5.2.1.5流量计测量浮游生物网滤水量装置，使用时安装于网口半径的中点，通过水流驱动其叶轮转动，记录器记录转数，经必要的换算，可求出流经网具的实际水量。未经检定的流量计，使用前应检定或在平静海区经现场标定后方可使用。标定方法是将流量计按实际使用时的位置，安装在不带网衣的网圈上，并按实际采样时的拖网速度从一定深度（10m或30m）垂直拖至表层，记录其转数。如此反复5次～10次，取得平均值，再计算每转的流量，则为流量计标定值。此值至少需保留三位有效数字。5.2.1.6船上设备以下设备为船上常备设备：绞车、吊杆及钢丝绳：绞车应配有变速（0.3m/s~1.5m/s）排缆装置和计数器的电动绞车。若缺乏该设备，可用建筑用的升降机或手摇绞车代替。钢线绳直径一般为4.8mm左右。吊杆安装需高出船炫3m，跨炫距约1m；一一冲水设备：水泵、水管、水桶和吸水球（大的洗耳球）；一照明设备。5.2.2样品采集5.2.2.1出海前的准备5.2.2.1.1按调查项目、站数、层次，准备足够的采样工具及已编号的各种标本瓶、固定剂、记录表等，装箱上船并放于适当位置，避免撞击和丢失；5.2.2.1.2认真检查船上设备是否运转正常，若遇故障，应及时排除或更换：5.2.2.1.3配制固定制浮游植物用碘液固定。其配制方法是将碘片（I.）溶于5%的碘化钾（KI）溶液中，使成饱和溶液。需要量按每升水样加该碘液6mL~8mL准备。浮游动物用5%甲醛固定。不必事先配制，只须按标本瓶容量的5%左右加人甲醛溶液即可。5.2.2.2到站前的准备5.2.2.2.1采集人员应提前到达工作岗位，再次检查网具及其附件、记录表及其他有关配备是否完善，发现问题及时处理：5.2.2.2.2船只到站时，应先核对站位，待船停稳后，测其实际水深，确定采样层次及钢丝绳应放长度。5.2.2.3采样5.2.2.3.1浮游植物水样采集浮游植物水样采集应按以下要求进行：一用颠倒采水器或卡盖式采水器，其使用方法及操作步骤与水质项目采样相同；采样层次视调查需要、计划规定和海区各站实际水深而定；一水样采集务必与叶绿素a和水质项目的采水同步进行：所需水样量一般为500mL；一采样后，应及时按每升水样加6mL～8mL碘液固定。5.2.2.3.2垂直拖网采样分别用浅水、几型浮游生物网自底至表垂直拖电采集浮游动物。若需网采浮游植物，则用浅水Ⅱ型网。其操作步骤如下：每次下网前应检查网具有否破损，发现破损应及时修补或更换网衣；检查网底管和流量计是否处于正常状态，并把流量计指针拨至指零；放网人水，当网口贴近水面时，需调整计数器指针于零的位置；网口人水后，下网速度一般不能超过1m/s，以钢丝绳保持紧直为准；当网具接近海底时，绞车应减速，当沉锤着底，钢丝绳出现松弛时，应立即停车，记下绳长：—网具到达海底后可立即起网，速度保持在0.5m/s左右；网口未露出水面前不可停车：网口离5
5. 2. 1. 5 流量计 测量浮游生物网滤水量装置，使用时安装于网口半径的中点，通过水流驱动其叶轮转动，记录器记 录转数，经必要的换算，可求出流经网具的实际水最。 未经检定的流措计，使用前应检定或在平静海区经现场标定后方可使用。 标定方法是将流量计按 实际使用时的位置，安装在不带网衣的网圈上，并按实际采样时的拖网速度从一定深度(10 m或 30 m) 垂直拖至表层，记录其转数。 如此反复 5 次-10 次，取得平均值，再计算每转的流量，则为流量计标定 值。 此值至少需保留三位有效数字。 