化学分析方法。 (3)说明与讨论 ①样品处理同铁氧化御法第一法。 ②本法对滴定操作条件要求很严，要求在低压电炉上将铁氰化钾溶液加热至沸，准确沸腾1m,趁沸 迅速用样液滴定至蓝色消失，这样终点易判断，误差小，重现性好。另外，锥形瓶规格，加热电炉功率 滴定速度，预加入大致体积，终点的确定方法等都尽量一致。并将滴定所需体积的绝大部分先加入碱性酒 石酸铜溶液中共沸，使其充分反应，仅留0.5mL左右进行滴定，并判断终点，以减少因滴定操作带来的误 差，提高测定精度。 ③滴定时不能随意摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶从热源上取下来滴定，以防止空气进入反应溶液中 )碘量法 1.原理 含有游离醛基的糖（葡萄糖）和半缩醛羟基的糖（乳糖、麦芽糖），于碱性溶液中在碘的作用下，可 被氧化为相应的一元酸。反应式如下： CHOH CH2O (CHOH)+I+NaOH- CHOH)+2NaI+2H CHO COOH 由于加入的碘与氢氧化钠都是过量的，两者作用生成次碘酸钠残留在反应液中，当加入盐酸使反应液 呈酸性时析出碘： 以过量的)+2NaOH→NaOI+WaI+H,0 NaOI+NaI+2HC1-2NaCL+HO+I 用硫代硫酸钠标准溶液滴定析出的碘量，可计算出糖氧化时所消耗的碘量。反应式如下： 1+2Na2SOg-2Na HNa2S.Os 根据上述反应方程式，可以由消耗的碘量求出醛糖的量。 在一定范围内，上述反应是完全按化学反应式来定量的，因此，可以利用化学反应式进行定量计算， 而不用经验检索表。从反应式可计算出1mmol碘相当于葡萄糖180mg:麦芽糖342mg:乳糖360mg。 2话用范围和特点 本法可用于醛糖和酮糖共存时单独测定醛糖，适用于各类食品，如硬糖、异构糖、果汁等样品中葡萄 糖量。详见黄伟坤等编，《食品检验与分析》，2000年。 3,说明与讨论 (1)碘量法自1918年创始以米，已经历了多次改良，主要在碱性试剂的选择、反应体系的碱度、反 应温度等方面进行了改进。其目的：一是防止雨糖的氧化，降低共存的嗣糖的影响：二是使碱性条件下醛 糖与碘的反应完全按反应式进行，以便于计算。例如用弱碱性的碳酸钠代替氢氧化钠，以降低反应体系的 碱度，在20℃ 温条件下进行。实验证明 比条件下有2倍的果糖共存时，对葡萄糖的测定影响很小。 因此本法常用于样品中有果糖存在时葡萄糖含最的测定。 (2)样品中含有乙醇、丙酮等成分时，因为它们也会消耗碘，影响测定，故应除去。 (3)碘量法分为常量法和微量法，主要差别在于测定时样液用量、试剂浓度及用量不同，常量法用 样液量20一25mL,样液含醛糖0.02%~0.45%：微量法用样液量5mL,检出量为0.25~1mg (4)此法配合直接滴定 用于葡萄糖和果糖共存时果糖的测定 先用碘的碱性溶液把葡萄糖氧 化，过量的碘用硫代硫酸钠液滴定除去，然后再用直接滴定法测定果糖的含量。 (四)其他方法 1酚-硫酸法 (1)原理
