Contents 1、 重组DNA技术发展史上的重大事件 2、索见DNA操作技术 3、基因克隆技术 4、基因表达研究技术 5、基因芯片及数据分析 6、蛋白质组学及其研究技术
52常见DNA操作技术 521细菌转化 细菌转化：将一种细菌的DNA导入到另外一种细 菌菌株而导致性状特征发生遗传改变的生命过程。 这种提供转化DNA的菌株叫做供体菌株，而接受 转化DNA的寄主菌株则称做受体菌株。 细菌转化方法：CaCl2法和电刺激法
空载体 CaCl2法 含有外源DNA的体 大肠杆菌《 载体 ■ 7 薆失茹天爵 0℃CaCl2 2C热漫 选择性培养基上培养 8)o8。 (未被转化的细菌 韩选阳性克隆 含辛染叠羚望堕整夜白， 得到大量目的基因 图5一4细菌转化及篮白斑俯选
噬菌体作载体将DNA注 限制性内切酶 入到寄主细胞中的方法 切除与噬菌体包装无关的DNA片断 替换型 插入型 加入外源 】DNA连接酶 限制性内切酶切割 DNA片段 重组常菌体DNA分子 葵绿公酒醒 加入外源DNA DNA连接酶连接 堂菌体外壳蛋白包装 体外包装 蓠有登酒 感染细菌通过要体蛋白将 外源DNA注入宿主细胞内 图5一5λ噬菌体可以作为克隆载体
522PCR技术 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR) PCR技术：是一种在体外快速扩增特定基因或 DNA序列的方法。它可以在试管中建立反应，经 数小时之后，就能将极微量的目的基因或某一特 定的DNA片段扩增数十万乃至千百万倍。 ·经n次扩增后，一个DNA分子可变为2n 个DNA分子