5. 2. 1. 6 船上设备 以下设备为船上常备设备： 绞车、吊杆及钢丝绳：绞车应配有变速(0. 3 m/s -1. 5 m/s)排缆装置和计数器的电动绞车。 若缺乏该设备，可用建筑用的升降机或手摇绞车代替。 钢线绳直径一般为 4. 8 mm左右。 吊 杆安装需高出船舷 3 m, 跨舷距约 1 m; 冲水设备：水泵、水管、水桶和吸水球（大的洗耳球）； 照明设备。 5.2.2 样品采集 5. 2. 2. 1 出海前的准备 5. 2. 2. 1. 1 按调查项目、站数、层次，准备足够的采样工具及己编号的各种标本瓶、固定剂、记录表等， 装箱上船并放于适当位置，避免撞击和丢失； 5. 2. 2. 1. 2 认真检查船上设备是否运转正常，若遇故障，应及时排除或更换； 5. 2. 2. 1. 3 配制固定制 浮游植物用殡液固定。 其配制方法是将殡片 (I2)溶于5%的碳化钾(KI)溶液中，使成饱和溶液。 需要量按每升水样加该碟液 6 mL-8 mL 准备。 浮游动物用5%甲醒固定。 不必事先配制，只须按标本瓶容量的5%左右加入甲醒溶液即可。 5.2.2.2 到站前的准备 5. 2. 2. 2. 1 采集人员应提前到达工作岗位，再次检查网具及其附件、记录表及其他有关配备是否完善， 发现问题及时处理； 5.2.2.2.2 船只到站时，应先核对站位，待船停稳后，测其实际水深，确定采样层次及钢丝绳应放长度。 5.2.2.3 采样 5. 2. 2. 3. 1 浮游植物水样采集 浮游植物水样采集应按以下要求进行： 用颠倒采水器或卡盖式采水器，其使用方法及操作步骤与水质项目采样相同； 采样层次视涸查需要、计划规定和海区各站实际水深而定； 水样采集务必与叶绿素a和水质项目的采水同步进行； 所需水样植一般为 500 mL; - 采样后，应及时按每升水样加 6 mL-8mL 殡液固定。 5.2.2.3.2 垂直拖网采样 分别用浅水I、II型浮游生物网自底至表垂直拖曳采集浮游动物。 若需网采浮游植物，则用浅水川 型网。 其操作步骤如下： 每次下网前应检查网具有否破损，发现破损应及时修补或更换网衣；检查网底管和流星计是否 处于正常状态，并把流量计指针拨至指零；放网入水，当网口贴近水面时，需调整计数器指针于 零的位置；网口入水后，下网速度一般不能超过 1 m/s, 以钢丝绳保持紧直为准；当网具接近海 底时，绞车应减速，当沉锤着底，钢丝绳出现松弛时，应立即停车，记下绳长； 网具到达海底后可立即起网，速度保持在 0. 5 m/s 左右；网口未露出水面前不可停车；网口离 uJ
开水面时应减速并及时停车，谨防网具碰刮船底或卡环碰撞滑轮，使钢丝绳绞断，网具失落；把网升至适当高度，用冲水设备自上而下反复冲洗网衣外表面（切勿使冲洗的海水进人网口），使粘附于网上的标本集中于网底管内：将网收入甲板，开启网底管活门，把标本装入标本瓶，再关闭网底管活门，用洗耳球吸水冲洗筛绢套，如此反复多次，直至残留标本全部收人标本瓶中；一按样品体积的5%，加入甲醛溶液进行固定。5.2.2.3.3分层拖网采样分层采集，应在网具上装置闭锁器，按规定层次逐一采样。操作步骤为：下网前应使网具、闭锁器、钢丝绳、拦腰绳等处于正常采样状态，下网时按垂直拖网方法；一网具降至预定采样水层下界时应立即起网，速度如垂直拖网；当网将达采样水层上界时，应减慢速度（避免停车，以防样品的外溢），提前打下使锤（提前量每10m水深约1m）；当钢丝绳出现瞬间松弛或振动时，说明网已关闭（记录此时的绳长），可适当加快起网速度直至网具露出水面：之后，将闭锁状态的网具恢复成采样状态，并按垂直拖网法冲网和收集、固定标本：一各项样品采样完毕，应及时将采样记录详细记人表A.1或表A.2。