第五章分子生物学研究方法5.1重组DNA技术发展史5.2DNA操作技术5.3基因克隆技术5.4基因表达研究技术5.5蛋白质组学及研究技术
第五章 分子生物学研究方法 5.1 重组DNA技术发展史 5.2 DNA操作技术 5.3 基因克隆技术 5.4基因表达研究技术 5.5蛋白质组学及研究技术
5.1重组DNA技术发展史511.1重组DNA技术诞生的理论基础40年代明确了遗传的物质基础是DNA50年代揭示了DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制，解决了基因的自我复制和遗传信息传递问题。50年代末和60年代提出了“中心法则”和操纵子学说，并成功地破译了遗传密码，从而阐明了遗传信息的流向和表达问题
5.1 重组DNA技术发展史 ▪ 40年代明确了遗传的物质基础是DNA ▪ 50年代揭示了DNA 分子的双螺旋结构模型和半 保留复制，解决了基因的自我复制和遗传信息 传递问题 。 ▪ 50年代末和60年代提出了“中心法则”和操纵 子学说，并成功地破译了遗传密码，从而阐明 了遗传信息的流向和表达问题。 5.1.1重组DNA技术诞生的理论基础
5.1重组DNA技术发展史5.1.2关键性实验技术问世为重组DNA技术奠基1、DNA分子的切割与连接技术限制性核酸内切酶和连接酶的陆续发现，才使分子生物学家有了进行DNA操作的基本工具。2、载体构建和大肠杆菌转化体系的建立1970年M.Mande1和A.Hige发现，大肠杆菌的细胞经过氯化钙适当处理之后，便能吸收1噬菌体的DNA。1972年美压斯坦福大学S.Cohen报道，经氯化钙处理的大肠杆菌细胞也能摄取质粒DNA。大肠杆菌转化体系的建立，对重组DNA技术的创立具有特别重要的意义。3、Southern杂交、DNA序列分析和聚合酶链反应
5.1.2关键性实验技术问世为重组DNA技术奠基 ▪ 1、DNA分子的切割与连接技术 ▪ 限制性核酸内切酶和连接酶的陆续发现，才使分子生物学 家有了进行DNA操作的基本工具。 ▪ 2、载体构建和大肠杆菌转化体系的建立 ▪ 1970年M.Mandel和A.Hige发现，大肠杆菌的细胞经过氯化 钙适当处理之后，便能吸收λ噬菌体的DNA。1972年美国 斯坦福大学S.Cohen报道，经氯化钙处理的大肠杆菌细胞 也能摄取质粒DNA。大肠杆菌转化体系的建立，对重组DNA 技术的创立具有特别重要的意义。 ▪ 3、Southern杂交、DNA序列分析和聚合酶链反应 5.1 重组DNA技术发展史
5.1重组DNA技术发展史5.1.3重组DNA技术的概念重组DNA技术（recombinant DNA technique）：是按照人们意愿，在体外对DNA分子进行重组，再将重组分子导入受体细胞，使其在细胞中扩增和繁殖，以获得该DNA的大量拷贝。基因克隆（gene cloning)分子克降（molecular cloning
▪ 重组DNA技术(recombinant DNA technique): 是 按照人们意愿，在体外对DNA分子进行重组,再将 重组分子导入受体细胞，使其在细胞中扩增和繁 殖，以获得该DNA的大量拷贝。 ▪ 基因克隆(gene cloning) ▪ 分子克隆(molecular cloning) 5.1.3重组DNA技术的概念 5.1 重组DNA技术发展史
5. 1重组DNA技术发展史5.1.4 重组DNA技术的基本步骤1、四大要素①外源基因②载体③工具酶④受体细胞
5.1.4 重组DNA技术的基本步骤 1、四大要素 ①外源基因 ②载体 ③工具酶 ④受体细胞 5.1 重组DNA技术发展史