实验步骤:>1:按仪器使用方法中的操作步骤开启主机和计算机,使仪器进行预热和自检。>2:将硫酸奎宁标准溶液置于石英吸收池中3.测定激发光谱(1)开机:开主机开关,氙灯(Xelamp)和运行(run指示灯即亮;打开计算机,进入Windows系统;在桌面上双击FLSolution图标,进入应用软件的主窗口;计算机通过自检后出现操作窗口
实验步骤: ➢1.按仪器使用方法中的操作步骤开启主机和计算 机,使仪器进行预热和自检。 ➢2.将硫酸奎宁标准溶液置于石英吸收池中。 3.测定激发光谱 (1) 开机:开主机开关,氙灯(Xe lamp)和运行(run) 指示灯即亮;打开计算机,进入Windows系统;在 桌面上双击FL Solution图标,进入应用软件的主窗 口;计算机通过自检后出现操作窗口
实验步骤:(2)实验参数设定:打开主窗口的Edit菜单,点击Method进入方法编辑窗口;打开general菜单,选择波长扫描(wavelength scan);打开Instrument菜单,在扫描模式(scanmodel)中选择激发(Excitation),在数据模式(data model)中选择荧光(F1uorescence);将最大发射波长(EM WL)固定在430nm,起始波长(EX Start WL)设为250nm,激发终止波长(EXEndWL)设为400nm设定完成并确定后,已设定的相关参数会显示在监测窗口中
实验步骤: (2) 实验参数设定:打开主窗口的Edit菜单,点击 Method进入方法编辑窗口;打开 general菜单,选择波长扫描(wavelength scan);打 开Instrument菜单,在扫描模式(scan model)中选择 激发(Excitation),在数据模式(data model)中选择 荧光(F1uorescence);将最大发射波长(EM WL)固 定在430nm,起始波长(EX Start WL)设为250nm, 激发终止波长(EX End WL)设为400nm;设定完成 并确定后,已设定的相关参数会显示在监测窗口中
实验步骤:(3)测定:点击工具栏Measure启动图谱扫描,即可获得溶液的激发光谱和最大激发波长A=1。在file菜单中将得到保存的激发光谱,>4:测定发射光谱按上述操作步骤,选择Method进入方法编辑窗口;在General菜单中选择波长扫描(Wavelength scan),在仪器(Instrument)菜单扫描模式(scanmodel)中选择发射(Emission),在数据模式(data model)中选择荧光(F1uorescence)。将激发波长固定在360nm,其他条件不变,在400-600nm区间进行发射波长扫描,获得溶液的发射光谱和最大发射波长入emmax
实验步骤: (3) 测定:点击工具栏Measure启动图谱扫描,即 可获得溶液的激发光谱和最大激发波长A=1。在file 菜单中将得到保存的激发光谱。 ➢ 4.测定发射光谱按上述操作步骤,选择Method 进入方法编辑窗口;在General菜单中选择波长扫 描(Wavelength scan),在仪器(Instrument)菜单扫描 模式(scan model)中选择发射(Emission),在数据模 式(data model)中选择荧光(F1uorescence)。将激发 波长固定在360nm,其他条件不变,在400-600nm 区间进行发射波长扫描,获得溶液的发射光谱和最 大发射波长λemmax
实验步骤:>5.关机从主页的File菜单选择退出Exit(x),将弹出一个对话框。如果选第一条,即先退出测定程序,不关闭氙灯(还要继续测定);如果选择第二条即先关闭氙灯,此时主机氙灯指示灯灭,运行指示灯亮。等待约10min左右再关闭主机电源。目的是保护氙灯
实验步骤: ➢ 5.关机从主页的File菜单选择退出Exit(x),将弹 出一个对话框。如果选择第一条,即先退出测定程 序,不关闭氙灯(还要继续测定);如果选择第二条, 即先关闭氙灯,此时主机氙灯指示灯灭,运行指示 灯亮。等待约10min左右再关闭主机电源。目的是 保护氙灯
思考题:>1:荧光分光光度计为什么要设置两个单色器?>2:试比较激发光谱和发射光谱,说明其区别及二者之间的关系>3.荧光分析法为什么比紫外-可见分光光度法有更高的灵敏度?
思考题: ➢1.荧光分光光度计为什么要设置两个单色器? ➢2.试比较激发光谱和发射光谱,说明其区别及二 者之间的关系。 ➢3.荧光分析法为什么比紫外-可见分光光度法有更 高的灵敏度?