5.2.2.3.4采样结束后的工作采样后应进行以下工作：一所有样品应装入牢固的标本箱内搬运；一用过的网具、闭锁器和流量计等需用淡水冲洗，晾干后收藏；绞车、钢丝绳、计数器等需经擦试，上油保养。5.2.2.3.5注意事项采样时应注意以下事项：遇倾角超过45°时，应加重沉锤重新采样；遇网口刮船底或海底，应重新采样。5.3样品整理与分析5.3.1样品的整理5.3.1.1核对根据采样记录表，认真核对采取的全部样品，若发现不符应及时查找原因，不得任意更改原始记录。5.3.1.2编号依据海上采样记录，按序对各类样品进行总编号，并记入表A.3中。总编号力求简明，由能表示样品的采样海区，采集方式、采集网具、采集年份及标本序号的字母或代号表示，其规定如下：采集海区：用调查海区汉语拼音第一个字母表示；——【表示浅水I型浮游生物网垂直拖网样品；—Ⅱ表示浅水Ⅱ型浮游生物网垂直拖网样品；一Ⅲ表示浅水Ⅲ型浮游生物网垂直拖网样品；-L表示昼夜连续观测样品；—ch表示垂直分层采集样品：-S表示浮游植物采水样品；——年份用阿拉伯数字表示。5.3.1.3标签按以下要求对采集的样品贴标签：外标签：按总编号顺序编写，贴于各号标本瓶外，并涂腊或树脂保护；一内标签：按表4的式样（规格：4cm×2.5cm）填写，放入各标本瓶中。6
开水面时应减速并及时停车，谨防网具碰刮船底或卡环碰撞滑轮，使钢丝绳绞断，网具失落； 一把网升至适当高度，用冲水设备自上而下反复冲洗网衣外表面（切勿使冲洗的海水进入网口）， 使粘附于网上的标本集中于网底管内；将网收入甲板，开启网底管活门，把标本装入标本瓶，再 关闭网底管活门，用洗耳球吸水冲洗筛绢套，如此反复多次，直至残留标本全部收入标本瓶中； 按样品体积的 5%,加入甲醒溶液进行固定。 5.2.2.3.3 分层拖网采样 分层采集，应在网具上装置闭锁器，按规定层次逐一采样。 操作步骤为： 下网前应使网具、闭锁器、钢丝绳、拦腰绳等处于正常采样状态，下网时按垂直拖网方法； 网具降至预定采样水层下界时应立即起网，速度如垂直拖网；当网将达采样水层上界时，应减 慢速度（避免停车，以防样品的外溢），提前打下使锤（提前植每 10 m水深约 1 m); 当钢丝绳出 现瞬间松弛或振动时，说明网已关闭（记录此时的绳长），可适当加快起网速度直至网具露出水 面；之后，将闭锁状态的网具恢复成采样状态，并按垂直拖网法冲网和收集、固定标本； 各项样品采样完毕，应及时将采样记录详细记入表 A.1 或表 A. 2。 5.2.2.3.4 采样结束后的工作 采样后应进行以下工作： 一－所有样品应装入牢固的标本箱内搬运； 用过的网具、闭锁器和流械计等需用淡水冲洗，掠干后收藏； 绞车、钢丝绳、计数器等需经擦试，上油保养。 5.2.2.3.5 注意事项 采样时应注意以下事项： 一—遇倾角超过 45°时，应加重沉锤重新采样； 遇网口刮船底或海底，应重新采样。 5.3 样品整理与分析 5. 3. 1 样品的整理 5. 3. 1. 1 核对 根据采样记录表，认真核对采取的全部样品，若发现不符应及时查找原因，不得任意更改原始记录。 5. 3. 1. 2 编号 依据海上采样记录，按序对各类样品进行总编号，并记入表 A. :3中。 