二、蛋白质顺序分析 anger测定多肽顺序的方法 蛋白质指纹( fingerprints):蛋白质经水解后形成较小 的片段,经层析法分离和染色后,不同大小的片段以特 定的位置出现。不同的水解酶作用后产生不同的指纹 Sanger证明:某一特定蛋白质的氨基酸顺序是特异性的 The amino-acid sequence is what makes insulin Insulin
二、蛋白质顺序分析 Sanger测定多肽顺序的方法： 蛋白质指纹（fingerprints）：蛋白质经水解后形成较小 的片段，经层析法分离和染色后，不同大小的片段以特 定的位置出现。不同的水解酶作用后产生不同的指纹。 Sanger证明：某一特定蛋白质的氨基酸顺序是特异性的 “The amino-acid sequence is what makes insulin insulin
、基因突变与蛋白质变化的关系 1957年,Ⅴ arnon Ingram对正常人的HbA和镰形细胞贫血症的 基因突变纯合体的HbS作比较研究 正常人的血红蛋白( hemoglobin,Hb)由两条链和两条β链 组成,0链有141个a,β链有146个a。HbA和HbS的指纹只有 个位置上有区别,进一步对不同指纹部位作序列分析发现只 有一个aa的差异 1234567 正常HbA:缬组一亮一苏一脯一谷—谷 镰形HbA:缬_组—亮—苏—脯—缬一谷-
三、基因突变与蛋白质变化的关系 1957年，Vernon Ingram对正常人的HbA和镰形细胞贫血症的 基因突变纯合体的HbS作比较研究。 正常人的血红蛋白（hemoglobin, Hb）由两条α链和两条β链 组成，α链有141个aa，β链有146个aa。HbA和HbS的指纹只有 一个位置上有区别，进一步对不同指纹部位作序列分析发现只 有一个aa的差异： 1 2 3 4 5 6 7 …… 正常HbA：缬—组—亮—苏—脯—谷—谷——…… 镰形HbA：缬—组—亮—苏—脯—缬—谷——……
(b) 正常红细胞 镰形红细胞 A comparison of erythrocytes from normal (a) and from individuals with sickle-cell anemia(b)
A comparison of erythrocytes from normal (a) and from individuals with sickle-cell anemia (b). 正常红细胞 镰形红细胞
(a) Anode (+ Starch Gel Electrophoresis Migration Origin Origin AA AS ss Cathode ( Fingerprints of peptide fragments (b) Altered 石 tide Normal HbA Sickle-cell hbs (c) NHz-val-his-leu-thr-pro-glu-glu-COOH NHz val-his -leul-thr-pro-val-gle COOH #6 Partial amino acid sequences of beta chains Investigation of hemoglobin derived from hbahba and hbsHbs individuals using electrophoresis, fingerprinting, and amino acid analysis
Investigation of hemoglobin derived from HbAHbA and HbSHbS . individuals using electrophoresis, fingerprinting, and amino acid analysis
结论:在β链上第6位的缬氨酸代替了正 常的谷氨酸,从而造成缺陷性血红蛋白 Ingram的研究结果说明:通过遗传分析确 定的基因突变可以与一个蛋白质的aa顺序 的变化相连系,基因决定蛋白质的一级结 构顺序
结论：在β链上第6位的缬氨酸代替了正 常的谷氨酸，从而造成缺陷性血红蛋白。 Ingram的研究结果说明：通过遗传分析确 定的基因突变可以与一个蛋白质的aa顺序 的变化相连系，基因决定蛋白质的一级结 构顺序