第三节酶活力其测定和分离纯化 一、酶活力与酶促反应速度 二、酶活力单位 三、酶的比活力 四、酶活力的测定方法 五、酶的分离纯化 p335
、酶活力与酶促反应速度 ●酶活力( enzyme activity):也称酶活性,是指酶催化一定化 学反应的能力。 ●酶活力的大小可以用在一定条件下所催化的某一化学反 应的反应速度来表示,两者呈线性关系。 ●酶促反应速度:单位时间、单位体积中底物的减少量或 产物的增加量。 单位:浓度/单位时间
、酶活力与酶促反应速度 ■酶活测定过程底物往往是过 量的,底物的减少量只占总 量的极小部分,不易测准。 产物浓度 ■相反产物从无到有,只要测 斜率=浓度时间=V 定方法足够灵敏,就可以准 确测定。在实际酶活测定中 般以产物的增加量为准。 时间 酪反应的速度曲线 研究酶促反应速度,以酶促反应的初速度为准(底物消耗 ≤5%)
二、酶的活力单位(U, activity unit) 口酶活力单位是根据某种酶在最适条件下,单位时间内被 酶作用的底物的减小量或产物的生成量来规定的. 口为了便于比较和统一活力标准,1961年国际酶学委员 会曾作过统一的规定:在标准条件下,一分钟内催化1微 摩尔底物转化的酶量定义为一个酶活力单位,亦即国际 单位{U).1|U=1 umol /min
三、酶的比活力( Specific activity) 比活力(SA):每毫克酶蛋白所具有的酶活力单位数。 单位:Umg蛋白质。 酶的比活力是分析酶的含量与纯度的重要指标。 也