实验二 细菌的抹片制备及染色 刘广锦 2025年6月10日
刘广锦 2025年6月10日
一、目的要求1.掌握细菌抹片的制备方法和无菌操作技术，2.掌握几种常用的染色方法和技术·3.巩固显微镜的使用，了解细菌的染色特性、形态
一、目的要求 1. 掌握细菌抹片的制备方法和无菌操作技术 2. 掌握几种常用的染色方法和技术 3. 巩固显微镜的使用，了解细菌的染色特性、形态
二、材料1、大肠杆菌与金黄色葡萄球菌：液体枯草芽孢杆菌：斜面（固体） 2、革兰染色液，生理盐水·3、载玻片、接种棒、酒精灯等
二、材料 1、大肠杆菌与金黄色葡萄球菌：液体 枯草芽孢杆菌：斜面（固体） 2、革兰染色液，生理盐水 3、载玻片、接种棒、酒精灯等
三、制片及染色步骤·取干净玻片-抹片-干燥-固定-染色-干燥镜检抹片固定自然干燥水洗、干燥镜检染色
三、制片及染色步骤 取干净玻片-抹片-干燥-固定-染色-干燥镜检 抹片 自然干燥 固定 染色 水洗、干燥 镜检
1 玻片的处理：玻片应清晰透明、洁净而无油渍旧玻片有油，可用95%酒精擦洗，然后在酒精灯上灼烧。2.细菌抹片的制备：根据所用材料不同，抹片的方法也有差异。（可用记号笔在玻片背面圈出涂抹区域）（1）固体培养物用经酒精灯火焰烧过的接种环，蘸取生理盐水1-2环于清洁无油脂的载玻片中央，再经酒精灯火焰烧过的接种环勾取细菌的固体培养物少许混于生理盐水中，涂抹成直径为1-1.5cm大小圆，均匀的抹片。也可直接刮取菌落涂在玻片上（2）液体培养物可直接用酒精灯火焰烧过的接种环勾取细菌培养物1-2环，涂抹于玻片上即可。但要注意将管底沉淀物摇匀，以免影响涂片效果。涂抹后的接种环，酒精灯火焰烧过，充分灭菌
1. 玻片的处理： 玻片应清晰透明、洁净而无油渍； 旧玻片有油，可用95%酒精擦洗，然后在酒精灯上灼烧。 2. 细菌抹片的制备： 根据所用材料不同，抹片的方法也有差异。 (可用记号笔在玻片背面圈出涂抹区域) （1）固体培养物 用经酒精灯火焰烧过的接种环，蘸取生理盐水1-2环于清洁无油脂 的载玻片中央，再经酒精灯火焰烧过的接种环勾取细菌的固体培养物 少许混于生理盐水中，涂抹成直径为1-1.5cm大小圆，均匀的抹片。也 可直接刮取菌落涂在玻片上 （2）液体培养物 可直接用酒精灯火焰烧过的接种环勾取细菌培养物1-2环，涂抹于 玻片上即可。但要注意将管底沉淀物摇匀，以免影响涂片效果。 涂抹后的接种环，酒精灯火焰烧过，充分灭菌