第一节染色体研究方法 一、常规染色体的制备与分析 chromosome chromatid
6 第一节 染色体研究方法 一、常规染色体的制备与分析
正常人外周血或细胞 1) RPMI1640培养基+15%小牛血清=5ml 37C,培养68hr 胞培养 ■加秋水仙素,培养2~4hr(抑制细胞分裂) 收集细胞 离心,去上清液(1000rpm/10min) ■低渗处理, 0.075MKcI,37℃,25min 染色体制 预固定,甲醇:冰醋酸=3:1 离心,去上清液(1000rpm/10min) 重复固定三次 备 制片,染色,观察,染色体分析
7 1) 细 胞 培 养 与 染 色 体 制 备 ◼ 正常人外周血或细胞 ◼ RPMI1640培养基+15%小牛血清=5ml 370C,培养68 hr ◼加秋水仙素,培养2~4 hr(抑制细胞分裂) 收集细胞 ◼ 离心,去上清液(1000rpm/10 min) ◼ 低渗处理,0.075 M KCI,370C,25min ◼ 预固定,甲醇:冰醋酸=3:1 离心,去上清液(1000rpm/10 min) 重复固定三次 ◼ 制片,染色,观察,染色体分析
双双新江 AX XX XI XI XT XX XI II双I新 XX KARYOTYPE 5 ml of venous blood Photographed Stain 个 Cells spread onto Separate off red cells slide by dropping Add culture medium 个 to white cell suspension Cells fixed 个 Incubate Colchicine 3 days at 37C added white
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二、染色体形态学和显带 chromosome ■ 在染色体狭窄处是着丝粒(centromere,cen), cen将染色体分为短臂(p)和长臂(q)。 ■染色体形态: entromere ■ 中央着丝粒染色体,cen位于染色体的1/2处。 ■ 亚中着丝粒染色体,cen位于染色体的5/8处 近端着丝粒染色体,cen位于染色体的7/8处 chromati
9 二、染色体形态学和显带 ◼ 在染色体狭窄处是着丝粒(centromere,cen), cen将染色体分为短臂(p)和长臂(q)。 ◼ 染色体形态: ◼ 中央着丝粒染色体, cen 位于染色体的1/2处。 ◼ 亚中着丝粒染色体, cen 位于染色体的5/8处 ◼ 近端着丝粒染色体, cen 位于染色体的7/8处
端粒 Sister chromatids 随体 Centromere 2
10 端粒 Sister chromatids 随体