增变基因类别;DNApolymerase相关基因3'→5'editingfunctionmutation突变的重要来源修复过程是基因错配修复系统的基因MCE (mismatch correction enzyme)DNA损伤修复系统基因错配修复功能丧失,突变率升高
增变基因类别; DNA polymerase 相关基因 3’ 5’ editing function mutation 错配修复系统的基因 MCE (mismatch correction enzyme) DNA 损伤修复系统基因 错配修复功能丧失,突变率升高 修 复 过 程 是 基 因 突 变 的 重 要 来 源
geneexpressionTargetedactivateUAS-gene梨expressionby7.2.2诱发突变genetic crossingLibraryoTGAL4-GFPUAS linecnnancertraninesPALL生物技术创造变异7.2.2.1促进自然和谐发展
7.2.2.1 生物技术创造变异 促进自然和谐发展 7.2.2 诱发突变
基因的定点诱变·oligo-dNt介导的定点诱变Wt.primer targetGAGATATTTTCCMut.primer.. CTCTATAAAAGG...GAGATCTTTTCC.--GAGATCTT TTCC...CTCCTCTATAAAAGGreplicationGAGATCTTTTCCreplication
- CTC TATAAAAGG- replication replication GAGATCTTTTCC -GAGATCTT TTCC- CTCCTCTATAAAAGG GAGATCTTTTCC Mut. primer GAGATATTTTCC Wt. primer target 基因的定点诱变 • oligo-dNt 介导的定点诱变
w.tmut.TATAAAATA G AAAAAT ATTTTAT C TTTT合成与靶基因区段互补并含突变位点的oligo-dNt错配位点不能在3°-endReplicationtwotimes
合成与靶基因区段互补并含突变位点的oligo-dNt 错配位点不能在3‘-end Replication two times w.t mut
cp1mpl·引物重叠延伸的PCR诱变002cp2mp2设计两突变引物第一次PCR(mut.P1 & mut.P2)两通用引物(commonP1&commonP2)两次PCR混合,延伸聚合其中一对部分双链分子5'5'不能进行第二次PCR5*另一对部分双链分子5'的PCR产物为诱变基因第二次PCRcp1kPCR诱变基因cp2
两通用引物 (common P1 & common P2) 设计两突变引物 (mut.P1 & mut.P2) 两次PCR 其中一对部分双链分子 不能进行第二次PCR 另一对部分双链分子 的PCR产物为诱变基因 • 引物重叠延伸的PCR诱变 mp1 mp2 cp2 cp1 第一次PCR 混合,延伸聚合 5’ 5’ 5’ 5’ PCR诱变基因 第二次PCR cp1 cp2