二、重组DNA技术的基本工具 限制性内 DNA连接 基因进入受 切核酸酶 酶 体细胞载体 分子手术刀 分子缝合针 分子运输车
限制性内 切核酸酶 分子手术刀 分子缝合针 DNA连接 酶 基因进入受 体细胞载体 分子运输车 二、重组DNA技术的基本工具
(一)限制性内切核酸酶一一“分子手术刀” 特点 本质 限制酶 来源 作用
（一）限制性内切核酸酶——“分子手术刀
两种常用的限制酶：EcoR I和SmaI …GAA TTC 经ECoR I切割后 …G AATTC-… CTT AAG… ..CTTAA G… 黏性末端 …CCCIGGG 经SmaI切割后 …CCC GGG-. …GGG!CCC… …GGG CCC 中心粘线 平末端
……G ……CTTAA AATTC…… G…… ……CCC ……GGG GGG…… CCC…… 经EcoRⅠ切割后 经SmaⅠ切割后 ……GAA TTC…… ……CTT AAG…… ……CCC GGG…… ……GGG CCC…… 中心轴线 两种常用的限制酶：EcoRⅠ和SmaⅠ 黏性末端 平末端
任务一、基因的剪切 --ACTAGT-- --AAGCTT-- --TGATCA-- --TTCGAA-- --TCTAGA-- --CTCGAG-- --AGATCT-- --GAGCTC--
任务一、基因的剪切 --A --T G A T C C T A G T-- A-- A G C T T-- A-- -- A -- T T C G A --T --A G A T C C T A G A-- T-- --C --G A G C T T C G A G-- C--
思考 ©不同的限制酶识别的序列是否相同？ 。G-A之间切口代表哪种化学键断裂？ 。两条链中间断开代表哪种化学键断裂？ 氢键是既容易形成也容易 断裂的键。当磷酸二酯键 断裂后，外则的基本骨架 断了，氢键会自己断裂
思考 不同的限制酶识别的序列是否相同？ G-A之间切口代表哪种化学键断裂？ 两条链中间断开代表哪种化学键断裂？ 氢键是既容易形成也容易 断裂的键。当磷酸二酯键 断裂后，外则的基本骨架 断了，氢键会自己断裂