化学分析方法。 （3）说明与讨论 ①样品处理同铁氰化钾法第一法。 ②本法对滴定操作条件要求很严，要求在低压电炉上将铁氰化钾溶液加热至沸，准确沸腾 1min，趁沸 迅速用样液滴定至蓝色消失，这样终点易判断，误差小，重现性好。另外，锥形瓶规格，加热电炉功率， 滴定速度，预加入大致体积，终点的确定方法等都尽量一致。并将滴定所需体积的绝大部分先加入碱性酒 石酸铜溶液中共沸，使其充分反应，仅留 0.5mL 左右进行滴定，并判断终点，以减少因滴定操作带来的误 差，提高测定精度。 ③滴定时不能随意摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶从热源上取下来滴定，以防止空气进入反应溶液中。 （三）碘量法 1.原理 含有游离醛基的糖（葡萄糖）和半缩醛羟基的糖（乳糖、麦芽糖），于碱性溶液中在碘的作用下，可 被氧化为相应的一元酸。反应式如下： 由于加入的碘与氢氧化钠都是过量的，两者作用生成次碘酸钠残留在反应液中，当加入盐酸使反应液 呈酸性时析出碘： 用硫代硫酸钠标准溶液滴定析出的碘量，可计算出糖氧化时所消耗的碘量。反应式如下： 根据上述反应方程式，可以由消耗的碘量求出醛糖的量。 在一定范围内，上述反应是完全按化学反应式来定量的，因此，可以利用化学反应式进行定量计算， 而不用经验检索表。从反应式可计算出 1mmol 碘相当于葡萄糖 180mg；麦芽糖 342 mg；乳糖 360 mg。 2.适用范围和特点 本法可用于醛糖和酮糖共存时单独测定醛糖，适用于各类食品，如硬糖、异构糖、果汁等样品中葡萄 糖量。详见黄伟坤等编，《食品检验与分析》，2000 年。 3.说明与讨论 （1）碘量法自 1918 年创始以来，已经历了多次改良，主要在碱性试剂的选择、反应体系的碱度、反 应温度等方面进行了改进。其目的：一是防止酮糖的氧化，降低共存的酮糖的影响；二是使碱性条件下醛 糖与碘的反应完全按反应式进行，以便于计算。例如用弱碱性的碳酸钠代替氢氧化钠，以降低反应体系的 碱度，在 20℃恒温条件下进行。实验证明，在此条件下有 2 倍的果糖共存时，对葡萄糖的测定影响很小。 因此本法常用于样品中有果糖存在时葡萄糖含量的测定。 （2）样品中含有乙醇、丙酮等成分时，因为它们也会消耗碘，影响测定，故应除去。 （3）碘量法分为常量法和微量法，主要差别在于测定时样液用量、试剂浓度及用量不同，常量法用 样液量 20～25mL， 样液含醛糖 0.02％～0.45%；微量法用样液量 5mL，检出量为 0.25～1mg。 （4）此法配合直接滴定法，可用于葡萄糖和果糖共存时果糖的测定。先用碘的碱性溶液把葡萄糖氧 化，过量的碘用硫代硫酸钠液滴定除去，然后再用直接滴定法测定果糖的含量。 （四）其他方法 1.酚-硫酸法 （1）原理
糖类物质与浓硫酸作用脱水，生成糠醛或糠醛衍生物。反应式如下： C5HO- 厂H0.6-cm0+8H0 0 薇醛 C6H206→ 。c0+0 HC- G HO-CH2 羟甲基数醛 糠醛或糠醛衍生物与苯酚溶液反应，生成黄至橙色化合物，在一定范围内，吸收值与糖含量呈线性关 系。因此可比色测定。 (2)适用范围及特点 此法简单、快谏、灵敏、重现性好。颈色持久，对每种糖仅需制作一条标准曲线。最低拾出量为10如 误差为2% ~5%。适用于各类食品中还原糖的测定 尤其是层析法分离洗涤之后的样品中糖的测定。但由 于浓硫酸可水解多糖和糖苷，注意避免这方面的干扰。 (3)说明与讨论 由于不同的糖类能得到不同的的色洋，可制成对应的各类糖的标准曲线，借此测定样品中的糖。己糖 及其甲基化衍生物在490nm下比色测定：戊糖、糠醛酸及其甲基化衍生物在480nm下比色测定。 2.3,5二硝基水杨酸(DNS)比色法 (1)原理 在氢氧化钠和丙三醇存在下，还原糖能将3,5.