提取----碱提取酸沉淀法OHA→沉淀样品提取液过滤(黄酮类)注意:加入的酸、碱度应尽可能低槐花米例如:芦丁的提取H2O石灰乳调pH=8~9滤液药渣酸调 pH = 3~4滤液沉淀
提取-碱提取酸沉淀法 注意:加入的酸、碱度应尽可能低 例如:芦丁的提取 样品 OH - 提取液 过滤 H + 沉淀 (黄酮类) 槐花米 H2O 石灰乳调 pH = 8~9 药渣 滤液 酸调 pH = 3~4 沉淀 滤液
热水提取法由于黄酮苷易溶于水的性质,故采用热水提取水溶性杂质多,纯化困难甲醇或乙醇提取方法:可采用浸渍/回流/渗滤,但不能用煎煮法醇浓度范围:60%~70%,低浓度适合提取苷类85%~95%高浓度适合提取游离黄酮
热水提取法 由于黄酮苷易溶于水的性质,故采用热水提取 水溶性杂质多,纯化困难 甲醇或乙醇提取 方法:可采用浸渍 /回流/渗滤,但不能用煎煮法 醇浓度范围:60%~70%,低浓度适合提取苷类 85%~95% 高浓度适合提取游离黄酮
黄酮类化合物分离根据化合物的性质,采取哪些分离方法呢?化合物的极性大小?方法一溶剂、吸附、分配色谱化合物的酸性强弱?方法-pH梯度萃取化合物的分子大小?方法葡聚糖凝胶分子中具有特殊结构?(如:邻二酚羟基)方法金属盐络合
黄酮类化合物分离 根据化合物的性质,采取哪些分离方法呢? 化合物的极性大小? 方法—溶剂、吸附、分配色谱 化合物的酸性强弱? 方法——pH梯度萃取 化合物的分子大小? 方法——葡聚糖凝胶 分子中具有特殊结构? (如:邻二酚羟基) 方法——金属盐络合
黄酮类化合物的分离1.柱色谱法硅胶、氧化铝、大孔吸附树脂聚酰胺、葡聚糖凝胶2.pH梯度萃取法
黄酮类化合物的分离 1.柱色谱法 (硅胶、氧化铝、大孔吸附树脂、 聚酰胺、葡聚糖凝胶) 2.pH梯度萃取法
柱色谱法---硅胶柱色谱(1)硅胶柱色谱出柱先后顺序:①若母核结构相同,而-OH取代数目不同,则-OH数量多的后出柱②易形成分子内氢键的-OH,其极性变小先出柱(Rf值)如: 邻二-OH > 间二-OH一般出柱顺序:苷元>单糖苷>双糖苷>多糖苷
柱色谱法-硅胶柱色谱 (1)硅胶柱色谱 出柱先后顺序: ①若母核结构相同,而-OH取代数目不同, 则-OH 数量多的后出柱 ②易形成分子内氢键的-OH,其极性变小先出柱 如:邻二-OH > 间二-OH (Rf值) ③一般出柱顺序:苷元 > 单糖苷 > 双糖苷 > 多糖苷