DNA芯片技术的原理 在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量DNA 片段以显微打印的方式有序地固化于支持物表面作为靶标 (或称固相探针),待测的核酸片段人工标记上不同的荧 光色素或同位素、生物素等作为探针(或称靶片段), 定条件下两者杂交,根据杂交后不同的信号,进行计算机 分析,从而得到靶片段的基因序列、表达情况等信息。 DNA chip(s); gene chip(s); cDNA chip; DNA arrays oligonucleotide array; microarray;
7 在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量DNA 片段以显微打印的方式有序地固化于支持物表面作为靶标 （或称固相探针），待测的核酸片段人工标记上不同的荧 光色素或同位素、生物素等作为探针（或称靶片段），一 定条件下两者杂交，根据杂交后不同的信号，进行计算机 分析，从而得到靶片段的基因序列、表达情况等信息。 DNA 芯 片 技 术 的 原 理 DNA chip(s); gene chip(s); cDNA chip; DNA array; oligonucleotide array; microarray;
DNA芯片的特点 高度集成化 大通量平行分析 大规模 高灵敏度 样品需要量小
DNA芯片的特点 8 • 高度集成化 • 大通量平行分析 • 大规模 • 高灵敏度 • 样品需要量小
/·DNA芯片的主要类型 ·原位合成芯片(光刻、喷印) 预合成后直接点样芯片(接触式、非接触式) 表达谱芯片 基因组芯片 测序芯片 ·指纹图谱芯片 诊断芯片 毒理芯片 等等
• DNA芯片的主要类型 9 • 原位合成芯片（光刻、喷印） • 预合成后直接点样芯片（接触式、非接触式） • 表达谱芯片 • 基因组芯片 • 测序芯片 • 指纹图谱芯片 • 诊断芯片 • 毒理芯片 • 等等
DNA芯片技术的操作流程
一、 DNA芯片技术的操作流程 10
/·DNA芯片技术操作流程图 芯片的制作 样品的制备和标记 真自购买芯片点样仪、玻璃片 接行 待测样品核酸提取与纯化 奖设基或膜 购 反转录标 商并 购买/合成 Oligo dna或大 标记 记/PCR标 品向规模PCR扩增目的片段 记/随机引 物标记等 方点样及固定 片定自制芯片 标记靶片段纯化 做 分子杂交 图像采集和软件分析
• DNA芯片技术操作流程图 11 芯片的制作 直 接 购 买 商 品 化 芯 片 自 行 设 计 并 向 厂 方 定 做 购买芯片点样仪、玻璃片 基或膜； 购买/合成Oligo DNA或大 规模PCR扩增目的片段； 点样及固定； 自制芯片 样品的制备和标记 待测样品核酸提取与纯化 标记 标记靶片段纯化 分子杂交 图像采集和软件分析 反转录标 记/PCR标 记/随机引 物标记等