二硝基水杨酸中的硝基还原为氨基，生成氨基化合物。 反应式如下： HO NO, HO NH H00C《+还原糖+H0oC NO 1N02 (DNS) (3-氨基- 黄色 徐塑营水扬酸) 此化合物在过量的氢氧化钠碱性溶液中呈桔红色，在540m波长处有最大吸收，其吸光度与还原糖含 量有线性关系 (2)适用范围及特点 此法适用于各类食品中还原糖的测定，相对误差为2.2%，具有准确度高、重现性好、操作简便、快 速等优点，分析结果与直接滴定法基本一致。尤其适用于大批样品的测定。 (3)说明与论 ①水杨酸比色法自1922年由大科利特戈弗提出后，经多次对3,5 二硝基水杨酸试剂的组成和配制比 例进行改进，提高了试剂的稳定性、灵敏度和分析的准确度。目前普遍认可的配制方法是：称取6.5g3, 5-二硝基水杨酸溶于少量水中，移入1000mL容量瓶中，加入2molL氢氧化钠溶液325mL,再加入45g 丙三醇.摇匀，冷却后定容到1000mL。 ②若样品显酸性，可加入2%氢氧化钠溶液调至中性。 ③显色试剂不能放置过久，否则标准曲线变动 3.半胱氨酸-咔唑法 (1)原理 单糖与强酸反应生成糠醛或其衍生物，再与显色剂半胱氨酸及咔唑缩合成有色络合物，此络合物在 S60nm处有最大吸收，可以比色测定。 (2)话用节围及特占
糖类物质与浓硫酸作用脱水，生成糠醛或糠醛衍生物。反应式如下： 糠醛或糠醛衍生物与苯酚溶液反应，生成黄至橙色化合物，在一定范围内，吸收值与糖含量呈线性关 系，因此可比色测定。 （2）适用范围及特点 此法简单、快速、灵敏、重现性好，颜色持久，对每种糖仅需制作一条标准曲线。最低检出量为 10µg， 误差为 2％～5%。适用于各类食品中还原糖的测定，尤其是层析法分离洗涤之后的样品中糖的测定。但由 于浓硫酸可水解多糖和糖苷，注意避免这方面的干扰。 （3）说明与讨论 由于不同的糖类能得到不同的的色泽，可制成对应的各类糖的标准曲线，借此测定样品中的糖。己糖 及其甲基化衍生物在 490nm 下比色测定；戊糖、糠醛酸及其甲基化衍生物在 480nm 下比色测定。 2. 3，5-二硝基水杨酸（DNS）比色法 （1）原理 在氢氧化钠和丙三醇存在下，还原糖能将 3，5-二硝基水杨酸中的硝基还原为氨基，生成氨基化合物。 反应式如下： 此化合物在过量的氢氧化钠碱性溶液中呈桔红色，在 540nm 波长处有最大吸收，其吸光度与还原糖含 量有线性关系。 （2）适用范围及特点 此法适用于各类食品中还原糖的测定，相对误差为 2.2％，具有准确度高、重现性好、操作简便、快 速等优点，分析结果与直接滴定法基本一致。尤其适用于大批样品的测定。 （3）说明与讨论 ①水杨酸比色法自 1922 年由大科利特戈弗提出后，经多次对 3，5-二硝基水杨酸试剂的组成和配制比 例进行改进，提高了试剂的稳定性、灵敏度和分析的准确度。目前普遍认可的配制方法是：称取 6.5g 3， 5-二硝基水杨酸溶于少量水中，移入 1000mL 容量瓶中，加入 2mol/L 氢氧化钠溶液 325mL，再加入 45g 丙三醇，摇匀，冷却后定容到 1000mL。 ②若样品显酸性，可加入 2%氢氧化钠溶液调至中性。 ③显色试剂不能放置过久，否则标准曲线变动。 3.半胱氨酸-咔唑法 （1）原理 单糖与强酸反应生成糠醛或其衍生物，再与显色剂半胱氨酸及咔唑缩合成有色络合物，此络合物在 560nm 处有最大吸收，可以比色测定。 （2）适用范围及特点
