体外培养根本原则是模拟体内的生长条件(1)生长环境(PH值、温度等)恒定的温度:36.5℃C±0.5最适PH:7.2-7.4(2)营养供给培养基,培养液(3)无菌环境(无菌操作)C
体外培养根本原则是模拟体内的生长条件: 恒定的温度:36.5℃±0.5℃ 最适PH:7.2-7.4 (2)营养供给 培养基,培养液 (1)生长环境 (PH值、温度等) (3)无菌环境(无菌操作)
第一节动物细胞培养实验室及仪器设备
第一节 动物细胞培养实验室及仪器设备
1.基础实验室设计上的共同原则:无菌操作。基本操作区:洗涤区,灭菌区,储藏区,培养基配制区无菌操作室:缓冲准备室,接种室:培养室:恒温培养箱,培养架,摇床,倒置显微镜,等仪器。鉴定分析室:
1.基础实验室 设计上的共同原则:无菌操作。 基本操作区:洗涤区,灭菌区,储藏区,培养基配制区; 无菌操作室:缓冲准备室 ,接种室; 培 养 室:恒温培养箱,培养架,摇床, 鉴定分析室:倒置显微镜,等仪器
无菌操作台区接种复缓冲准
缓冲准 备区 接种 区 无菌操作台
操作室的级别NK美国联邦标准(USAFederalStandard)空气中微粒的洁净等级对照空气微粒洁净等级(每立方米,每立方英尺)微粒的最大浓度限值ISO14644-1FEDSTD209ECLASSNumberofParCubicMeterbyMicrometerSize0.2um0.3um0.5um0.5umIsoClassEnglishMetric0.1um5umm3m3m3f3m321ISO1102104IS021002631M1.51,000265106351S03410M2.510353IS0410.0002.6501.060295(百级)100M3.5IS0526,50010.6001003.530100.0006(千级)1,000M4.5IS06100035,3002931,000.000265.000106.0007万级)10,000M5.5IS0710000353.0002.9308(十万级)100.000M6.5IS081000003.530.00029.3009IS09293.000100000035.300.000
操作室的级别 • 无菌室:以控制生物细菌等为目的,细菌的直径一般在5微米以上。 • 洁净室:室内悬浮粒子浓度受控的环境,24 ℃ ,60%湿度, 百 万级、万级、千级、百级等。 • 使用高效空气过滤器达到无菌的目的,粒径以0.5微米的标尺。 • 无菌室:以控制细菌等为目的的,级别也和洁净室相同, • 主要需要检测浮游菌、沉降菌等菌落数。 • 要求:不宜过大,封闭性好,干燥清洁,对微生物污染有可控性