实验一录像药理学实验操作 【实验目的】 通过观看录像，掌握常用实验动物的特点与用途，同时掌握小白鼠、家兔及大白鼠等常 用实验动物的捉拿、固定、给药及处死方法。 【实验内容】 (一)常用实验动物的特点与用途 1.小鼠(Mous)是实验室最常用的一种动物，便于大量人工繁殖，适用于需要大 量动物的试验，如药物的筛选、药物的毒性试验、半数致死量的测定、药物效价的比较、避 孕药及抗肿瘤药等的试验研究。此外，还用于遗传性疾病、免疫学、微生物学等的研究。 2.大鼠(Rt)目前已成为肿瘤学、药理学、营养学、繁殖学、内分泌学、免疫学 医药、农药毒性等方面的重要实验动物。其主要用途有：①筛选新药及心血管药理研究：② 营养、代谢性疾病研究：③复制肿瘤模型用于抗肿瘤药物的研究：④利用大鼠足跖浮肿法筛 选抗炎药：⑤高级神经活动研究：⑥神经、内分泌研究：⑦用于避孕药、传染病、畸胎学及 遗传学等方面的研究。 3.豚鼠(Guine-pig)又名天竺鼠、荷兰猪、海猪，也是较常用的实验动物。其主 要用途有：①因其对组胺敏感，并以与致敏，故常被选用与平喘药、抗组胺药的研究：又因 其对结核杆菌高度敏感，感染后病变非常类似人的进行性结核病变，故也常用于结核病和抗 结核病药的实验治疗研究。②因其体内不能合成维生素C,对其缺乏非常敏感，故常用于坏 血病的实验研究：③还用于免疫学、微生物学的实验研究。 4.家兔(Rabbit)易饲养且温顺，繁殖率高，是医学研究中广泛采用的动物。主要用 于：①心血管疾病研究，观察药物对家兔心脏、血压、呼吸、胆固醇代谢和动脉粥样硬化的 影响：②眼科研究，如筛选治疗角膜瘢痕的有效药物等：③还用于胚胎学、免疫学、遗传学、 生理学等方面的研究。 5.猫(Ct)猫主要用于神经学、生理学和毒理学等方面的研究。目前，我国实验用 猫都是收购来的，个体差异较大。尚待进行纯化工作，将其优良遗传特征固定下来。主要用 于：①药理学研究，观察药物对呼吸系统、心血管系统的功能效应和药物代谢学的研究，如 常用猫进行冠状窦血流量的测定，观察药物对血压的影响等：②中枢神经系统研究，常用猫 脑室灌注法来研究药物作用部位，还用于观察神经递质等活性物质的释放及去大脑僵直，姿 势反射试验等：③循环功能急性实验研究，用于观察药物对血压的影响等：④在血液病研究 中用猫作白血病和恶病质者血液研究，还用于阿米巴痢疾等的研究。 6.狗(D0g)用狗做实验是从17世纪开始的，作为实验动物还是从20世纪开始的， 近年来已培育出实验专用动物，如小猎兔狗(Beagle)。主要用途有：①实验外科学研究， 如心血管外科、脑外科、断肢再植、器官或组织移植等：②药理血、毒理学研究，如心血管 药理、消化系统药理、药代学研究、新药临床前毒理研究等：③慢性实验研究。如条件反射 实验、高血压、放射病实验、内分泌腺摘除实验等：④营养学实验，如进行性蛋白质营养不 良、家族性骨质疏松、视网膜发育不全、高胆固醇血症、动脉粥样硬化等研究：⑤用于生理 学、病理生理学等基础医学实验研究。 7.猴(Monkey)猴类具有许多生物特征与人类极为相似，在生物医学研究中使用猴 类作做实验最理想。主要用途有：①药理学和毒理学研究，如避孕药研究、镇痛药的成瘾性 实验、药物代谢研究等：②复制疾病模型：③生理学研究，如进行脑功能、血液循环、呼吸 内分泌、生殖、老年生理研究：④传染病、寄生虫感染研究，如脊髓灰质炎、肝炎、麻疹 疟疾等的研究：⑤其他研究，如放射病、行为学、实验肿瘤学、口腔外科学、疫苗研制、器
