2.2薄层色谱 ●薄层色谱法(thin layer chromatography;TLC): 将固定相均匀涂布在表面光滑的平板上,形成薄层而进行 色谱分离和分析的方法 ●特点:分离能力强、灵敏度高、展开时间较短、显色方便。 ●分离机理:吸附、分配、离子交换、空间排阻
2.2 薄层色谱 ⚫薄层色谱法(thin layer chromatography;TLC): 将固定相均匀涂布在表面光滑的平板上,形成薄层而进行 色谱分离和分析的方法. ⚫特点:分离能力强、灵敏度高、展开时间较短、显色方便。 ⚫分离机理:吸附 、分配、离子交换、空间排阻
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⚫考虑一下:薄层色谱与普通液相色谱的区别?
薄层色谱与液相色谱法比较 HPLC TLC 每次只能分析一个样品 在一块板上点上多个样品同 时进行分离 对样品制备要求高,必须不 用后一次弃去,可直接用样 含可吸留在柱上的杂质,否 品的粗提物点样 则柱性能受损 可用检测器种类较少 展开后可用多种手段检测
薄层色谱与液相色谱法比较 HPLC TLC 每次只能分析一个样品 在一块板上点上多个样品同 时进行分离 对样品制备要求高,必须不 含可吸留在柱上的杂质,否 则柱性能受损 用后一次弃去,可直接用样 品的粗提物点样 可用检测器种类较少 展开后可用多种手段检测
(一)吸附薄层色谱 固定相为吸附剂的薄层色谱。利用吸附剂对不同组分的吸附能 力差鼻而实现分离经过吸附、解吸、再吸附、再解吸.最后 g人但入支亿土D估山丝h温亿山D土 丝h丛 ·正相色谱:水为固定相(硅胶载体),有机溶剂为流动相。 极性强的组分K大,R值小。 反相色谱:烷基化学键合相为固定相,水一有机溶剂为流动 相。极性强的组分K小,R值大。 固足相与流动相中的分配系效不同而被分离。吊用的是及相溥 层色谱法,固定相是烷基化学键合相,展开剂是水及与水相溶 的有机溶剂
(一)吸附薄层色谱 固定相为吸附剂的薄层色谱。利用吸附剂对不同组分的吸附能 力差异而实现分离.经过吸附、解吸、再吸附、再解吸.最后 混合物得到分离.K大,Rf值小,移动慢;K小,Rf大,移动快。 (二)分配薄层色谱 固定相为液体,吸留在载体上的薄层色谱。利用被分离组分在 固定相与流动相中的分配系数不同而被分离。常用的是反相薄 层色谱法,固定相是烷基化学键合相,展开剂是水及与水相溶 的有机溶剂。 • 正相色谱:水为固定相(硅胶载体),有机溶剂为流动相。 极性强的组分K大, Rf值小。 • 反相色谱:烷基化学键合相为固定相,水-有机溶剂为流动 相。极性强的组分K小, Rf值大
2.2.3平面液相色谱的技术参数 1.展开剂动力学参数y 在色谱过程中,展开剂前沿移动的速度是一个变数.当展开 器中吸附剂、展开剂、蒸汽相达到平衡时,展开剂前沿 在薄层上的移动速率为: v=k/2L ●k为展开剂速率常数,反映了展开剂在薄层中迁移的动力学特征。 ●L为展开剂前沿在时间内移动的距离
2.2.3 平面液相色谱的技术参数 1. 展开剂动力学参数v 在色谱过程中,展开剂前沿移动的速度是一个变数.当展开 器中吸附剂、展开剂、蒸汽相达到平衡时,展开剂前沿 在薄层上的移动速率为: v=k/2L ⚫k为展开剂速率常数,反映了展开剂在薄层中迁移的动力学特征。 ⚫L为展开剂前沿在时间t内移动的距离