上游充通大学 SHANGHAI JIAO TONG UNIVERSITY 探索微观物质世界 第十一讲扫描电子显微镜技术 饶群力 上海交通大学 六 漏 分析测试中心 v 令 SHANG 1日G ERSI
探索微观物质世界 第十一讲 扫描电子显微镜技术 饶群力 上海交通大学 分析测试中心
上游充大学 激光共聚焦扫描显微镜 SHANGHAI JIAO TONG UNIVERSITY 先有普通型显微镜，后有扫描型显微镜，例如激 光共聚焦扫描显微镜 )首先有赖于激光的发现 ©1957年，美国麻省理工学院的Marvin Lee Minsky提出共聚焦显微镜的构想 ©将激光技术和扫描技术结合，产生共聚焦激光扫 描显微镜，实现三维立体观测
激光共聚焦扫描显微镜 先有普通型显微镜，后有扫描型显微镜，例如激 光共聚焦扫描显微镜 首先有赖于激光的发现 1957年，美国麻省理工学院的Marvin Lee Minsky提出共聚焦显微镜的构想 将激光技术和扫描技术结合，产生共聚焦激光扫 描显微镜，实现三维立体观测
上游充通大兽 工作原理 SHANGHAI JIAO TONG UNIVERSITY 二十世纪八十年代这项 基本原理 技术逐渐成熟并开始商 激光器 品化。 显微镜系统、激光照射系统、 扫描及检测系统、计算机及 共焦针孔 图像采集分析系统 点光源照明，在影像记录仪 前的光学共焦面位置上放一 个针孔，让那些离焦光被滤 检测器 除，从而提高了图像清晰度 物镜 物体在焦面内 物体在焦面外
工作原理 二十世纪八十年代这项 技术逐渐成熟并开始商 品化。 显微镜系统、激光照射系统、 扫描及检测系统、计算机及 图像采集分析系统 点光源照明，在影像记录仪 前的光学共焦面位置上放一 个针孔，让那些离焦光被滤 除，从而提高了图像清晰度
上游充通大学 激光扫描共聚焦显微镜 SHANGHAI JIAO TONG UNIVERSITY 用激光作扫描光源，逐点、逐行、逐面快速扫描 成像。 由于激光束的波长较短，光束很细，所以共焦激 光扫描显微镜有较高的分辨力，大约是普通光学 显微镜的3倍。 激光可以聚焦在不同的深度。系统经一次调焦， 扫描限制在样品的一个平面内。 主要用途：1.细胞及生物荧光样品观察分析。 2.绿荧光蛋白分析。3.荧光原位杂交分析。 4.光切片扫描。5.3D图像处理。6.时间序列 拍摄成像
激光扫描共聚焦显微镜 用激光作扫描光源，逐点、逐行、逐面快速扫描 成像。 由于激光束的波长较短，光束很细，所以共焦激 光扫描显微镜有较高的分辨力，大约是普通光学 显微镜的3倍。 激光可以聚焦在不同的深度。系统经一次调焦， 扫描限制在样品的一个平面内。 主要用途： 1．细胞及生物荧光样品观察分析。 2．绿荧光蛋白分析。 3．荧光原位杂交分析。 4．光切片扫描。 5．3D图像处理。6. 时间序列 拍摄成像
上游充通大警 扫描电子显微镜的发明 SHANGHAI JIAO TONG UNIVERSITY ©扫描型显微镜的设计原理是：采用聚焦得非常细 的电子束作为照明源（激发源），以光栅状扫描方 式照射到被观察的试样上，通过入射电子与物质 相互作用产生各种信号。 借助这种理念，采用电子束作光源 公认扫描电镜的概念最早是由德国的Knoll在 1935年提出来的 1938年Von Ardenne在透射电镜上加了个扫描线 圈做出了扫描透射显微镜(STEM)
扫描电子显微镜的发明 扫描型显微镜的设计原理是：采用聚焦得非常细 的电子束作为照明源(激发源)，以光栅状扫描方 式照射到被观察的试样上，通过入射电子与物质 相互作用产生各种信号。 借助这种理念，采用电子束作光源 公认扫描电镜的概念最早是由德国的Knoll在 1935年提出来的 1938年Von Ardenne在透射电镜上加了个扫描线 圈做出了扫描透射显微镜 (STEM)