实验一 录像----药理学实验操作 【实验目的】 通过观看录像，掌握常用实验动物的特点与用途,同时掌握小白鼠、家兔及大白鼠等常 用实验动物的捉拿、固定、给药及处死方法。 【实验内容】 （一）常用实验动物的特点与用途 1．小鼠（Mouse） 是实验室最常用的一种动物，便于大量人工繁殖，适用于需要大 量动物的试验，如药物的筛选、药物的毒性试验、半数致死量的测定、药物效价的比较、避 孕药及抗肿瘤药等的试验研究。此外，还用于遗传性疾病、免疫学、微生物学等的研究。 2．大鼠（Rat） 目前已成为肿瘤学、药理学、营养学、繁殖学、内分泌学、免疫学、 医药、农药毒性等方面的重要实验动物。其主要用途有：①筛选新药及心血管药理研究；② 营养、代谢性疾病研究；③复制肿瘤模型用于抗肿瘤药物的研究；④利用大鼠足跖浮肿法筛 选抗炎药；⑤高级神经活动研究；⑥神经、内分泌研究；⑦用于避孕药、传染病、畸胎学及 遗传学等方面的研究。 3．豚鼠（Guine-pig） 又名天竺鼠、荷兰猪、海猪，也是较常用的实验动物。其主 要用途有：①因其对组胺敏感，并以与致敏，故常被选用与平喘药、抗组胺药的研究；又因 其对结核杆菌高度敏感，感染后病变非常类似人的进行性结核病变，故也常用于结核病和抗 结核病药的实验治疗研究。②因其体内不能合成维生素 C，对其缺乏非常敏感，故常用于坏 血病的实验研究；③还用于免疫学、微生物学的实验研究。 4．家兔（Rabbit） 易饲养且温顺，繁殖率高，是医学研究中广泛采用的动物。主要用 于：①心血管疾病研究，观察药物对家兔心脏、血压、呼吸、胆固醇代谢和动脉粥样硬化的 影响；②眼科研究，如筛选治疗角膜瘢痕的有效药物等；③还用于胚胎学、免疫学、遗传学、 生理学等方面的研究。 5．猫（Cat） 猫主要用于神经学、生理学和毒理学等方面的研究。目前，我国实验用 猫都是收购来的，个体差异较大。尚待进行纯化工作，将其优良遗传特征固定下来。主要用 于：①药理学研究，观察药物对呼吸系统、心血管系统的功能效应和药物代谢学的研究，如 常用猫进行冠状窦血流量的测定，观察药物对血压的影响等；②中枢神经系统研究，常用猫 脑室灌注法来研究药物作用部位，还用于观察神经递质等活性物质的释放及去大脑僵直，姿 势反射试验等；③循环功能急性实验研究，用于观察药物对血压的影响等；④在血液病研究 中用猫作白血病和恶病质者血液研究，还用于阿米巴痢疾等的研究。 6．狗（Dog） 用狗做实验是从 17 世纪开始的，作为实验动物还是从 20 世纪开始的， 近年来已培育出实验专用动物，如小猎兔狗（Beagle）。主要用途有：①实验外科学研究， 如心血管外科、脑外科、断肢再植、器官或组织移植等；②药理血、毒理学研究，如心血管 药理、消化系统药理、药代学研究、新药临床前毒理研究等；③慢性实验研究。如条件反射 实验、高血压、放射病实验、内分泌腺摘除实验等；④营养学实验，如进行性蛋白质营养不 良、家族性骨质疏松、视网膜发育不全、高胆固醇血症、动脉粥样硬化等研究；⑤用于生理 学、病理生理学等基础医学实验研究。 