21世纪生命科学发展的重要态势 对生命现象的认识从单基因水平向全基因组整体水平发展 现代生命科学研究的理论与技术从较长期的积累走向应用
21世纪生命科学发展的重要态势 对生命现象的认识从单基因水平向全基因组整体水平发展 现代生命科学研究的理论与技术从较长期的积累走向应用
分子生物学实验的基本知识简介
分子生物学实验的基本知识简介
◆基因工程又称DNA重组技术 外源基因通过体外重组后,导入受体细胞内,使这个基因能够在受体细 胞内复制、转录、翻译、表达的操作 包括基因的分离、重组、转移、基因在受体细胞内的保持、转录、翻译 表达等全过程 有人也将其它使细胞基因组结构得到改造的体系也包括在基因工程内以 区别于DNA重组 基因工程四要素:目的基因、工具酶、载体、受体细胞
基因工程又称DNA重组技术 外源基因通过体外重组后，导入受体细胞内，使这个基因能够在受体细 胞内复制、转录、翻译、表达的操作 包括基因的分离、重组、转移、基因在受体细胞内的保持、转录、翻译 表达等全过程 有人也将其它使细胞基因组结构得到改造的体系也包括在基因工程内以 区别于DNA重组 基因工程四要素：目的基因、工具酶、载体、受体细胞
工具酶 限制性内切酶 连接酶 思者氩 聚合酶逆转录酶 激酶和磷酸酶 这些工具酶的结构特点 核酸外切酶和核酸内切酶 和功能是什么? DNA酶和RNA酶 2.它们在分子生物实验中 甲基化酶 各有什么用途? 拓扑异构酶 蛋白
工 具 酶 限制性内切酶 连接酶 聚合酶 逆转录酶 激酶和磷酸酶 核酸外切酶和核酸内切酶 DNA酶和RNA酶 甲基化酶 拓扑异构酶 蛋白 思考题 1. 这些工具酶的结构特点 和功能是什么？ 2. 它们在分子生物实验中 各有什么用途？
工具酶一限制性内切酶 ◆特异地识别和结合于一段特 BamH I 殊的DNA序列(二元对称) 5nnGGaTCCnN3 3NNCC TAGGNN5 多数限制性内切酶识别长度 为4-6个核苷酸,少数识别更 5NNGGOH pATCCNN3 长的核苷酸序列 3NNCC TAp HOGGNN5 ◆切割双链DNA HindⅢ 切割后形成平端或粘端 5’ AAGCTT3 3TTCGAA5
工 具 酶—限制性内切酶 特异地识别和结合于一段特 殊的DNA序列（二元对称） 多数限制性内切酶识别长度 为4-6个核苷酸，少数识别更 长的核苷酸序列 切割双链DNA 切割后形成平端或粘端 BamHⅠ ↓ 5’NNGGATCCNN3’ 3’NNCCTAGGNN5’ ↑ 5’NNGGOH pATCCNN3’ 3’NNCCTAp HOGGNN5’ HindⅢ ↓ 5’AAGCTT3’ 3’TTCGAA5’ ↑ ↓ +