检测信号侧向散射光及荧光(SS) (FL1—FL4)前向散射光(FS)LaserBeamFlowCell前向角散射光,FSC:细胞相对大小及其表面积D侧向角散射光,SSC:细胞颗粒度及细胞器的相对复杂性
前向角散射光,FSC:细胞相对大小及其表面积 侧向角散射光,SSC:细胞颗粒度及细胞器的相对复杂性
外周全血细胞散射光双参数点图(红细胞溶解后)淋巴细胞:体积小,细胞内颗粒少,分布在在处于FSC、SSC都较小区域。粒细胞:体积较大,细胞内颗粒最多,分布在FSC大SSC最大的区域。FSC中性粒细胞单核细胞:体积较大,细胞单核细胞内颗粒较粒细胞少,淋巴细胞多,分布在二者之间。D区D区:红细胞裂解碎片和少量淋巴细胞的血小板等。SSC光散射测量最有效用途:从非均一群体中鉴别出某些亚群
淋巴细胞:体积小,细胞内 颗粒少,分布在在处于FSC、 SSC都较小区域。 粒细胞:体积较大,细胞内 颗粒最多,分布在FSC大, SSC最大的区域。 单核细胞:体积较大,细胞 内颗粒较粒细胞少,淋巴细 胞多,分布在二者之间。 D区:红细胞裂解碎片和少量 的血小板等。 淋巴细胞 单核细胞 中性粒细胞 光散射测量最有效用途:从非均一群体中鉴别出某些亚群 FSC SSC D区 外周全血细胞散射光双参数点图 (红细胞溶解后)
三、荧光测量荧光信号由被检细胞上标记的特异性荧光染料受激发后产生,发射的荧光波长与激发光波长不同。每种荧光染料会产生特定波长的荧光和颜色,通过波长选择通透性滤片,可将不同波长的散射光和荧光信号区分开,送入不同的光电倍增管。选择不同的单抗及染料就可同时测定一个细胞上的多个不同特征。线性放大器和对数放大器
• 荧光信号由被检细胞上标记的特异性荧光染料受激 发后产生,发射的荧光波长与激发光波长不同。 • 每种荧光染料会产生特定波长的荧光和颜色,通过 波长选择通透性滤片,可将不同波长的散射光和荧 光信号区分开,送入不同的光电倍增管。 • 选择不同的单抗及染料就可同时测定一个细胞上的 多个不同特征。 • 线性放大器和对数放大器 三、荧光测量
常用荧光染料的特性颜色用途荧光染料激发波长(nm)发射波长(nm)525绿色488FITC免疫荧光橙色575免疫荧光488PE(RD1)橙红488ECD620免疫荧光488675深红PeCy5免疫荧光PI488橙红620DNA染色