本法是微量法，适用于葡萄糖和果糖共存时果糖的测定。显色剂半胱氨酸和咔唑可与所有糖类反应， 但果糖发色程度远远超过葡萄糖，即使葡萄糖含量高于果糖1倍，对测定结果影响也不大，因蔗糖在此测 定条件下会水解，增加果糖含量，故此法不能用于有藏糖共存的样品测定。 (3)说明 样品处理液含酮糖控制在5~50gmL,用亚铁氰化钾和硫酸锌溶液澄清样品。测定时必须将样品处 理液置于冰水浴中，缓缓加入硫酸溶液。冷却后再加入咔唑乙醇溶液，在40℃水浴中加热30min,冷却后 测定吸光度。详见GB/T16285-1996。 4旋光法ICUMSA) (1)原理 葡萄糖、果糖、麦芽糖及乳糖等还原糖分子中具有不对称碳原子，故有旋光性。用旋光仪测定旋光度， 在一定的条件下，旋光度的大小与试样中这些还原糖含量呈线性关系。 (2)话用范用及特点 该法简单、快速，在制糖、食品、发酵厂和一些检验部门，常用于商品葡萄糖、果糖、麦芽糖等的测 定。但被测糖溶液中常含有其它的糖和电解质等光学活性物质，将影响被测物质旋光度的大小，因此本法 适合于纯度较高的糖溶液的测定。 (3)说明与讨论 ①由于简萄糖等在溶解之后，常发生变旋作用。因此用旋光法测定这些糖时，宜放置过夜再测定。若 需立即测定，可将糖液调为中性加热至沸，或加几滴氨水后再定容。 ②本法活用于浅色和低浊度的糖液测定，若糖液颜色太深或混浊度太高，不能直接测定旋光度值，需 要用中性醋酸铅澄清 ③用待测溶液将旋光管至少冲洗2次，并将溶液装满观测管，注意不使观测管内夹带空气泡。将帽盖 旋紧于旋光管上，但仅须旋至防止溶液漏出的程度，过紧可能使盖玻璃变形并产生光学活性。并尽量少用 手接触旋光管。 ④ICUMSA法规定旋光度的标准温度为20.0℃，因此测定旋光度的待测液及仪器的温度应保持在20.0 +01 5.酶-比色法 (1)原理 葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧条件下，催化B-D-葡萄糖（葡萄糖水溶液状态）氧化，生成D葡萄糖 酸.-内酯和过氧化氢，受过氧化物酶(POD)催化，过氧化氢与4氨基安替比林和苯酚生成红色醌亚胺。 CHuD.+O.oC.H.O+HD, H.O+CoH,O H+.NO+H0 在波长505m处测定醌亚胺的吸光度，可计算出食品中葡萄糖的含量。计算公式如下： Y=- C 1000×1000 ×100= m×7x100 式中：一样品中葡萄糖的含量，质量百分率，%： 一标准曲线上查出的试液中葡萄糖含量，g: 一试样的质量，： -试液的定容体积，ml 测定时吸取试液的体积，mL。 (2)适用范围及特点 本法屈国家标准分析法GB/T16285-1996),最低检出限量为0.01emL,为仲裁法。由于葡萄糖氧化 酶(GOD)具有专一性，只能催化简萄糖水溶液中B-D.葡萄糖被氧化，不受其它还原糖的干扰，因此测 定结果较直接滴定法和高锰酸钾法准确。适用于各类食品中葡萄糖的测定，也适用于食品中其它组分转化
