5、洗涤检验 ■种子表面病菌孢子或颖壳上的病原线虫 ■取样，洗涤，振荡，离心，悬浮 ■培养皿计数法 血球计计数法：80小格求平均数 ■每粒种子的孢子数=1ml中孢子数÷100 ■重复次数
5、洗涤检验 ◼ 种子表面病菌孢子或颖壳上的病原线虫 ◼ 取样，洗涤，振荡，离心，悬浮 ◼ 培养皿计数法 ◼ 血球计计数法：80小格求平均数 ◼ 每粒种子的孢子数=1ml中孢子数÷100 ◼ 重复次数
5、洗涤检验（续) ■培养皿法：N2=N1X（R2R1)2 R视野半径，R2培养皿半径，N视野中孢子数，N2 培养皿中孢子数 ·影响检验结果的因素：表面附着的孢子不一定能洗 下来；悬浮液不能完全悬浮或管壁留有孢子；采用 计数计法，视野间孢子分布不均匀
5、洗涤检验（续） ◼ 培养皿法：N2=N1×（R2 /R1）2 ◼ R1视野半径，R2培养皿半径，N1视野中孢子数，N2 培养皿中孢子数 ◼ 影响检验结果的因素：表面附着的孢子不一定能洗 下来；悬浮液不能完全悬浮或管壁留有孢子；采用 计数计法，视野间孢子分布不均匀
6、漏斗分离检验 ■种子携带线虫的较好方法。 ■水稻干尖线虫；土壤中线虫；活动性较大线虫 (茎线虫，根结线虫，胞囊线虫) ■具体方法（贝尔曼漏斗法）
6、漏斗分离检验 ◼ 种子携带线虫的较好方法。 ◼ 水稻干尖线虫；土壤中线虫；活动性较大线虫 （茎线虫，根结线虫，胞囊线虫） ◼ 具体方法（贝尔曼漏斗法）
7、保湿萌芽检验 种子携带病菌在种子萌芽阶段开始为害，萌发期或幼 苗早期表现症状，或种子未萌芽，种表长出病菌 带菌情况，发芽情况，种内情况（种表消毒) ■1)保湿培养检验（吸水纸，冷冻吸水纸，琼脂平皿法） ·2)砂内萌芽检验法 ■3)土内萌芽检验法 ·4)试管幼苗症状测定法
7、保湿萌芽检验 ◼ 种子携带病菌在种子萌芽阶段开始为害，萌发期或幼 苗早期表现症状，或种子未萌芽，种表长出病菌 ◼ 带菌情况，发芽情况，种内情况（种表消毒） ◼ 1）保湿培养检验（吸水纸，冷冻吸水纸，琼脂平皿法） ◼ 2）砂内萌芽检验法 ◼ 3）土内萌芽检验法 ◼ 4）试管幼苗症状测定法
1)保湿培养检验 吸水纸法 ■吸水纸吸足无菌水，放入培养皿 ■种子排放在吸水纸上，1.0-1.5厘米 20-28℃培养，12小时光照/黑暗 ■有时加入0.1-0.2%的2,4-D溶液代替水 ■优点：应用广，操作方便 ■缺点：真菌不易旺盛长出菌丝和孢子，被掩盖 ■冷冻吸水纸法：10℃3天，20℃2天，-20℃冷冻过夜，20℃12 小时光照/黑暗，形成孢子，避免伸长 ■琼脂平皿法：1.5-1.7%的琼脂液，含水量均一
1）保湿培养检验——吸水纸法 ◼ 吸水纸吸足无菌水，放入培养皿 ◼ 种子排放在吸水纸上，1.0-1.5厘米 ◼ 20-28℃培养，12小时光照/黑暗 ◼ 有时加入0.1-0.2%的2，4-D溶液代替水 ◼ 优点：应用广，操作方便 ◼ 缺点：真菌不易旺盛长出菌丝和孢子，被掩盖 ◼ 冷冻吸水纸法：10℃3天，20℃2天，-20℃冷冻过夜，20℃12 小时光照/黑暗，形成孢子，避免伸长 ◼ 琼脂平皿法：1.5-1.7%的琼脂液，含水量均一