2蛋白质溶解 蛋白质溶解:相似者相溶 aa的亲水性和疏水性: 疏水性 亲水性 芳香族非极性脂眆族杂环类极性脂肪族离子化 有利因素:亲水性,包括氢键、极 出6 性基团、离子化侧链、亲水a所 占的%等。如白蛋白 不利因素:疏水性,包括暴露的疏∝水分Q 水基团、疏水aa所占的%等。如 ④阳离子曲荷负电区域 e阴离子荷正电区城 纤维蛋白原。 蛋白质表面特征
2 蛋白质溶解 蛋白质溶解：相似者相溶 aa的亲水性和疏水性： 有利因素：亲水性，包括氢键、极 性基团、离子化侧链、亲水aa所 占的%等。如白蛋白 不利因素：疏水性，包括暴露的疏 水基团、疏水aa所占的%等。如 纤维蛋白原
3蛋白质溶液的稳定因素 )、水化层 hydration shel) Tight hydration shell tight hydration shell(0. 35g water/I gpro) Protein core loose hydration shell(2g water/1g pro) Loose hydration shel 2)、静电排斥→ξZeta电势 Nernst potential--胶核表面电位(不可测) Stern potentia-(不可测) Potential-滑面电位(可测, mobility 双电层 ξ电位 排:… Nernst电位 ionic strength 3)、|pH水- pl value pH水-plⅤalue↑eta电势↑ Nernst电位 水化层个静电排斥↑
3 蛋白质溶液的稳定因素 1)、水化层(hydration shell) tight hydration shell(0.35gwater/1g pro) loose hydration shell(2gwater /1g pro) 2)、静电排斥 zeta电势 Nernst Potential—胶核表面电位(不可测) Stern Potential—(不可测) Potential—滑面电位(可测,mobility) 电位 Nernst电位 ionic strength 3)、|pH水 – pI| Value |pH水 – pI| Value zeta电势 水化层 静电排斥 Tight hydration shell Protein core Loose hydration shell
双电层 质点 剪切面 sten层扩散层 电位 est电位 Ste电位 电位 距高 双电层的 Stern模型和对应的电位
4蛋白质沉淀方法分类 )、盐析法 2)、有机溶剂沉淀法 3)、lpH水- pI value调节法 4)、亲水聚合物沉淀法 5)、聚电解质絮凝法 6)、高价金属离子沉淀法 7)、亲和沉淀法
4 蛋白质沉淀方法分类 1）、盐析法 2）、有机溶剂沉淀法 3）、 |pH水 – pI| Value调节法 4）、亲水聚合物沉淀法 5）、聚电解质絮凝法 6）、高价金属离子沉淀法 7）、亲和沉淀法
5盐析法 机理:A、 zeta potential;B、 hydration shell H OH ②+ OH H pH<p带正电荷, 在等电点状态的薛 pH>p带负电荷 又有水膜,是稳定的 蛋白,水膜未脱, 又有水膜是稳定的 亲水胶体 是不稳定的亲水胶体 亲水胶体 中性盐 中性盐 破坏水膜 中性盐 破坏水膜 破坏水膜 ←+中性盐中和其电荷 +团+ 中性盐中和其电荷 等 NH矿攻Na·等 蛋白质沉淀
5 盐析法 机理：A、zeta potential；B、hydration shell