本法是微量法，适用于葡萄糖和果糖共存时果糖的测定。显色剂半胱氨酸和咔唑可与所有糖类反应， 但果糖发色程度远远超过葡萄糖，即使葡萄糖含量高于果糖 1 倍，对测定结果影响也不大，因蔗糖在此测 定条件下会水解，增加果糖含量，故此法不能用于有蔗糖共存的样品测定。 （3）说明 样品处理液含酮糖控制在 5～50µg/mL，用亚铁氰化钾和硫酸锌溶液澄清样品。测定时必须将样品处 理液置于冰水浴中，缓缓加入硫酸溶液。冷却后再加入咔唑乙醇溶液，在 40℃水浴中加热 30min，冷却后 测定吸光度。详见 GB/T16285-1996。 4.旋光法(ICUMSA) （1）原理 葡萄糖、果糖、麦芽糖及乳糖等还原糖分子中具有不对称碳原子，故有旋光性。用旋光仪测定旋光度， 在一定的条件下，旋光度的大小与试样中这些还原糖含量呈线性关系。 （2）适用范围及特点 该法简单、快速，在制糖、食品、发酵厂和一些检验部门，常用于商品葡萄糖、果糖、麦芽糖等的测 定。但被测糖溶液中常含有其它的糖和电解质等光学活性物质，将影响被测物质旋光度的大小，因此本法 适合于纯度较高的糖溶液的测定。 （3）说明与讨论 ①由于葡萄糖等在溶解之后，常发生变旋作用。因此用旋光法测定这些糖时，宜放置过夜再测定。若 需立即测定，可将糖液调为中性加热至沸，或加几滴氨水后再定容。 ②本法适用于浅色和低浊度的糖液测定，若糖液颜色太深或混浊度太高，不能直接测定旋光度值，需 要用中性醋酸铅澄清。 ③用待测溶液将旋光管至少冲洗 2 次，并将溶液装满观测管，注意不使观测管内夹带空气泡。将帽盖 旋紧于旋光管上，但仅须旋至防止溶液漏出的程度，过紧可能使盖玻璃变形并产生光学活性。并尽量少用 手接触旋光管。 ④ICUMSA 法规定旋光度的标准温度为 20.0℃，因此测定旋光度的待测液及仪器的温度应保持在 20.0 ±0.1℃。 5.酶-比色法 （1）原理 葡萄糖氧化酶（GOD）在有氧条件下，催化β-D-葡萄糖（葡萄糖水溶液状态）氧化，生成 D-葡萄糖 酸-δ-内酯和过氧化氢，受过氧化物酶（POD）催化，过氧化氢与 4-氨基安替比林和苯酚生成红色醌亚胺。 在波长 505nm 处测定醌亚胺的吸光度，可计算出食品中葡萄糖的含量。计算公式如下： 10000 100 1000 1000 1 1 2 1 2 × × × = × × × = V V m C V V m C X 式中：X──样品中葡萄糖的含量，质量百分率，％； C──标准曲线上查出的试液中葡萄糖含量，µg； m──试样的质量，g； V1──试液的定容体积，mL； V2──测定时吸取试液的体积，mL。 （2）适用范围及特点 本法属国家标准分析法(GB/T16285-1996)，最低检出限量为 0.01µg/mL，为仲裁法。由于葡萄糖氧化 酶（GOD）具有专一性，只能催化葡萄糖水溶液中β-D-葡萄糖被氧化，不受其它还原糖的干扰，因此测 定结果较直接滴定法和高锰酸钾法准确。适用于各类食品中葡萄糖的测定，也适用于食品中其它组分转化
为葡萄糖的测定。 (3)说明与讨论 ①葡萄糖组合试剂盒由三瓶试剂组成。1号瓶内含0.2molL磷酸盐缓冲溶液(pH=7)100mL,其中 4氨基安替比林为0.00154molL:2号瓶内含0.2molL苯酚溶液100mL:3号瓶内含萄萄糖氧化酶和过室 化氢酶。1、2、3号瓶须在4℃左右保存。用时将1号瓶和2号瓶的物质充分混合均匀，再将3号瓶的物 质溶解其中，使葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶完全溶解即得酶试剂溶液，此溶液须在4℃左右保存，有效期 一个月。 ②试液制各时，对不含蛋白质的试样。