影响Tm值的因素 1006 GC碱基对含量：GC含量越高Tm 80日 值越大。Tm=69.3+0.41(G 60 40日 离子强度：溶液中盐离子浓x, 20 Tm值就越高。 60 70 80 90 100 110 T./℃
影响Tm值的因素 GC碱基对含量：GC含量越高，Tm 值越大。Tm = 69.3 + 0.41(G+C)% 离子强度：溶液中盐离子浓度越高， Tm值就越高
核酸的纯度及浓度检测 >利用核酸在260nm处的光吸收测定浓度。1mgml双链DNA 的OD260=20,所以当OD260=1时，双链DNA的浓度为 50μg/ml。1mg/ml RNA或单链DNA的OD26o=25,故 OD260=1时，浓度为40μg/ml。 >OD260/OD280可用于测定DNA纯度。dsDNA的 OD260/OD280约为1.8，纯RNA约为2.0，蛋白质小于1 (大概只有0.5)。OD260/OD280>1.8可能有RNA污染， <1.8可能有蛋白污染
核酸的纯度及浓度检测 ➢ 利用核酸在260nm处的光吸收测定浓度。1mg/ml双链DNA 的OD260=20，所以当OD260=1时，双链DNA的浓度为 50µg/ml。1mg/ml RNA或单链DNA的OD260=25，故 OD260=1时，浓度为40µg/ml。 ➢ OD260/OD280可用于测定DNA纯度。 dsDNA的 OD260/OD280 约为1.8， 纯RNA约为2.0，蛋白质小于1 （大概只有0.5）。OD260/OD280＞1.8可能有RNA污染， ＜1.8 可能有蛋白污染