7．猴（Monkey） 猴类具有许多生物特征与人类极为相似，在生物医学研究中使用猴 类作做实验最理想。主要用途有：①药理学和毒理学研究，如避孕药研究、镇痛药的成瘾性 实验、药物代谢研究等；②复制疾病模型；③生理学研究，如进行脑功能、血液循环、呼吸、 内分泌、生殖、老年生理研究；④传染病、寄生虫感染研究，如脊髓灰质炎、肝炎、麻疹、 疟疾等的研究；⑤其他研究，如放射病、行为学、实验肿瘤学、口腔外科学、疫苗研制、器
官移植、遗传代谢性疾病等研究。 8.蟾蜍(Toad)和青蛙Frog 类心脏在离体的情识下，仍可右节奉地辅动很久 因而用于研究心脏的功能及药物 其的影响等。蛙类的 肠肌和坐骨神经可以用来观察外周 神经的生理功能，药物对周围神经、神经肌接头或横纹肌的作用等 。在临床检验工作中还可 用雌蛙作妊娠诊断实验。 (二)常用实验动物的性别鉴别法 使兔早饰卧位，自尾部向前观寥，肛门位于尾基部之前方。门前有滑猪孔 成年雄免的漫殖孔附近可见阴囊。雌免肛门前方有两个相距极近的孔，分别为尿道和阴道口。 此外， 雌兔的腹部尚有五对明显可见的乳头， 2.小鼠和大鼠 者性别鉴别方法相同。雄性者阴囊明显可见，性器官与肛门距离 较远，二者间有毛，雌性者性器官与肛门距离近，界线不清，腹部有乳头明显可见。 (三)常用实验动物的编号 兔等较大的动物可用特制的号码牌固定于耳上。小鼠、大鼠及白色家兔等可用黄 有两 种方法可供选用 1.适合110的编号：将小白鼠背部、腰部、后肢按左、中、右分为九个区，从左到 右标记19号，第10号不作标记。 2.适合10以上的编号：先将小白鼠背部分为前肢、后肢，按左右初步划为4个区， 从左到右标记14号，头部标5号，昆部标10号，背部正中央为20号。6以上的具体记号 方法是：(1)+(5)=6号，(4)+(5)-9号，(10)+(1)+(5)=16号，(10)+（4) )=19号. )号以上的编号方法同10以上。30号=(10)+(20)，依此类推 (四)常用实验动物的捉章、固定方法 1.小白鼠：右手抓住鼠尾，放在台上或鼠笼盖铁纱网上，然后用左手拇指及食指沿其 背向前抓住双耳及颈部皮肤，并以左手中指或无名指和堂部夹住鼠尾，固定在手上。另一加 法是仅用左手，先用食指和拇指抓住小鼠尾巴后，用无名指极小指夹住其尾部，再以拇指及 食指捉住其颈部皮肤。前 法易学 后一法稍鸡 但便于快速捉拿给药 2.大白鼠：将大白鼠放于粗造面上，用右手拉其尾部，左手的将指和食指抓其头部皮 肤及双耳，其余三指与掌部夹住其背腹部皮肤，对于身体特别大火凶狠要咬人的大白鼠，可 先用布巾包裹其身（露出口鼻），然后进行操作 3。家兔：右手抓住家兔预部皮肤，将兔捉起（抓的面积越大，其助重点越分散）。加果 家兔肥大，再以左手托住它的臀部，将吃重点承 在手上 (五)常用实验动物的给药方法 1.灌胃法 ①小白鼠灌胃法：以左手捉拿小白鼠，使腹部朝上，颈部拉直，右手持配有灌胃针头的 注射器，自口角处插入口腔，再从舌面紧沿上颚进入食管。