高效液相色谱知识收藏 Agilent0高压液相色谱仪基本操作步骤 Agilent1100液相基本操作 步骤 Agilent 11100高压液相色谱仪维护保养知识保养事项: 高压液相色谱HPIC常见故障及排除方法 液相色谱柱使用及保养 高压液相色谱HPIC培训教程() 高压液相色谱HPLC培训教程(七) 高效液相色谱仪中反相HPLC柱子的清洁和再生 HPLC对流动相的基本要求 高效液相色谱 Waters600E-2487HPLC系统 SOPWaters高效液相色谱系统操作规程 高效液相色谱仪( Agilent1100操作注意事项 色谱扫盲班
e 高效液相色谱知识收藏 Agilent1100 高压液相色谱仪基本操作步骤 Agilent1100 液相基本操作 步骤 Agilent1100 高压液相色谱仪维护保养知识保养事项： 高压液相色谱 HPLC 常见故障及排除方法 液相色谱柱使用及保养 高压液相色谱 HPLC 培训教程(一) 高压液相色谱 HPLC 培训教程(七) 高效液相色谱仪中反相 HPLC 柱子的清洁和再生 HPLC 对流动相的基本要求 高 效 液 相 色 谱 Waters 600E-2487 HPLC 系统 SOPWaters 高效液相色谱系统操作规程 高效液相色谱仪(Agilent 1100)操作注意事项 色谱扫盲班
Agilent1100高压液相色谱仪基本操作步骤 Agilent1100液相基本操作 步骤 (一)、开机: 1、打开计算机,进入 Windows nt(或 Windows2000)画面, 并运行 Bootp server程序 2、打开1100LC各模块电源 3、待各模块自检完成后,双击 Instrument 1 online图标, 化学工作站自动与1100LC通讯,进入的工作站画面。 4、从“View”菜单中选择“ Method and run control”画面, 单击”view”菜单中的“ Show Top Toolbar”,“ Show status toolbar”, “ System diagram”,” Sampling diagram”,使其命令前有“√”标 志,来调用所需的界面。 5、把流动相放入溶剂瓶中。 6、打开 Purge阀。 7、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击 Setup pump选项, 进入泵编辑画面。 8、设Flow:5ml/min,单击OK。 9、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击 Pump control选 项,选中On,单击OK,则系统开始 Purge,直到管线内(由溶剂瓶到 泵入口)无气泡为止,切换通道继续 Purge,直到所有要用通道无气泡 为止 10、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击 Pump Control 选项,选中Off,单击0k关泵,关闭 Purge valve
2 Agilent1100 高压液相色谱仪基本操作步骤 Agilent1100 液相基本操作 步骤 (一)、开机： 1、打开计算机,进入 Windows NT （或 Windows 2000）画面, 并运行 Bootp Server 程序。 2、打开 1100 LC 各模块电源。 3、待各模块自检完成后，双击 Instrument 1 Online 图标， 化学工作站自动与 1100LC 通讯，进入的工作站画面。 4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”，“Show status toolbar”， “System diagram”,”Sampling diagram”，使其命令前有“√”标 志，来调用所需的界面。 5、把流动相放入溶剂瓶中。 6、打开 Purge 阀。 7、单击 Pump 图标，出现参数设定菜单，单击 Setup pump 选项， 进入泵编辑画面。 8 、设 Flow：5ml/min，单击 OK。 9、单击 Pump 图标，出现参数设定菜单，单击 Pump control 选 项，选中 On，单击 OK，则系统开始 Purge，直到管线内（由溶剂瓶到 泵入口）无气泡为止,切换通道继续 Purge，直到所有要用通道无气泡 为止。 10、单击 Pump 图标，出现参数设定菜单，单击 Pump Control 选项，选中 Off，单击 Ok 关泵， 关闭 Purge valve
11、单击Pum图标,出现参数设定菜单,单击 Setup pump选项, 进入Pump编辑画面,设Flow:1.0ml/min 12、单击泵下面的瓶图标,输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可 输入停泵的体积。单击Ok (二)数据采集方法编辑: 开始编辑完整方法 ●从“ Method”菜单中选择“ Edit entire method”项, 如上图所示选中除“ Data analysis”外的三项,单击Ok,进入下 一画面。 2、方法信息: ●在“ Method comments”中加入方法的信息(如:方法的 用途等)。 ●单击0k进入下一画面 3、泵参数设定:(以二元泵为例) ●在“Flow”处输入流量,如1ml/min,在“ Solvent b” 处输入70.0,(A=100-B),也可 Insert一行” Timetable”,编辑梯度。 在“ Pressure limits max”处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。 ●单击Ok进入下一画面 4、自动进样器参数设定 ●选择合适的进样方式,进样体积1.0u1,洗瓶位置为6 号。“ Standard Injection”一—只能输入进样体积,此方式无洗针 功能。“ Injection with Needle Wash”-—可以输入进样体积和洗