总编号力求简明，由能表示样 品的采样海区、采集方式、采集网具、采集年份及标本序号的字母或代号表示，其规定如下： 采集海区：用调查海区汉语拼音第一个字母表示； I 表示浅水 I 型浮游生物网垂直拖网样品； - II表示浅水II型浮游生物网垂直拖网样品； — III表示浅水III型浮游生物网垂直拖网样品； L 表示昼夜连续观测样品； ch 表示垂直分层采集样品； S表示浮游植物采水样品； － 年份用阿拉伯数字表示。 5. 3. 1. 3 标签 按以下要求对采集的样品贴标签： 外标签：按总编号顺序编写，贴于各号标本瓶外，并涂腊或树脂保护； 内标签：按表 4 的式样（规格：4 cmX2. 5 cm)填写，放入各标本瓶中。 6
表4内标签式样总编号年月日站号海上编号5.3.2浮游植物样品的处理与分析浮游植物水样的种类鉴定与计数，一般需按采样层次逐一分析。若时间不允许，在不影响计划要求前提下，可采用混合样计数，即各层取等量（50mL或100mL）混合，再按下述方法处理和分析。5.3.2.1沉降计数法5.3.2.1.1主要仪器和设备使用的主要仪器和设备如下：一倒置显微镜；=一沉降器：沉降器包括底板、沉降管、排水孔及盖玻片等。规格有5mL、10mL、20mL、50mL、100ml等不同容量。若无上述沉降器，可自己制作简易沉降器，只需取内径为25mm（外径约32mm）、高度为20.4mm的有机玻璃管粘于43mm×40mm的载玻片上即可（其容积为10mL.），可制作其他规格的简易沉降器，但使用前需对其容积和底面积进行准确标定，并逐一编号；一盖玻片；计数器。5.3.2.1.2计数每个水样取三个分样计数，取平均值。计数操作过程如下：取三个等容量的沉降器，分别注满经摇匀的水样，盖上盖玻片使不留气泡，静置24h以上。分样体积大小需视水样浑浊度和浮游植物的丰度而定；可一次性准备几个待计数的样品；-轻移上述沉降器于倒置显微镜下鉴定、计数。浮游植物数量较少时，应计全数；一若数量较大或计数微型藻类时，可于高倍镜下计算一定面积上的细胞数，再依所计面积，换算为整个底面积上的总细胞数；鉴定、计数结果记人表A.4。5.3.2.2直接计数法5.3.2.2.1主要仪器和设备仪器和设备如下：显微镜；一计数框：取0.25mm厚的盖玻片，切割成细条状（宽约2.5mm），粘贴于普通载玻片上，务使框内边长分别为50.0mm和20.0mm，亦即框内面积为1000mm2，容积为0.25ml。框内载玻片上应刻划出1mm或0.5mm等距离垂线；取样管；可直接采用0.25mL的微型注射针筒，或取2mL分析用的移液管，截去上端，磨平，并装上小橡皮球即成；盖玻片。5.3.2.2.2计数每份水样计数三个分样，取平均值。按以下步骤操作：一一将待计数水样摇匀，准确吸取0.25mL置于计数框内，盖上盖玻片使不留气泡一移计数框于显微镜下鉴定计数。通常应按序计全数，若数量大，可考虑间行计数（若水样为未加固定剂的新鲜海水，计数前应向框内喷射少许醋酸蒸汽）；7