如手法正确，不难成功：若遇阻 力，应退出后再插，不能用强力猛插，以免刺破食管和灌入气管，造成动物死亡 ②家兔灌胃法：需由两个人合作进行 个人取坐位，用两腿夹持兔身，左手握住家免 双耳，固定家兔头部，右手持开口器从口角插入口腔，压在舌面上，并向后翻转几下，使兔 舌伸直。另一人取10号导尿管从开口其中部小孔插入食道。插管时易误入气管，区别方法 主要是谨慎观察插管后动物的反应，插入气管时可引起则烈挣扎和呼吸困难，也可将导尿管 的外端浸入水中，加有气泡吹出，表明插在气管内，此时应拔管重插。当明导管确实插在 食管内以后 取注射器接在导管上，将药液缓慢推入。 再推注少量空气，使导尿 中不致有 药液残留，慢慢拔出导尿管，取出开口器。注意：在插管前一定要检查导尿管是否畅通。 2.注射法 ①皮下注射：小白鼠皮下注射可由两人合作，一人左手抓住小白鼠头部皮肤，右手拉住
官移植、遗传代谢性疾病等研究。 8．蟾蜍（Toad）和青蛙(Frog) 蛙类心脏在离体的情况下，仍可有节奏地搏动很久， 因而用于研究心脏的功能及药物对其的影响等。蛙类的腓肠肌和坐骨神经可以用来观察外周 神经的生理功能，药物对周围神经、神经肌接头或横纹肌的作用等。在临床检验工作中还可 用雌蛙作妊娠诊断实验。 （二）常用实验动物的性别鉴别法 1．兔 使兔呈仰卧位，自尾部向前观察，肛门位于尾基部之前方。门前有泄殖孔。 成年雄兔的泄殖孔附近可见阴囊。雌兔肛门前方有两个相距极近的孔，分别为尿道和阴道口。 此外，雌兔的腹部尚有五对明显可见的乳头。 2．小鼠和大鼠 二者性别鉴别方法相同。雄性者阴囊明显可见，性器官与肛门距离 较远，二者间有毛，雌性者性器官与肛门距离近，界线不清，腹部有乳头明显可见。 （三）常用实验动物的编号 犬、兔等较大的动物可用特制的号码牌固定于耳上。小鼠、大鼠及白色家兔等可用黄 色苦味酸涂于毛上标号。有两种方法可供选用： 1．适合 1~10 的编号：将小白鼠背部、腰部、后肢按左、中、右分为九个区，从左到 右标记 1~9 号，第 10 号不作标记。 2．适合 10 以上的编号：先将小白鼠背部分为前肢、后肢，按左右初步划为 4 个区， 从左到右标记 1~4 号，头部标 5 号，尾部标 10 号，背部正中央为 20 号。6 以上的具体记号 方法是：（1）+（5）=6 号，（4）+（5）=9 号，（10）+（1）+（5）=16 号，（10）+（4）+ （5）=19 号……20 号以上的编号方法同 10 以上。30 号=（10）+（20），依此类推。 （四）常用实验动物的捉拿、固定方法 1．小白鼠：右手抓住鼠尾，放在台上或鼠笼盖铁纱网上，然后用左手拇指及食指沿其 背向前抓住双耳及颈部皮肤，并以左手中指或无名指和掌部夹住鼠尾，固定在手上。另一抓 法是仅用左手，先用食指和拇指抓住小鼠尾巴后，用无名指极小指夹住其尾部，再以拇指及 食指捉住其颈部皮肤。前一法易学，后一法稍难，但便于快速捉拿给药。 2．大白鼠：将大白鼠放于粗造面上，用右手拉其尾部，左手的拇指和食指抓其头部皮 肤及双耳，其余三指与掌部夹住其背腹部皮肤，对于身体特别大火凶狠要咬人的大白鼠，可 先用布巾包裹其身（露出口鼻），然后进行操作。 3．家兔：右手抓住家兔颈部皮肤，将兔捉起（抓的面积越大，其吃重点越分散），如果 家兔肥大，再以左手托住它的臀部，将吃重点承托在手上。 （五）常用实验动物的给药方法 1．灌胃法 ① 小白鼠灌胃法：以左手捉拿小白鼠，使腹部朝上，颈部拉直，右手持配有灌胃针头的 注射器，自口角处插入口腔，再从舌面紧沿上颚进入食管。如手法正确，不难成功；若遇阻 力，应退出后再插，不能用强力猛插，以免刺破食管和灌入气管，造成动物死亡。 ② 家兔灌胃法：需由两个人合作进行。一个人取坐位，用两腿夹持兔身，左手握住家兔 双耳，固定家兔头部，右手持开口器从口角插入口腔，压在舌面上，并向后翻转几下，使兔 舌伸直。另一人取 10 号导尿管从开口其中部小孔插入食道。插管时易误入气管，区别方法 主要是谨慎观察插管后动物的反应，插入气管时可引起剧烈挣扎和呼吸困难，也可将导尿管 的外端浸入水中，如有气泡吹出，表明插在气管内，此时应拔管重插。当判明导管确实插在 食管内以后，取注射器接在导管上，将药液缓慢推入，再推注少量空气，使导尿管中不致有 药液残留，慢慢拔出导尿管，取出开口器。注意：在插管前一定要检查导尿管是否畅通。 2．注射法 ① 皮下注射：小白鼠皮下注射可由两人合作，一人左手抓住小白鼠头部皮肤，右手拉住
鼠尾。另一人左手捏起背部皮肤，右手持注射器，将针头刺入背部皮下，如由一人操作，可 将小白鼠置于铁丝网上，左手抓小白鼠，以拇指和食指捏起背部皮肤， 右手持注射器刺入背 部皮下。其他动物皮下注射的部位均在背部皮下 大动物皮下注射时需固定。为避免药液外 溢，进针时要快速，退针时要将针旋转几周后再退 ②腹腔注射：小白鼠腹腔注射是以左手抓小白鼠（方法同灌胃），右手持注射器，取约 45角将针头从下腹部向头端刺入腹腔。进针部位不宜太高，刺入不能太深，以免伤及内脏。 ③肌肉注射：肌肉注射部位一般多取后肢大腿外侧肌肉处，将动物固定，左手抓住大腿 右手持注射器 针头与皮肤表面垂直刺入肌肉（小动物斜刺），回抽无血 即可注药。 ④静脉注别 a小白鼠尾静脉注射 小白鼠尾部静脉注射可将小白鼠置特定固定筒内，使鼠尾外露，用酒精或二甲苯棉球涂 擦尾部，或将鼠尾在4050℃热水中浸泡半分钟，使血管扩张。用右手拉住鼠尾尖，选择一 条扩张最明显的静脉，右手持注射器，将针头刺入血管， 推入药液，如推注时有阻力，且局 部变白表明针头没有刺入血管，应拔针后重新穿刺，。穿刺血管时宜从鼠尾末端开始，以便 失败后可在第一次穿刺点的上方重新开始。 b.家免耳缘静脉注射 如两人合作，一人固定兔身，如一人操作，则用兔固定箱。选用耳缘静脉，剪去相毛 用手指轻弹耳壁，使血管扩张，以手指于一耳缘根部压住耳缘静脉，待血管明显充血以后 取抽好药液的 射器 从静脉近末端处插入血管，如见到针头 血管内 使以手指将针头 兔耳固定，不让针头滑动。放开耳根静脉手指压力，即可注入药液。如果注射进入血管内则 畅通无阻，并可见到血液被药液冲走：如注射在皮下，则耳壁肿胀。当注射完毕，立即用干 棉球按在针眼上，即可将针拔下，并继续按压片刻，以防出血。 (六)常用实验动物的处死方法 椎脱白法：用镊子或手压住小鼠的头后部，另一只手拉住尾巴，用力稍向后上方 拉，使之颈椎脱白，瞬间死亡。小鼠或大鼠均可用此法处死 2.空气栓塞法：用注射器将空气急速注入静脉（耳静脉、尾静脉、眶静脉等），可迅速 使动物死亡。