临床检验基础（第5版） 二、血红蛋白测定 HiCN法检测原理： 血红蛋白（SHb除外)中的亚铁离子(Fe2+)被 高铁氰化钾氧化为高铁离子（Fe3+),血红蛋白 转化成高铁血红蛋白(Hi)。Hi与氰化钾(KCN) 中的氰离子反应生成HiCN。HiCN最大吸收波峰 为540nm,波谷为504nm。在特定条件下， HiCN毫摩尔消光系数为44L/(mmol-cm) HiCN在540nm处的吸光度与浓度成正比，根据 测得吸光度可求得血红蛋白浓度
二、血红蛋白测定 HiCN法检测原理： 血红蛋白（SHb除外）中的亚铁离子（Fe2+）被 高铁氰化钾氧化为高铁离子（Fe3+），血红蛋白 转化成高铁血红蛋白（Hi）。Hi与氰化钾（KCN） 中的氰离子反应生成HiCN。HiCN最大吸收波峰 为540nm，波谷为504nm。在特定条件下， HiCN毫摩尔消光系数为44L/（mmol•cm）。 HiCN在540nm处的吸光度与浓度成正比，根据 测得吸光度可求得血红蛋白浓度
临床检验基础（第5版） 二、血红蛋白测定 方法学评价 血红蛋白测定方法大致分为4类（表2-7)。1966年， ICSH推荐HiCN测定法作为Hb测定的标准方法。1978年 FCC和IAP在联合发表的国际性文件中重申了HiCN法。 表2-7血红蛋白测定方法及基本原理 测定方法 测定原理 全血铁法 Hb分子组成 比重法、折射仪法 血液物理特性 血气分析法 Hb与O,可逆性结合的特性 比色法（临床常用） Hb衍生物光谱特点
二、血红蛋白测定 方法学评价 血红蛋白测定方法大致分为4类（表2-7）。1966年， ICSH推荐HiCN测定法作为Hb测定的标准方法。1978年， IFCC和IAP在联合发表的国际性文件中重申了HiCN法
临床检验基础（第5版） 二、血红蛋白测定 表2-8血红蛋白测定的方法学评价 测定方法 优点 缺点 HiCN测定法 参考方法，操作简单、反应速度快、 KCN有剧毒，可使高白细胞、高球蛋白 可检测除SHb之外的所有Hb,产物 血症的标本浑浊，对HbCO的反应慢、 稳定，便于质控 不能测定SHb SDS-Hb测定法 次选方法，操作简单、呈色稳定、 SDS质量差异大、消光系数未定，SDS 试剂无毒、结果准确、重复性好 溶血活力大，易破坏白细胞，不适用于 同时进行白细胞计数的血液分析仪 AHDs测定法 试剂简易，无毒，呈色稳定，准 575nm波长比色、不便于自动检测、HbF 确性与精密度较高 不能转化 HiN,测定法 准确性、精密度较高 试剂仍有毒性（为HiCN的1/7）、HbCO 转化慢(20min) CTAB测定法 溶血性强且不破坏白细胞，适于 精密度、准确性略低 血液分析仪检测
二、血红蛋白测定
临床检验基础（第5版） 二、血红蛋白测定 表2-9-1血红蛋白测定的质量保证 项目 质量保证 标本 ①血红蛋白检测原理是比色法 ②引起标本浊度增大的因素常致血红蛋白浓度假性 增高，如高脂血症、高球蛋白、高白细胞(WBC> 30×10/L)及高血小板(PLT>700×10/L)等 ③HbCO增多也可影响检测结果 器材及试剂 定期校准分光光度计，选用合格的微量采血管和刻 度吸管及比色杯。注意保证试剂质量 技术操作 ①消毒、采血、稀释、混匀等要求与红细胞计数相同 ②确保HbC0完全转化，可延长转化时间或加大试剂 中K,Fe(CN)的用量 废弃物的处理①HCN转化液中氰化钾是剧毒品，配制转化液时要 按剧毒品管理程序操作 ②为防止氰化钾污染环境，应妥善处理测定后的废液
二、血红蛋白测定
临床检验基础（第5版） 二、血红蛋白测定 【参考区间】 ①成年：男性120~160g/L, 女性110~150g/L。 ②新生儿170~200g/L。 【临床意义】 Hb的临床意义与红细胞计数相似，但判断贫血程度优于 红细胞计数。根据Hb浓度可将贫血分为4度。 轻度贫血：Hb<120g/L(女性Hb<110gL); 中度贫血：Hb<90gL; 重度贫血：Hb<60gL; 极重度贫血：Hb<30gL。 当RBC<1.5×1012L,Hb<45g/L时，应考虑输血
二、血红蛋白测定 【参考区间】 ①成年：男性 120～160 g/L， 女性 110～150 g/L。 ②新生儿170～200 g/L。 【临床意义】 Hb的临床意义与红细胞计数相似，但判断贫血程度优于 红细胞计数。根据Hb浓度可将贫血分为4度。 轻度贫血：Hb＜120g/L（女性Hb＜110g/L）； 中度贫血：Hb＜90g/L； 重度贫血：Hb＜60g/L； 极重度贫血：Hb＜30g/L。 当RBC＜1.5×1012/L，Hb＜45g/L时，应考虑输血