总编号 站 号 海上编号 5. 3.2 浮游植物样品的处理与分析 表4 内标签式样 年 月 日 浮游植物水样的种类鉴定与计数，一般需按采样层次逐一分析。 若时间不允许，在不影响计划要求 前提下，可采用混合样计数，即各层取等星(50 mL或lOOmU混合，再按下述方法处理和分析。 5. 3. 2. 1 沉降计数法 5. 3. 2. 1. 1 主要仪器和设备 使用的主要仪器和设备如下： 倒置显微镜； —一沉降器：沉降器包括底板、沉降管、排水孔及盖玻片等。 规格有 5 mL、 10 mL、20 mL、50 mL、 100 mL 等不同容星。 若无上述沉降器，可自己制作简易沉降器，只需取内径为 25 mm(外径 约 32 mm)、高度为 20.4 mm的有机玻璃管粘于 43 mmX 40 mm的载玻片上即可（其容积为 10 mL), 可制作其他规格的简易沉降器，但使用前需对其容积和底面积进行准确标定，并逐一 编号； －盖玻片； -� 计数器。 5. 3. 2. 1. 2 计数 每个水样取三个分样计数，取平均值。 计数操作过程如下： 取三个等容星的沉降器，分别注满经摇匀的水样，盖上盖玻片使不留气泡，静置 24 h以上。 分 样体积大小需视水样浑浊度和浮游植物的丰度而定；可一次性准备儿个待计数的样品； 轻移上述沉降器于倒置显微镜下鉴定、计数。 浮游植物数械较少时，应计全数； 若数措较大或计数微型藻类时，可于高倍镜下计算一定面积上的细胞数，再依所计面积，换算 为整个底面积上的总细胞数； 鉴定、计数结果记入表A. 4。 5.3.2.2 直接计数法 5. 3. 2. 2. 1 主要仪器和设备 仪器和设备如下： 显微镜； -� 计数框：取 0. 25 mm厚的盖玻片，切割成细条状（宽约 2.5 mm), 粘贴于普通载玻片上，务使框 内边长分别为 50.0 mm和 20. 0 mm, 亦即框内面积为 1 000 mm2 , 容积为 0.25 mL。 框内载 玻片上应刻划出1 mm或0. 5 mm等距离垂线； 取样管；可直接采用 0. 25 mL 的微型注射针简，或取 2 mL 分析用的移液管，截去上端，磨平， 并装上小橡皮球即成； － 盖玻片。 5. 3.2.2.2 计数 每份水样计数三个分样，取平均值。 按以下步骤操作： － 将待计数水样摇匀，准确吸取0. 25 mL置于计数框内，盖上盖玻片使不留气泡； －移计数框于显微镜下鉴定计数。 通常应按序计全数，若数量大，可考虑间行计数（若水样为未 加固定剂的新鲜海水，计数前应向框内喷射少许醋酸蒸汽）； 7
一本法适于赤潮发生期间或浮游植物细胞数量达每升105个以上时的计数；-将计数结果记人表A.4中。5.3.2.3浓缩计数法5.3.2.3.1仪器设备：与直接计数法相同。5.3.2.3.2计数按以下步骤操作：将静置24h以上的水样，用包扎有JF62或JPs号筛绢的吸管，轻轻吸去上清液，使水样浓缩至10mL。浓缩时切勿搅动沉淀样品，否则需重新静置24h后再浓缩。通常一次不可能浓缩成10mL，需把浓缩到一定体积的水样移至50mL左右的指形管中，经24h以上静置后再浓缩；将浓缩后的样品全部移人已经标记10mL容积的指形管中，静置24h后，用吸管轻吸多余的清液，使液面凹处恰在标记上；计数取样时，水样务必充分摇匀，用取样管迅速吸取0.25mL于计数框内，加盖盖玻片使不留气泡。之后的计数方法与直接计数法相同。计数结果记人表A.4中；网采样品，可适当浓缩（或稀释），按本法计数。5.3.2.4计数注意事项计数过程中应注意以下事项：计数时一般以种为单位分别计数。优势种、常见种、赤潮生物种应力求鉴定到种；-一凡失去色素或不足一半的残体，不在计数之列；一胶质团大群体和浮游兰藻类等不易计数的种类，可用数量等级符号（十十十、十十、十）表示；对进人浮游生物中的底栖种类，均按细胞记数，并将它们作为单项列人浮游植物总量中：填表时，应特别注意不同计数方法的水样量、沉降量、浓缩量（或稀释量）、计数面积或计数量，并进行必要的换算。