TDNA区基因的功能 ◆研究方法:用遗传学方法在TDNA区中引 入转座子,使特定的基因发生突变,从而在肿 瘤细胞中TDNA的一个或多个转录产物也随之 消朱。基因突变后不能转录出它所编码的 mRNA,这时可观察到带有突变基因的T-DNA 的植物细胞的表型,从而确定这些基因转录产 物的功能。用这种方法证明了编码两类转录产 物的基因序列
T-DNA区基因的功能 研究方法： 用遗传学方法在T-DNA区中引 入转座子，使特定的基因发生突变，从而在肿 瘤细胞中T-DNA的一个或多个转录产物也随之 消朱。基因突变后不能转录出它所编码的 mRNA，这时可观察到带有突变基因的T-DNA 的植物细胞的表型，从而确定这些基因转录产 物的功能。用这种方法证明了编码两类转录产 物的基因序列：
TDNA区编码的基因 第一类是编码冠瘿碱合成酶及分解代谢基因 第二类是致瘤基因,前两个基因被称作为生长素基因(Aux) Aux基因突变将诱导肿瘤细胞茎芽产生,因此Aux基因后来被称作 Tms( tumour morphology shoot)基因,即肿瘤形态茎芽基因 或Shi( shoot induction)基因,即茎芽抑制基因。目前已查明, 实际上Aux基因包括两个基因,一个是Aux(Tms1),编码色氨 酸单加氧酶( typtophan mono-oXygenase),将色氨酸转变成吲 哚乙酰胺( indol acetamide,,IAM),故现在也称为Iam基因;另 个是Aux-2,编码吲哚乙酰胺水解酶,将IAM转变成乙酸吲哚IAA, 现称为aH基因。第三个基因是细胞分裂素基因(cyt),其突变将 引起易生根特性。故称为Tmr( tumour morphology root)基因, 即肿瘤形态根基因或Roi( root induction)基因,即根抑制基因。 y基因编码异戊烯基转移酶( isopentenyltransferase),催化异戊 烯基焦磷酸盐( isopentenylpyrophosphate)和AMP形成细胞分裂 素即异戊烯基AMP( isopentenyl-AMP),故现称为pt基因
T-DNA区编码的基因 第一类是编码冠瘿碱合成酶及分解代谢基因。 第二类是致瘤基因，前两个基因被称作为生长素基因（Aux）。 Aux基因突变将诱导肿瘤细胞茎芽产生,因此Aux基因后来被称作 Tms （tumour morphology shoot）基因，即肿瘤形态茎芽基因 或Shi（shoot induction）基因，即茎芽抑制基因。目前已查明， 实际上Aux基因包括两个基因，一个是Aux-l（Tms-1），编码色氨 酸单加氧酶（typtophan mono-oxygenase），将色氨酸转变成吲 哚乙酰胺（indol acetamid，，IAM），故现在也称为Iam基因；另 一个是Aux-2,编码吲哚乙酰胺水解酶，将IAM转变成乙酸吲哚IAA， 现称为iaaH基因。第三个基因是细胞分裂素基因（cyt），其突变将 引起易生根特性。故称为Tmr（tumour morphology root）基因， 即肿瘤形态根基因或Roi（root induction）基因，即根抑制基因。 Cyt基因编码异戊烯基转移酶（isopentenyltransferase），催化异戊 烯基焦磷酸盐（isopentenylpyrophosphate）和AMP形成细胞分裂 素即异戊烯基-AMP（isopentenyl-AMP），故现称为Ipt基因
TDNA区编码基因的功能 ◆Aux基因突变将阻断肿瘤细胞生长素的大量合成,使细 胞内的细胞分裂素与生长激素的比值升高。野生型肿瘤 细胞中细胞分裂素与生长素的比值为0.22,而突变型 该值上升到144,因此有利于芽的形态发生。同时y 基因突变将会阻断细胞分裂素的大量合成,两者之间的 比值下降到0.02,因此有利于根的形态发生。 ◆正是由于Tms和Tmr基因的表达,使转化植物细胞内激 素平衡紊乱,冠瘿瘤细胞无限生长,形成激素自主性特 性,引起癟变。Tms和Tm基因是致瘤所必须的基因, 因此又称它们为致瘤基因( onc gene)
T-DNA区编码基因的功能 Aux基因突变将阻断肿瘤细胞生长素的大量合成，使细 胞内的细胞分裂素与生长激素的比值升高。野生型肿瘤 细胞中细胞分裂素与生长素的比值为0．22，而突变型 该值上升到14.4，因此有利于芽的形态发生。同时Cyt 基因突变将会阻断细胞分裂素的大量合成，两者之间的 比值下降到0.02，因此有利于根的形态发生。 正是由于Tms和Tmr基因的表达，使转化植物细胞内激 素平衡紊乱，冠瘿瘤细胞无限生长，形成激素自主性特 性，引起癌变。Tms和Tmr基因是致瘤所必须的基因， 因此又称它们为致瘤基因（onc gene）
V区操纵子的基因结构与功能
三、Vir区操纵子的基因结构与功能
1.Vi区操纵子的基因结构 除TDNA外,T质粒的v区也是农杆菌致 瘤所必须的。Vir区仅位于T区DNA左侧。两者 之间的距离常随币质粒类型不同而有差 异: Octopine的间隔距离较大,而 Nopaline间隔 距离很小。 Octopine T质粒的Ⅶ区大小为 40bp,含有ViA、B、C、D、E、F、G、H(旧称 PinF)等8个操纵子( operon),共24个基因。它们 协同调节,形成一个调控子( regulon),起共调 控作用( Co-regulation)。而 Nopaline有7个操纵 子,比 Octopine少一个Vir操纵子
1. Vir区操纵子的基因结构 除T-DNA外，Ti质粒的vir区也是农杆菌致 瘤所必须的。Vir区仅位于T区DNA左侧。两者 之 间 的 距 离 常 随 Ti 质 粒 类 型 不 同 而 有 差 异:Octopine的间隔距离较大,而Nopaline间隔 距离很小。Octopine Ti质粒的Vir区大小为 40bp,含有VirA、B、C、D、E、F、G、H(旧称 PinF)等8个操纵子(operon),共24个基因。它们 协同调节，形成一个调控子(regulon),起共调 控作用(co-regulation)。而Nopaline有7个操纵 子,比Octoppine少一个VirF操纵子