生物秀一专心做生物 www.bbioo.com (四)实验方法： 1、简单染色： ■ (1)涂片：取干净载玻片一块，在载玻片中 央加一滴蒸馏水，按无菌操作法取大肠杆菌 涂片，做成浓菌液，注意取菌不要太多 。 ■（2)晾千：让涂片自然晾干或者在酒精灯火 焰上方文火烘干。 ■(3)固定：手执玻片一端，让菌膜朝上，通 过火焰2-3次固定（以不烫手为宜）。 生物秀花坛一学术交流、资源共享与互助社区 bbs.bbioo.com
n 1、简单染色： n （1）涂片：取干净载玻片一块，在载玻片中 央加一滴蒸馏水，按无菌操作法取大肠杆菌 涂片，做成浓菌液，注意取菌不要太多。 n （2）晾干：让涂片自然晾干或者在酒精灯火 焰上方文火烘干。 n （3）固定：手执玻片一端，让菌膜朝上，通 过火焰2-3次固定（以不烫手为宜）。 (四）实验方法： 生物秀-专心做生物 www.bbioo.com 生物秀论坛-学术交流、资源共享与互助社区 bbs.bbioo.com 生物秀-专心做生物 www.bbioo.com
生物秀一专心做生松 www.bbioo.com ■（4)染色：将固定过的涂片放在废液缸上 的搁架上，加复红染色1-2min。 ■（5)水洗：用水洗去涂片上的染色液。 ■（6)干燥：将洗过的涂片放在空气中晾干 或用吸水纸吸干。 ■(7)镜检：先低倍观察，再高倍观察，并 找出适当的视野后，将高倍镜转出，在涂 片上加香柏油一滴，将油镜头浸入油滴中 仔细调焦观察细菌的形态。 生物秀论坛一学木安流、资源共享与互驴社区 bbs.bbioo.com
n （4）染色：将固定过的涂片放在废液缸上 的搁架上，加复红染色1-2min。 n （5）水洗：用水洗去涂片上的染色液。 n （6）干燥：将洗过的涂片放在空气中晾干 或用吸水纸吸干。 n （7）镜检：先低倍观察，再高倍观察，并 找出适当的视野后，将高倍镜转出，在涂 片上加香柏油一滴，将油镜头浸入油滴中 仔细调焦观察细菌的形态。 生物秀-专心做生物 www.bbioo.com 生物秀论坛-学术交流、资源共享与互助社区 bbs.bbioo.com 生物秀-专心做生物 www.bbioo.com
生物秀一专心做生物 www.bbioo.com ■2、革兰氏染色： ■（1)涂片（2)晾千(3)固定，与简单染 色法相同 ■(4)结晶紫染色：将玻片置于废液缸玻片 搁架上，加适量（以盖满细菌涂面）的结 晶紫染色液染色1分钟；水洗：倾去染色 液，用水小心地冲洗。 ■（5)媒染：碘液，媒染1min;水洗：用水 洗去碘液。 生物秀花坛一学术交流、资源共享与互助社区 bbs.bbioo.com
n 2、革兰氏染色： n （1）涂片（2）晾干（3）固定，与简单染 色法相同 n （4）结晶紫染色：将玻片置于废液缸玻片 搁架上，加适量（以盖满细菌涂面）的结 晶紫染色液染色1分钟；水洗：倾去染色 液，用水小心地冲洗。 n （5）媒染：碘液，媒染1min；水洗：用水 洗去碘液。 生物秀-专心做生物 www.bbioo.com 生物秀论坛-学术交流、资源共享与互助社区 bbs.bbioo.com 生物秀-专心做生物 www.bbioo.com
生物秀一专心做生松 www.bbioo.com ■（6)脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇 脱色20—25s至流出液无色，立即水洗。 ■（7)复染：滴加复红复染3-5min;水洗： 用水洗去涂片上的复红染色液。 （8)晾千：将染好的涂片用吸水纸吸干。 （9)镜检：镜检时先用低倍，再用高倍， 最后用油镜观察，并判断菌体的革兰氏染色 反应性。 生物秀论坛一学术交流、莞源共享与互驴社区 bbs.bbioo.com
n （6）脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇 脱色20—25s至流出液无色，立即水洗。 n （7）复染：滴加复红复染3-5min；水洗： 用水洗去涂片上的复红染色液。 n （8）晾干：将染好的涂片用吸水纸吸干。 n （9）镜检：镜检时先用低倍，再用高倍， 最后用油镜观察，并判断菌体的革兰氏染色 反应性。 生物秀-专心做生物 www.bbioo.com 生物秀论坛-学术交流、资源共享与互助社区 bbs.bbioo.com 生物秀-专心做生物 www.bbioo.com
生物秀一专心修生物 www.bbioo.com (10)实验完毕后的处理： ■①将浸过油的镜头按下述方法擦拭干净， ■a.先用擦镜纸将油镜头上的油擦去。 ■b.用擦镜纸沾少许乙醚-乙醇混合液将镜头擦 2-3次。 ■ C.再用千净的擦镜纸将镜头擦2-3次。注意擦 镜头时向一个方向擦拭。将显微镜小心轻拿， 按号放入显微镜柜中。 ②观察后的染色玻片用废纸将香柏油擦干 净，放入回收容器内。 生物秀花坛一学术交流、黄孤共享与三助社医 bbs.bbioo.com
n ①将浸过油的镜头按下述方法擦拭干净， n a.先用擦镜纸将油镜头上的油擦去。 n b.用擦镜纸沾少许乙醚-乙醇混合液将镜头擦 2-3次。 n c.再用干净的擦镜纸将镜头擦2-3次。注意擦 镜头时向一个方向擦拭。将显微镜小心轻拿， 按号放入显微镜柜中。 n ②观察后的染色玻片用废纸将香柏油擦干 净，放入回收容器内。 （10)实验完毕后的处理： 生物秀-专心做生物 www.bbioo.com 生物秀论坛-学术交流、资源共享与互助社区 bbs.bbioo.com 生物秀-专心做生物 www.bbioo.com