5.3.3浮游动物样品的处理与分析浮游动物样品静置沉淀后进行必要浓缩，按序分别移人已备好内外标签的标本瓶中，测定其生物量及计数。5.3.3.1湿重生物量测定5.3.3.1.1主要仪器及设备仪器及设备如下：扭力天平：感量0.01g；一真空泵：10L；—布氏漏斗；一抽滤瓶；一筛绢：JF62或JP8o；一一吸水纸；一吸管；镊子。5.3.3.1.2测定测定步骤如下：筛绢标定：将上述筛绢剪成与漏斗内径等大，浸湿后铺于漏斗中，用真空泵抽去筛绢上多余水分，称取筛绢湿重并记录于表A，5中。该标定后的筛绢可反复使用；样品测定：把标定过的筛绢铺于漏斗中，开动真空泵，倒人已剔除杂质的欲测样品；待水分滤干后关闭真空泵；小心取出带样品的筛绢放在吸水纸上，吸去多余水分；将样品（连同筛）置于扭力天平称重，并将结果填于表A.6中的相应栏目中。8
本法适于赤潮发生期间或浮游植物细胞数量达每升 105 个以上时的计数； 将计数结果记入表A.4中。 5.3.2.3 浓缩计数法 5. 3. 2. 3. 1 仪器设备：与直接计数法相同。 5.3.2.3.2 计数 按以下步骤操作： 将静置24h以上的水样，用包扎有 JF62或 JPso号筛绢的吸管，轻轻吸去上清液，使水样浓缩至 10 mL。 浓缩时切勿搅动沉淀样品，否则需重新静置24 h 后再浓缩。 通常一次不可能浓缩成 10 mL, 需把浓缩到一定体积的水样移至 50 mL左右的指形管中，经24h 以上静置后再浓缩； 将浓缩后的样品全部移入已经标记 10 mL容积的指形管中，静置24 h后，用吸管轻吸多余的 清液，使液面凹处恰在标记上； 计数取样时，水样务必充分摇匀，用取样管迅速吸取 0.25 mL 于计数框内，加盖盖玻片使不留 气泡。 之后的计数方法与直接计数法相同。 计数结果记入表A.4中； 网采样品，可适当浓缩（或稀释），按本法计数。 5.3.2.4 计数注意事项 计数过程中应注意以下事项： 计数时一般以种为单位分别计数。 优势种、常见种、赤潮生物种应力求鉴定到种； — —凡失去色素或不足一半的残体，不在计数之列； 胶质团大群体和浮游兰藻类等不易计数的种类，可用数量等级符号（＋＋＋、＋＋、十）表示； 对进入浮游生物中的底栖种类，均按细胞记数，并将它们作为单项列入浮游植物总量中； 填表时，应特别注意不同计数方法的水样量、沉降量、浓缩量（或稀释量）、计数面积或计数量， 并进行必要的换算。 5.3.3 浮游动物样品的处理与分析 浮游动物样品静置沉淀后进行必要浓缩，按序分别移入已备好内外标签的标本瓶中，测定其生物量 及计数。 5. 3. 3. 1 湿重生物量测定 5. 3. 3. 1. 1 主要仪器及设备 仪器及设备如下： 扭力天平：感量 o. 01 g; 一 一真空泵：10 L; 布氏漏斗； 抽滤瓶； 筛绢：J贮或 JPso; 吸水纸； 吸管； 摄子。 5. 3. 3. 1. 2 测定 测定步骤如下： 8 — —筛绢标定：将上述筛绢剪成与漏斗内径等大，浸湿后铺于漏斗中，用真空泵抽去筛绢上多余水 分，称取筛绢湿重并记录于表A. 5中。 该标定后的筛绢可反复使用； 样品测定：把标定过的筛绢铺于漏斗中，开动真空泵，倒入已剔除杂质的欲测样品；待水分滤于 后关闭真空泵；小心取出带样品的筛绢放在吸水纸上，吸去多余水分；将样品（连同筛绢）置于 扭力天平称重，并将结果填于表A. 6中的相应栏目中