3 11、单击 Pump 图标，出现参数设定菜单，单击 Setup pump 选项， 进入 Pump 编辑画面，设 Flow：1.0ml/min。 12、单击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可 输入停泵的体积。单击 Ok。 （二）数据采集方法编辑： 1、开始编辑完整方法： ●从“Method”菜单中选择“Edit entire method” 项， 如上图所示选中除“Data analysis ”外的三项，单击 Ok，进入下 一画面。 2、方法信息： ●在“Method Comments”中加入方法的信息（如：方法的 用途等）。 ●单击 Ok 进入下一画面。 3、泵参数设定：（以二元泵为例） ●在“Flow”处输入流量,如 1ml/min，在“Solvent B” 处输入 70.0,(A=100-B) ,也可 Insert 一行”Timetable” ,编辑梯度。 在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。 ● 单击 Ok 进入下一画面。 4、自动进样器参数设定: ●选择合适的进样方式, 进样体积 1.0ul ,洗瓶位置为 6 号。“Standard Injection”----只能输入进样体积，此方式无洗针 功能。“Injection with Needle Wash”----可以输入进样体积和洗
瓶位置,此方式针从样品瓶抽完样品后,会在洗瓶中洗针。“Use inJector program”-—-可以点击Edit键进行进样程序编辑 ●点击0k进入下一画面 5、柱温箱参数设定: ●在” Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中 它,点击”more>”键,如图所示,选中” Same as left”-—使柱温箱 的温度左右一致。 ●点击ok进入下一画面。 6、VwWD检测器参数设定 ●在” Wavelength”下方的空白处输入所需的检测波长, 如254nm,在” Peak width( Response time)”下方点击下拉式三 角框,选择合适的响应时间,如>0.1min(2s)。 ●在 Timetable中可以“ Insert”一行,输入随时间 切换的波长,如1min,波长=300nm。点击ok进入下一画面。 7、DAD检测器参数设定 ●检测波长:254nm,BW=30nm, 参比波长 =350nm,BW=100nm; ●检测波长:一般选择最大吸收处的波长。样品带宽 BW:一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长:一般选择在 靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。参比带宽BW:至少要与样品信 号的带宽相等,许多情况下用100nm作为缺省值。 Peak width( Response time):其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。Slit一狭缝窄,光谱分辨
4 瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。“Use injector program”---可以点击 Edit 键进行进样程序编辑。 ●点击 Ok 进入下一画面。 5、柱温箱参数设定: ●在”Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中 它,点击”more>>” 键,如图所示,选中”Same as left”---使柱温箱 的温度左右一致。 ●点击 ok 进入下一画面。 6、VWD 检测器参数设定: ●在”Wavelength”下方的空白处输入所需的检测波长, 如 254nm, 在”Peak width (Response time)”下方点击下拉式三 角框,选择合适的响应时间, 如>0.1min (2s)。 ●在 Timetable 中可以“Insert”一行，输入随时间 切换的波长，如 1min ，波长=300nm。点击 ok 进入下一画面。 7、DAD 检测器参数设定: ●检测波长: 254nm,BW=30nm, 参比波长 =350nm,BW=100nm; ●检测波长：一般选择最大吸收处的波长。样品带宽 BW： 一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长：一般选择在 靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。参比带宽 BW：至少要与样品信 号的带宽相等，许多情况下用 100nm 作为缺省值。Peak width（Response time）：其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。Slit—狭缝窄，光谱分辨
率高;宽时,噪音低。同时可以输入采集光谱方式,步长,范围,阈 值。选中所用的灯 点击0k进入下一画面。 8、RID检测器参数设定 ●色谱条件 进样体积:20ul 光学单元温 度:Off。 极性:正。 峰宽(响应时 间) 4 ●“0 ptical Unit Temperature”-—若环境温度控制 在±2℃,设定为Off,若环境温度不稳定,则设定光学单元温度为 高于环境温度5度,以防样品在池中沉淀。“ Peak width”-大多数 分析设为4S,只有在高速分析下设为更短。“ Automatic recycling after analysis”--在不进行分析时可以让流动相循环,节省流动相, 检测器连续运行,可随时投入使用。 ●点击RID图标,选择 RId Control: Heater设为 On,若要循环流动相,必须将“ Recycling valve”设为ON。手动 purge 参比池,将其设为On,并输入 Purge时间。 9、FLD检测器参数设定: 色谱条件: 样品:P/N01018-68704用甲醇稀释为 1:10。 进样体积:5u1
5 率高；宽时，噪音低。同时可以输入采集光谱方式，步长，范围，阈 值。选中所用的灯。 ●点击 Ok 进入下一画面。 8、RID 检测器参数设定: ●色谱条件: 进样体积: 20ul 。 光学单元温 度: Off 。 极性: 正 。 峰宽(响应时 间) : 4s 。 ●“Optical Unit Temperature”---若环境温度控制 在±2℃,设定为 Off, 若环境温度不稳定,则设定光学单元温度为 高于环境温度 5 度,以防样品在池中沉淀。“Peak width”---大多数 分析设为 4S，只有在高速分析下设为更短。“Automatic recycling after analysis”---在不进行分析时可以让流动相循环，节省流动相， 检测器连续运行，可随时投入使用。 ●点击 RID 图标，选择 RID Control ：Heater 设为 On，若要循环流动相，必须将“Recycling Valve”设为 ON。手动 purge 参比池，将其设为 On，并输入 Purge 时间。 9、FLD 检测器参数设定: 色谱条件： ● 样品：P/N 01018-68704 用甲醇稀释为 1:10。 ● 进样体积：5ul