烟草幼苗的组织培养自的与要求掌握植物组织培养中无菌操作技术学习用生长调节剂对植物器官发生的诱导方法
烟草幼苗的组织培养 一、目的与要求 掌握植物组织培养中无菌操作技术 学习用生长调节剂对植物器官发生的诱导方法
实验原理二、 组织、器植物组织培养在无菌条件下，将植物体的一部分细胞、组织、器官，官切割下来，接种到营养介质上，使其增殖成一群细胞、甚至完整植物体的实验技术植物细胞全能性植物体的每个活细胞都有相同的遗传组成，在适当条件下具有繁殖出完整植株的能力脱分化已经分化的细胞，发生生理、生化的改变，退回到胚性细胞的过程。再分化经过退分化的细胞或组织再次获得分化成不同功能的细胞、组织、器官或完整植物体。改变生长素NAA和细胞分裂素6-BA浓度比例，可以决定烟草幼苗从叶片直接分化生成根或芽2，4-D能够诱导生成愈伤组织
二、 实验原理 植物组织培养 在无菌条件下，将植物体的一部分细胞、组织、器 官切割下来，接种到营养介质上，使其增殖成一群细胞、组织、器官， 甚至完整植物体的实验技术。 植物细胞全能性 植物体的每个活细胞都有相同的遗传组成，在适 当条件下具有繁殖出完整植株的能力。 脱分化 已经分化的细胞，发生生理、生化的改变，退回到胚性 细胞的过程。 再分化 经过退分化的细胞或组织再次获得分化成不同功能的细 胞、组织、器官或完整植物体。 改变生长素NAA和细胞分裂素6-BA浓度比例，可以决定烟草幼苗从 叶片直接分化生成根或芽。 2，4-D能够诱导生成愈伤组织
三、材料和用具材料：烟草幼苗器具：超净工作台高压灭菌锅光照培养箱三角烧瓶等试剂：MS培养基wwwensy.comNAA6-BA2, 4-D
三、材料和用具 材料：烟草幼苗 器具：超净工作台 高压灭菌锅 光照培养箱 三角烧瓶等 试剂：MS培养基 NAA 6-BA 2，4-D
诱导培养基配制用量成分终浓度要求大量元素10%(10X)蒸馏水（3/4总体积）1%微量元素（100×）1%有机成分(100X)1%铁盐（100×）蔗糖3%加蒸馏水粗略定容3个实验组激素(0.1mg/ml)调pH5.8分30ml/瓶（组号、激素比例）琼脂0.8%10
诱导培养基配制 成 分 终 浓度要求 用 量 ① 大量元素（10×） 10% ② 蒸馏水（3/4总体积） ③ 微量元素（100× ） 1% ④ 有机成分（100×） 1% ⑤ 铁盐（ 100×） 1% ⑥ 蔗糖 3% ⑦ 加蒸馏水粗略定容 ⑧ 激素(0.1mg/ml) 3个实验组 ⑨ 调pH 分 30ml/瓶（组号、激素比例） 5.8 ⑩ 琼脂 0.8%
500mlStep1：配大瓶培养基（无激素）Step2：分瓶，加激素125ml调PH=5.8ctrl2,4-DNAA:6-BA=1:5NAA:6-BA=5:1Step3:分装，加琼脂30ml
500 ml 125ml 30ml Step1: 配大瓶培养基(无激素) Step 2: 分瓶,加激素, 调PH=5.8 Step 3:分装,加琼脂 ctrl NAA:6-BA=1:5 NAA:6-BA=5:1 2,4-D