山东理工大学材料科学与工程学院 高效液相色谱法 第四章 4.1概述 高效液相 4.2液相色谱的基本原理 色谱法 4.3高效液相色谱仪
山东理工大学材料科学与工程学院 高效液相色谱法 第四章 高效液相 色谱法 4.1 概述 4.2 液相色谱的基本原理 4.3 高效液相色谱仪
4.1概述 ●经典液相色谱，气相色谱，高效液相色谱 ●高效液相色谱法(HPLC)是继气相色谱之后，70年代 初期发展起来的一种以液体做流动相的新色谱技术。 ●高效液相色谱法（HPLC)在经典液相色谱基础上，引 入了气相色谱的理论，在技术上采用了高压泵、高效固定 相和高灵敏度检测器，因而具备速度快、效率高、灵敏度 高、操作自动化的特点
4.1 概述 ⚫经典液相色谱, 气相色谱, 高效液相色谱 ⚫高效液相色谱法（HPLC）是继气相色谱之后，70年代 初期发展起来的一种以液体做流动相的新色谱技术。 ⚫高效液相色谱法（HPLC）在经典液相色谱基础上，引 入了气相色谱的理论，在技术上采用了高压泵、高效固定 相和高灵敏度检测器，因而具备速度快、效率高、灵敏度 高、操作自动化的特点
经典液体色谱和高效液体色谱的比较 高效液相色谱法 经典液相色谱法 色谱柱：柱长mm 100~250 10~200 柱内径mm 2~10 10~50 固定相粒度：粒径 5~50 75~600 小m 色谱柱入口压力 220 0.001~0.1 /MPa 色谱柱柱效！（理论 塔板数m) 2X103~5×104 2~50 进样量g 10-6~102 1~10 分析时间/h 0.05≈1.0 1~20
经典液体色谱和高效液体色谱的比较 高效液相色谱法 经典液相色谱法 色谱柱：柱长/mm 100～250 10～200 柱内径/mm 2～10 10～50 固定相粒度：粒径 /μm 5～50 75～600 色谱柱入口压力 /MPa 2～20 0.001～0.1 色谱柱柱效/（理论 塔板数/m） 2×103～5×104 2～50 进样量/g 10-6～10-2 1～10 分析时间/h 0.05～1.0 1～20
高效液相色谱法与气相色谱法 方法 高效液相色谱法 气相色谱法 进样方式 样品制成溶液 样品需加热气化或裂解 1、液体流动相选择多 1、气体流动相为惰性气 样，可为离子型、极 体，不与被分析的样品 性、弱极性、非极性 发生相互作用 溶液，可与被分析样 流动相 品产生相互作用，并 能改善分离的选择性 2、气体流动相动力粘度 为10Pas,输送流动相 2、液体流动相动力粘 压力为0.1~0.5MPa 度为10-Pas,输送流 动相压力为2~20MPa
高效液相色谱法与气相色谱法 方法 高效液相色谱法 气相色谱法 进样方式 样品制成溶液 样品需加热气化或裂解 流动相 1、液体流动相选择多 样，可为离子型、极 性、弱极性、非极性 溶液，可与被分析样 品产生相互作用，并 能改善分离的选择性 2、液体流动相动力粘 度为10-3Pa·s，输送流 动相压力为2～20MPa 1、气体流动相为惰性气 体，不与被分析的样品 发生相互作用 2、气体流动相动力粘度 为10-5Pa·s，输送流动相 压力为0.1～0.5MPa