用重蒸榴水溶解试样，过波，弃去最初滤液，得试液：对含否 白质的试样，先用亚铁氯化钾溶液、硫酸锌溶液和氢氧化钠溶液沉淀蛋白质等杂质，再过滤， 弃去初滤 得试液。对含二氧化碳的样品，可取一定量样品于三角瓶中，旋摇至基本无气泡，然后置沸水浴中回流处 理10mi,取出冷却至室温。试液中葡萄糖含量大于300gmL时，应适当增加定容体积。 6南电极法 (1)原理 葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧条件下催化B一葡萄糖（葡萄糖水溶液状态）氧化，生成D葡萄糖酸 6内酯和过氧化氢。 CoH106+0,e0DCH100,+H0, 生成的过氧化氢与过氧化氢电极接触产生电流。该电流值与BD葡萄糖的浓度呈线性比例，在酶电极 葡萄糖分析仪上直接显示葡萄熊令量。可可按下面公式计算： RxV X=1000×mx100= 100 1000×m 式中：X一样品中葡萄糖的含量，质量百分率，%： R一仪器则定俏，mg/100mL: -试液的定容体积，mL: 试样的质量，g。 (2)适用范围及特 本法属国家标准分析法(GB/T16285-1996),最低检出限量为1.0mg100mL,为快速法。由于葡萄氧 化酶(GO0D)具有专一性，只能催化葡萄糖水溶液中B-D-葡萄糖被氧化，不受其它还原糖的干扰，因此 测定结果较直接滴定法和高锰酸钾法准确。适用于各类食品中葡萄糖的测定，也适用于食品中其它组分转 化为葡萄糖的测 (3)说明与讨论 用葡萄糖组合试剂盒测定，组合试剂盒由葡萄糖氧化酶膜圈、复合试剂和BD葡萄糖标准溶液三部 分组成。 ②试液制时对一般固体试样和固液体试样。用蒸榴水溶解试样用快速滤纸或脱脂棉讨滤。弃去 初滤液，收集1~2mL滤液于带盖小试管中 对水果、蔬菜试样 定量煮沸的蒸馏水和组合试剂盒 中的缓冲液，并继续煮沸3~5m,冷却至室温后用研钵研细或用组织捣碎机捣碎，用蒸馏水稀释定容， 用快速过滤纸或脱脂棉过滤。弃去初滤液，收集1~2mL滤液于带盖小试管中：对食用葡萄糖试样，用燕 馏水溶解后煮沸2mi,冷却后用蒸馏水稀释至刻度，摇匀. ③测定时首先将电极表面清理干净，吸取由复合试剂配成的缓神溶液滴在电极表面。用小短子取一片 酶膜圈，安装在电极表面，使酶膜圈中心和电极中心的白金完全贴紧，形成无气泡的薄层液体，然后将电 极安装在反应池内。开动仪器，缓冲溶液即自动进入反应池，并自行冲洗，当仪器出现进样指令后，将 准溶液注入进样口内。20一40s后仪器自动显示标准溶液的指示值，再等30一60s,仪器自行完成神洗过程 即可重复注入标准溶液数次，直至仪器显示允许开始测定样品。当连续两次标准溶液显示值的相对误差小 于20%时，即完成仪器校正步骤。然后准确注入试样，20~40s后读取显示值。 ④当样品中葡萄糖含量小于1.0%时，两次测定值不得超过其平均值的5.0%：当样品中简萄糖含量大 于或等于1.0%时，两次测定值不得超过其平均值的2.0%
