分离纯化过程的规模化 蛋白质分离纯化的实验室工艺、技术、方法在大规模产业化过程 未必合适,如 实验室方法在工程上可能难以实现(超声波破细胞壁) ●实验室方法在大规模生产中可能成本过高(超速离心) 因此,在很多情况下,实验室的技术路线不等于生产工艺
分离纯化过程的规模化 蛋白质分离纯化的实验室工艺、技术、方法在大规模产业化过程 未必合适，如： 实验室方法在工程上可能难以实现（超声波破细胞壁） 实验室方法在大规模生产中可能成本过高（超速离心） 因此，在很多情况下，实验室的技术路线不等于生产工艺
10外源基因表达产物的分离纯化 B离子交换层析 离子交换层析的基本原理 ●离子交换介质的基本性质 离子交换介质的选择原则 ●离子交换层析的基本操作
B 离子交换层析 10 外源基因表达产物的分离纯化 离子交换层析的基本原理 离子交换介质的基本性质 离子交换层析的基本操作 离子交换介质的选择原则
离子交换层析的基本原理 离子交换层析是以离子交换剂为固定相,以特定的含离子溶液为 流动相,利用离子交换剂对待分离的各种离子结合力的差异,而将混 合物中不同离子进行分离的层析技术
离子交换层析的基本原理 离子交换层析是以离子交换剂为固定相，以特定的含离子溶液为 流动相，利用离子交换剂对待分离的各种离子结合力的差异，而将混 合物中不同离子进行分离的层析技术
离子交换介质的基本性质 离子交换剂的基本性能 离子交换剂亦称离子交换介质,通常是一种不溶性高分子化合物 如树脂,纤维素,葡聚糖,醇脂糖等 离子交换剂中所含的可解离基团在水溶液中能与溶液中的其它阳 离子或阴离子起交换作用 如果有两种以上的成分被吸附在离子交换剂上,则在用洗脱液洗 脱时,各成分被洗脱的可能性取决于各自反应的平衡常数 吸附在离子交换剂上的蛋白质可通过改变pH使吸附的蛋白质失去 电荷而解离下来 不同蛋白质与离子交换剂之间形成离子键数目不同,即亲和力大 小有差异,因此只要选择适当的洗脱条件便可将混合物中的成分逐个 洗脱下来,达到分离纯化的目的
离子交换介质的基本性质 离子交换剂亦称离子交换介质，通常是一种不溶性高分子化合物 如树脂，纤维素，葡聚糖，醇脂糖等； 离子交换剂中所含的可解离基团在水溶液中能与溶液中的其它阳 离子交换剂的基本性能 离子或阴离子起交换作用 如果有两种以上的成分被吸附在离子交换剂上，则在用洗脱液洗 脱时，各成分被洗脱的可能性取决于各自反应的平衡常数 吸附在离子交换剂上的蛋白质可通过改变pH使吸附的蛋白质失去 电荷而解离下来 不同蛋白质与离子交换剂之间形成离子键数目不同，即亲和力大 小有差异，因此只要选择适当的洗脱条件便可将混合物中的成分逐个 洗脱下来，达到分离纯化的目的
离子交换介质的基本性质 离子交换剂的分类 阳离子交换剂:强酸型和弱酸型 可电离的基团 磺酸基(-SO3H) 磷酸基(-PO3H2) 羧酸基(-COOH) 酚羟基(-OH) 阴离子交换剂:强碱型和弱碱型 可电离的基团 伯胺基(-NH 仲胺基(-NHCH3) 叔胺基(-N(CH3)2 季胺基(-N(CH3)3
离子交换介质的基本性质 阴离子交换剂：强碱型和弱碱型 可电离的基团 磺酸基（-SO3H） 离子交换剂的分类 磷酸基（-PO3H2） 羧酸基（-COOH） 酚羟基（-OH） 阳离子交换剂：强酸型和弱酸型 可电离的基团 伯胺基（-NH2） 仲胺基（-NHCH3 ） 叔胺基（-N(CH3 )2） 季胺基（-N+ (CH3 ) 3 ）