小鼠可注入0.3ml0.5ml,兔和猫注入10-20ml,犬可注入70-150ml。 3,大景放血法：鼠可采用眼匡动、静脉大量放血致死。猫与猴等在麻碎状态下，暴罗 出动物的颈动脉在两端用止血钳夹住，插入套管，然后放松心脏侧的钳子，轻轻压迫胸部 尽可能大量放血致死 【实验小结】 本次试验要求掌握常用实验动物小白鼠的捉拿、固定以及最常用的给药方法（如肌注、 皮下注射、腹腔注射及静脉注射等)。此外，注射器的使用常识亦是本实验内容，纠正学生 在实哈中的不正确操作手法
鼠尾。另一人左手捏起背部皮肤，右手持注射器，将针头刺入背部皮下，如由一人操作，可 将小白鼠置于铁丝网上，左手抓小白鼠，以拇指和食指捏起背部皮肤，右手持注射器刺入背 部皮下。其他动物皮下注射的部位均在背部皮下，大动物皮下注射时需固定。为避免药液外 溢，进针时要快速，退针时要将针旋转几周后再退出。 ② 腹腔注射：小白鼠腹腔注射是以左手抓小白鼠（方法同灌胃），右手持注射器，取约 45。角将针头从下腹部向头端刺入腹腔。进针部位不宜太高，刺入不能太深，以免伤及内脏。 ③ 肌肉注射：肌肉注射部位一般多取后肢大腿外侧肌肉处，将动物固定，左手抓住大腿， 右手持注射器，针头与皮肤表面垂直刺入肌肉（小动物斜刺），回抽无血，即可注药。 ④ 静脉注射 a. 小白鼠尾静脉注射 小白鼠尾部静脉注射可将小白鼠置特定固定筒内，使鼠尾外露，用酒精或二甲苯棉球涂 擦尾部，或将鼠尾在 40~50℃热水中浸泡半分钟，使血管扩张。用右手拉住鼠尾尖，选择一 条扩张最明显的静脉，右手持注射器，将针头刺入血管，推入药液，如推注时有阻力，且局 部变白表明针头没有刺入血管，应拔针后重新穿刺，。穿刺血管时宜从鼠尾末端开始，以便 失败后可在第一次穿刺点的上方重新开始。 b. 家兔耳缘静脉注射 如两人合作，一人固定兔身，如一人操作，则用兔固定箱。选用耳缘静脉，剪去粗毛， 用手指轻弹耳壁，使血管扩张，以手指于一耳缘根部压住耳缘静脉，待血管明显充血以后， 取抽好药液的注射器，从静脉近末端处插入血管，如见到针头在血管内，便以手指将针头、 兔耳固定，不让针头滑动。放开耳根静脉手指压力，即可注入药液。如果注射进入血管内则 畅通无阻，并可见到血液被药液冲走；如注射在皮下，则耳壁肿胀。当注射完毕，立即用干 棉球按在针眼上，即可将针拔下，并继续按压片刻，以防出血。 （六）常用实验动物的处死方法 1．颈椎脱臼法：用镊子或手压住小鼠的头后部，另一只手拉住尾巴，用力稍向后上方 拉，使之颈椎脱臼，瞬间死亡。小鼠或大鼠均可用此法处死。 2．空气栓塞法：用注射器将空气急速注入静脉（耳静脉、尾静脉、眶静脉等），可迅速 使动物死亡。小鼠可注入 0.3ml~0.5ml，兔和猫注入 10~20ml，犬可注入 70~150ml。 3．大量放血法：鼠可采用眼眶动、静脉大量放血致死。猫与猴等在麻醉状态下，暴露 出动物的颈动脉在两端用止血钳夹住，插入套管，然后放松心脏侧的钳子，轻轻压迫胸部， 尽可能大量放血致死。 【实验小结】 本次试验要求掌握常用实验动物小白鼠的捉拿、固定以及最常用的给药方法（如肌注、 皮下注射、腹腔注射及静脉注射等）。此外，注射器的使用常识亦是本实验内容，纠正学生 在实验中的不正确操作手法