为葡萄糖的测定。 （3）说明与讨论 ①葡萄糖组合试剂盒由三瓶试剂组成。1 号瓶内含 0.2mol/L 磷酸盐缓冲溶液（pH=7）100 mL，其中 4-氨基安替比林为 0.00154mol/L；2 号瓶内含 0.2mol/L 苯酚溶液 100 mL；3 号瓶内含葡萄糖氧化酶和过氧 化氢酶。1、2、3 号瓶须在 4℃左右保存。用时将 1 号瓶和 2 号瓶的物质充分混合均匀，再将 3 号瓶的物 质溶解其中，使葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶完全溶解即得酶试剂溶液，此溶液须在 4℃左右保存，有效期 一个月。 ②试液制备时，对不含蛋白质的试样，用重蒸馏水溶解试样，过滤，弃去最初滤液，得试液；对含蛋 白质的试样，先用亚铁氰化钾溶液、硫酸锌溶液和氢氧化钠溶液沉淀蛋白质等杂质，再过滤，弃去初滤液， 得试液。对含二氧化碳的样品，可取一定量样品于三角瓶中，旋摇至基本无气泡，然后置沸水浴中回流处 理 10min，取出冷却至室温。试液中葡萄糖含量大于 300µg/mL 时，应适当增加定容体积。 6.酶-电极法 （1）原理 葡萄糖氧化酶（GOD）在有氧条件下催化β－葡萄糖（葡萄糖水溶液状态）氧化，生成 D-葡萄糖酸- δ-内酯和过氧化氢。 生成的过氧化氢与过氧化氢电极接触产生电流。该电流值与β-D-葡萄糖的浓度呈线性比例，在酶电极 葡萄糖分析仪上直接显示葡萄糖含量。可按下面公式计算： m m R V R V X × × × = × × = 1000 100 100 1000 式中：X──样品中葡萄糖的含量，质量百分率，％； R──仪器测定值，mg／100mL； V──试液的定容体积，mL； m──试样的质量，g。 （2）适用范围及特点 本法属国家标准分析法(GB/T16285-1996)，最低检出限量为 1.0mg/100mL，为快速法。由于葡萄糖氧 化酶（GOD）具有专一性，只能催化葡萄糖水溶液中β-D-葡萄糖被氧化，不受其它还原糖的干扰，因此 测定结果较直接滴定法和高锰酸钾法准确。适用于各类食品中葡萄糖的测定，也适用于食品中其它组分转 化为葡萄糖的测定。 （3）说明与讨论 ①用葡萄糖组合试剂盒测定，组合试剂盒由葡萄糖氧化酶膜圈、复合试剂和β-D-葡萄糖标准溶液三部 分组成。 ②试液制备时，对一般固体试样和固液体试样，用蒸馏水溶解试样，用快速滤纸或脱脂棉过滤。弃去 初滤液，收集 1～2mL 滤液于带盖小试管中；对水果、蔬菜试样，加入一定量煮沸的蒸馏水和组合试剂盒 中的缓冲液，并继续煮沸 3～5min，冷却至室温后用研钵研细或用组织捣碎机捣碎，用蒸馏水稀释定容， 用快速过滤纸或脱脂棉过滤。弃去初滤液，收集 1～2mL 滤液于带盖小试管中；对食用葡萄糖试样，用蒸 馏水溶解后煮沸 2min，冷却后用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。 ③测定时首先将电极表面清理干净，吸取由复合试剂配成的缓冲溶液滴在电极表面。用小镊子取一片 酶膜圈，安装在电极表面，使酶膜圈中心和电极中心的白金完全贴紧，形成无气泡的薄层液体，然后将电 极安装在反应池内。开动仪器，缓冲溶液即自动进入反应池，并自行冲洗，当仪器出现进样指令后，将标 准溶液注入进样口内。20～40s 后仪器自动显示标准溶液的指示值，再等 30～60s，仪器自行完成冲洗过程， 即可重复注入标准溶液数次，直至仪器显示允许开始测定样品。当连续两次标准溶液显示值的相对误差小 于 2.0%时，即完成仪器校正步骤。然后准确注入试样，20～40s 后读取显示值。 ④当样品中葡萄糖含量小于 1.0%时，两次测定值不得超过其平均值的 5.0%；当样品中葡萄糖含量大 于或等于 1.0%时，两次测定值不得超过其平均值的 2.0%