Caims实验) 将3H-胸苷标记大肠杆菌DNA，经过近两代的时间，3H-胸苷掺入大肠杆 菌DNA 。用溶菌酶把细胞壁消化掉，使完整的大肠杆菌染色体DNA释放出 来，放射自显影，得到上图。非复制部分（C）银粒子密度较低，由一股放 射性链和一股非放射性链构成。已复制部分站整个染色体的三分之二，其中 一条双链（ B ）仅有一股链是标记的，另外一股双链（A）的两股链都是 标记的，银粒子密度为前二者的两倍。染色体全长约为1100微米。 A B C 环状DNA的复制 A B C
原核生物DNA聚合反应有关的酶类 （1）DNA聚合酶(DNA polymetases) （2）拓扑异构酶 (topoisomerase):兼具内切酶和 连接酶活力，能迅速将DNA超螺 旋或双螺旋紧张状态变成松驰状 态，便于解链。 (3） DNA解链酶(DNA helicase) （4）单链结合蛋白(singlestrand binding protein,SSB)： 结合在解开的DNA单链上，防止 重新形成双螺旋。 (5）引物酶(peimase)和引发体 (primosome) ：启动RNA引物链 的合成。 (6）DNA连接酶（DNA ligase） 解旋酶 DNA聚 合酶III 解链酶 RNA引物 引物酶和 引发体 DNA聚 合酶I SSB 3´ 3´ 5´ 5´ 3´ 5´ RNA 引物
原核生物DNA聚合反应有关的酶类 （1）DNA聚合酶(DNA polymetases) （2）拓扑异构酶 (topoisomerase):兼具内切酶和 连接酶活力，能迅速将DNA超螺 旋或双螺旋紧张状态变成松驰状 态，便于解链。 (3） DNA解链酶(DNA helicase) （4）单链结合蛋白(singlestrand binding protein,SSB)： 结合在解开的DNA单链上，防止 重新形成双螺旋。 (5）引物酶(peimase)和引发体 (primosome) ：启动RNA引物链 的合成。 (6）DNA连接酶（DNA ligase） 解旋酶 DNA聚 合酶III 解链酶 RNA引物 引物酶和 引发体 DNA聚 合酶I SSB 3´ 3´ 5´ 5´ 3´ 5´ RNA 引物
拓扑异构酶 (topoisomerase) • 拓扑异构酶Ⅰ可使 DNA双链中的一 条链切断，松开双 螺旋后再将DNA 链连接起来，从而 避免出现链的缠绕。 拓扑异构酶Ⅱ可切 断DNA双链，使 DNA的超螺旋松 解后，再将其连接 起来。 大肠杆菌拓朴异构酶Ⅰ的结构
拓扑异构酶 (topoisomerase) • 拓扑异构酶Ⅰ可使 DNA双链中的一 条链切断，松开双 螺旋后再将DNA 链连接起来，从而 避免出现链的缠绕。 拓扑异构酶Ⅱ可切 断DNA双链，使 DNA的超螺旋松 解后，再将其连接 起来。 大肠杆菌拓朴异构酶Ⅰ的结构